[發明專利]一種制備狂犬病結合疫苗的方法

有效

• 申請號: 201810179167.7
• 申請日: 2017-05-25
• 公開（公告）號: CN108295252B
• 公開（公告）日: 2020-05-01
• 發明（設計）人: 薛平;李銀波;王超;趙光偉;王巖;楊冬妮
• 申請（專利權）人: 成都安特金生物技術有限公司
• 主分類號: A61K39/205
• 分類號: A61K39/205;A61K39/385;A61P31/14
• 代理公司: 北京馳納智財知識產權代理事務所(普通合伙) 11367
• 代理人: 孫海波

1.一種制備狂犬病結合疫苗的方法，所述方法包括以下步驟：

（a）經純化制成狂犬病病毒抗原原液；

（b）將步驟（a）制備的狂犬病病毒抗原原液與載體蛋白進行化學鍵連接并純化，制成狂犬病病毒抗原-載體蛋白免疫原性結合物，所述載體蛋白是破傷風類毒素（TT），所述狂犬病病毒抗原和所述載體蛋白的化學鍵連接通過已二酸二酰肼（ADH）連接，所述狂犬病病毒抗原和ADH的化學鍵連接方法為碳二亞胺法；

（c）將步驟（b）制備的狂犬病病毒抗原-載體蛋白免疫原性結合物進行稀釋、配制、分裝成為成品疫苗。

2.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述狂犬病病毒抗原包括狂犬病全病毒顆粒、經重組表達的狂犬病病毒樣顆粒、狂犬病全病毒顆粒經裂解后制備的狂犬病病毒外膜片段、從狂犬病病毒分離純化的狂犬病病毒糖蛋白、從狂犬病病毒分離純化的核蛋白、從狂犬病病毒分離純化的磷蛋白、從狂犬病病毒分離純化的基質蛋白、從狂犬病病毒分離純化的多聚酶、經重組表達的狂犬病病毒糖蛋白、經重組表達的狂犬病病毒核蛋白、經重組表達的狂犬病病毒磷蛋白、經重組表達的狂犬病病毒基質蛋白、經重組表達的狂犬病病毒多聚酶中的至少一種。

3.根據權利要求2所述的方法，其特征在于，步驟（a）中，所述狂犬病病毒抗原原液為將狂犬病病毒固定毒種接種細胞、培養、收獲病毒液、滅活、純化制成狂犬病全病毒顆粒原液。

4.根據權利要求2所述的方法，其特征在于，步驟（a）中，所述狂犬病病毒抗原原液為經重組表達、純化制成狂犬病病毒樣顆粒原液。

5.根據權利要求2所述的方法，其特征在于，步驟（a）中，所述狂犬病病毒抗原原液為按照如下步驟獲得的狂犬病病毒外膜片段原液，狂犬病病毒固定毒種接種細胞、培養、收獲病毒液、滅活、純化而制成的狂犬病全病毒顆粒原液；上述步驟中制備的狂犬病全病毒顆粒原液經裂解、純化制成狂犬病病毒外膜片段原液。

6.根據權利要求2所述的方法，其特征在于，步驟（a）中，所述狂犬病病毒抗原原液為經純化制成狂犬病病毒糖蛋白原液。

7.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述狂犬病結合疫苗包含佐劑。

8.根據權利要求7所述的方法，其特征在于，所述佐劑包含鋁佐劑、磷酸鈣佐劑、霍亂毒素（CT）、霍亂毒素B亞單位（CTB）、百日咳毒素（PT）、百日咳毒素B亞單位（PTB）、百日咳絲狀血凝素（FHA）、百日咳粘附素（PRN）、皁角素QS-21、α-生育酚、角鯊烯、類脂體、脂質體（liposomes）、單磷酸類脂A（MPL-A）、MF59、類病毒顆粒脂蛋白體（Virosomes）、聚乙交酯（PLA）微球、聚乳酸-乙醇酸（PLGA）微球、脂質-膽固醇（DC-Chol）、二甲基雙十八基季銨溴化物（DDA）、免疫刺激復合物(ISCOM)、Montanide ISA系列佐劑、AS系列佐劑、胞壁酰二肽（MDP）、細菌脂多糖（OM-174）、大腸桿菌不耐熱毒素（LT）、IL-1、IL-2、IL-6、IL-12、IL-15、IL-18、IFN-γ、GM-CSF、CpG寡核苷酸、海藻糖二霉菌酸酯（TDM）、含有聚次黃嘌呤核苷酸（Poly I）和/或聚胞嘧啶核苷酸（Poly C）的皮卡佐劑的物質中的至少一種。

9.根據權利要求8所述的方法，其特征在于，Montanide ISA系列佐劑為MontanideISA50、Montanide ISA51、Montanide ISA206、Montanide ISA720。

10.根據權利要求8所述的方法，其特征在于，AS系列佐劑為AS01、AS02、AS03、AS04。