[發(fā)明專利]將雞膽中的鵝去氧膽酸和膽酸合成熊去氧膽酸的方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201810179875.0
• 申請(qǐng)日: 2018-03-05
• 公開（公告）號(hào): CN108218943B
• 公開（公告）日: 2020-06-05
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 鄧家國(guó);李國(guó)軍;蔡宏軍;雷平
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 常德云港生物科技有限公司
• 主分類號(hào): C07J9/00
• 分類號(hào): C07J9/00
• 代理公司: 常德市長(zhǎng)城專利事務(wù)所(普通合伙) 43204
• 代理人: 游先春

1.將雞膽中的鵝去氧膽酸和膽酸合成熊去氧膽酸的方法，其特征在于，制備過程如下：

（1）萃?。喝‰u膽汁酸50-100kg，加入酯類溶劑250-500kg，攪拌下調(diào)節(jié)PH值為2-3，將總膽酸萃取到酯類溶劑中，靜置，分層，棄去下層水相，得總膽酸萃取液；

（2）成鹽結(jié)晶：向步驟（1）制備的萃取液中加入胺類溶劑5-10kg，使總膽酸成胺鹽結(jié)晶，分離，得總膽酸胺鹽結(jié)晶；

向上述胺鹽結(jié)晶中加入50-100kg水與2-4kg氫氧化鈉，加熱堿解，攪拌下用稀鹽酸調(diào)節(jié)PH值為2-3析出膽酸結(jié)晶，得到總膽汁酸酸化物；

（3）氧化：將步驟（2）得到的總膽汁酸酸化物用甲醇50-100kg溶解，加入次氯酸鈣25-50kg，用乙酸調(diào)節(jié)PH值為3-4，將酸化物中的鵝去氧膽酸與膽酸進(jìn)行氧化，反應(yīng)完成后，邊攪拌邊加入100-200kg水，使總膽汁酸的氧化物析出結(jié)晶，分離，得到總膽汁酸的氧化物，所述氧化物中包含3-酮基膽烷酸、7-酮基膽烷酸與12-酮基膽烷酸；

（4）還原：向步驟（3）得到的包含有3-酮基膽烷酸、7-酮基膽烷酸與12-酮基膽烷酸的總膽汁酸的氧化物中，加入20-50mmol/L的磷酸二氫鈉水溶液200-400kg，用10mol/L的氫氧化鈉水溶液調(diào)節(jié)PH值為7.5-8.0，加熱攪拌使之溶解；再加入葡萄糖5-20kg、3a-羥基類固醇脫氫酶2-8kg、7β-羥基類固醇脫氫酶3.5-14kg、葡萄糖脫氫酶4-16kg、煙酰胺腺嘌呤二核苷酸4.5-18g和煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸7.5-30g；在溫度為26～30℃，PH值為7.5-8.0的條件下進(jìn)行反應(yīng)，反應(yīng)時(shí)間為4～8小時(shí)，反應(yīng)完全后，用稀鹽酸調(diào)節(jié)PH值為2-3，析出結(jié)晶，得到含3α,7β-二羥基-5β-膽烷酸與3α,7β-二羥基-12-酮基-5β-膽烷酸的混合物；

（5）黃鳴龍反應(yīng)：向步驟（4）得到的混合物中加入二乙二醇30-60kg溶解，加入氫氧化鈉調(diào)節(jié)PH值大于12，真空回收水分至溫度大于130℃，加入水合肼1-2kg，加熱回流反應(yīng)2-4小時(shí)；回收至溶液體系水分小于0.1%，保沸反應(yīng)2-4小時(shí)，至3α,7β-二羥基-12-酮基-5β-膽烷酸完全轉(zhuǎn)化為3α,7β-二羥基-5β-膽烷酸，即熊去氧膽酸；

向體系中加入10-20kg氫氧化鈉與10-20kg水，使熊去氧膽酸在強(qiáng)堿下成鈉鹽析出，分出二乙二醇，向熊去氧膽酸鈉鹽中加入水100-200kg，將殘留二乙二醇減壓回收完全后，用稀鹽酸調(diào)節(jié)PH值為2-3，析出熊去氧膽酸結(jié)晶，分離，干燥得熊去氧膽酸粗品，按鵝去氧膽酸和膽酸的有效含量計(jì)，轉(zhuǎn)化率大于96%。

2.如權(quán)利要求1所述的將雞膽中的鵝去氧膽酸和膽酸合成熊去氧膽酸的方法，其特征在于，步驟（1）中所述的酯類溶劑為乙酸乙酯、乙酸丁酯、乙酸丙酯中的一種。

3.如權(quán)利要求1所述的將雞膽中的鵝去氧膽酸和膽酸合成熊去氧膽酸的方法，其特征在于，步驟（2）中所述的胺類溶劑為仲 丁胺、三乙胺、三乙醇胺中的一種。