[發(fā)明專利]一種核酸測序文庫及其構建方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201810176919.4
• 申請日: 2018-03-04
• 公開（公告）號: CN110219054B
• 公開（公告）日: 2020-10-02
• 發(fā)明（設計）人: 朱修銳;袁國紅;孟凡琳;郭永;王勇斗
• 申請（專利權）人: 清華大學;北京羿賽生物科技有限公司
• 主分類號: C40B40/06
• 分類號: C40B40/06;C40B50/06;C12N15/10
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種用于核酸測序的文庫，其特征在于，所述核酸文庫包括式1和式2兩種形式的序列，式1和式2中的正義鏈序列從左到右的方向是5’端到3’端：

；其中U和V分別為測序平臺能識別的一個已知序列，所述V的部分或全部序列為測序讀數(shù)的引物，U^*和V*分別是所述U和所述V的互補序列；

F和H分別為測序平臺能識別的一個已知序列，所述F的部分或全部序列為測序讀數(shù)的引物，其5’端的部分或全部序列與所述V的3’端的部分或全部序列互補；F*和H*分別是所述F和所述H的互補序列，所述F*的部分或全部序列為測序讀數(shù)的引物；

Y_c和Y_d為序列長度確定的隨機序列文庫Y中的兩種不同序列，Y_c*和Y_d*分別是所述Y_c和所述Y_d的互補序列；

W、B和D分別為三種已知序列，W^*、B*和D*分別是所述W、B和D的互補序列；

Tran為轉座酶能識別的一個已知序列，Tran*是所述Tran的互補序列；

X_m為長度確定的隨機序列文庫X中的一種序列，X_m*是所述X_m的互補序列；

Seq為待測序核酸一種片段化核酸序列的正義鏈，Seq*是所述Seq的互補序列；和

上述各序列之間可選地存在長度確定的隨機序列。

2.根據(jù)權利要求1所述的用于核酸測序的文庫，其特征在于，當所述U和所述V之間存在長度確定的隨機序列，該隨機序列的長度與所述隨機序列文庫Y中隨機序列的長度不同。

3.根據(jù)權利要求1所述的用于核酸測序的文庫，其特征在于，在所述序列W和所述序列B之間存在長度確定的隨機序列文庫Z中的一種序列Z_k。

4.根據(jù)權利要求3所述的用于核酸測序的文庫，其特征在于，所述Z_k為2-12個堿基長度的序列。

5.根據(jù)權利要求4所述的用于核酸測序的文庫，其特征在于，所述Z_k 為6個或8個堿基長度的序列。

6.根據(jù)權利要求1所述的用于核酸測序的文庫，其特征在于，所述U和所述H分別為10-40個堿基長度的序列。

7.根據(jù)權利要求6述的用于核酸測序的文庫，其特征在于，所述U是5’-AAT GAT ACGGCG ACC ACC GAG ATC T-3’，和所述H是5’-ATC TCG TAT GCC GTC TTC TGC TTG-3’。

8.根據(jù)權利要求1所述的用于核酸測序的文庫，其特征在于，所述V和所述F分別為10-60個堿基長度的序列。

9.根據(jù)權利要求8所述的用于核酸測序的文庫，其特征在于，所述V為5’-ACA CTC TTTCCC TAC ACG ACG CTC TTC CGA TC-3’，和所述F為5’-GAT CGG AAG AGC ACA CGT CTG AACTCC AGT CAC-3’。

10.根據(jù)權利要求1所述的用于核酸測序的文庫，其特征在于，所述隨機序列文庫Y中隨機序列為2-12個堿基長度的序列。

11.根據(jù)權利要求10所述的用于核酸測序的文庫，其特征在于，所述隨機序列文庫Y中隨機序列為6個或8個堿基長度的序列。

12.根據(jù)權利要求1所述的用于核酸測序的文庫，其特征在于，所述W為1-15個堿基長度的序列。

13.根據(jù)權利要求12所述的用于核酸測序的文庫，其特征在于，所述W為1個或3個堿基長度的序列。