[發明專利]一種穩定同位素標記的3-甲基-喹噁啉-2-羧酸及其合成方法

有效

• 申請號: 201810174620.5
• 申請日: 2018-03-02
• 公開（公告）號: CN110218194B
• 公開（公告）日: 2023-03-31
• 發明（設計）人: 陳武煉
• 申請（專利權）人: 上海安譜實驗科技股份有限公司
• 主分類號: C07D241/44
• 分類號: C07D241/44;C07B59/00
• 代理公司: 上海科律專利代理事務所(特殊普通合伙) 31290
• 代理人: 金碎平;袁亞軍

本發明公開了一種穩定同位素標記的3?甲基?喹噁啉?2?羧酸及其合成方法，所述合成方法包括以下步驟：S1：乙酰乙酸酯在有機酸催化作用下，與亞硝酸鹽反應，得到2?羥亞氨基?乙酰乙酸酯；S2：所述2?羥亞氨基?乙酰乙酸酯在乙酸催化下，與穩定同位素標記的苯胺發生縮合反應后，再加入三氯氧磷，反應得到同位素標記的3?甲基?喹噁啉?2?羧酸酯；S3：在堿性條件下，將穩定同位素標記的3?甲基?喹噁啉?2?羧酸酯水解，反應結束后調節pH至酸性后，穩定同位素標記的3?甲基?喹噁啉?2?羧酸從水溶液中析出。本發明合成方法不僅制備成本較低，實驗步驟少，而且其純度及同位素豐度都98％以上，完全可以作為檢測3?甲基?喹噁啉?2?羧酸的內標物使用，大大降低了檢測成本。

技術領域

本發明涉及同位素標記領域，特別是涉及一種穩定同位素標記的3-甲基-喹噁啉-2-羧酸及其合成方法。

背景技術

喹乙醇，又名倍育諾、快育靈等，因其抗菌性能好，尤其是對革蘭陰性菌特別敏感。不僅如此，喹乙醇還具有促進蛋白同化作用，提高飼料轉化率，使豬增重加快。因此，在七八十年代，喹乙醇在全球范圍內被廣泛用于養殖業。隨著相關研究的不斷深入，發現其具有DNA損傷、致畸等毒副作用。基于此，歐盟早在1999年便禁止在動物養殖過程中使用該獸藥。在我國，《中國獸藥典》已明確規定，喹乙醇被禁止用于家禽以及水產養殖。所以，對喹乙醇的檢測是十分必要的。然而，由于喹乙醇不是很穩定，在生物體內易被代謝為3-甲基-喹噁啉-2-羧酸，因此世界衛生組織將3-甲基-喹噁啉-2-羧酸認定為喹乙醇的殘留標志物。我國也在2014年起將3-甲基-喹噁啉-2-羧酸認定為必檢項目。

目前，針對3-甲基-喹噁啉-2-羧酸的檢測主要有高效液相色譜法和液相色譜串聯質譜法。高效液相色譜法儀器要求低，方法簡單，但是檢測限較高，無法進行痕量檢測。液相色譜串聯質譜法檢測限低，越來越多的樣品已經采用該方法進行檢測。但是該法需要用到穩定同位素標記的3-甲基-喹噁啉-2-羧酸作為內標物，此內標物完全依賴進口，而且價格極其昂貴，1mg便需要幾千元。國內外都沒有相關的文獻和專利報道過該物質的合成方法。因此，開發穩定同位素標記的3-甲基-喹噁啉-2-羧酸的合成方法便顯得十分重要與迫切，不僅可以打破國外的壟斷，而且可以降低檢測成本，具有十分廣泛的社會效益和經濟效益。

發明內容

本發明所要解決的技術問題是提供一種穩定同位素標記的3-甲基-喹噁啉-2-羧酸及其合成方法，制備原料廉價、易得，實驗步驟少，操作簡單，純度及同位素豐度都在98％以上，滿足作為檢測3-甲基-喹噁啉-2-羧酸的內標物使用。

本發明為解決上述技術問題而采用的技術方案是提供一種穩定同位素標記的3-甲基-喹噁啉-2-羧酸的合成方法，所述其特征在于，包括以下步驟：S1：乙酰乙酸酯在有機酸催化作用下，與亞硝酸鹽反應，得到2-羥亞氨基-乙酰乙酸酯；S2：所述2-羥亞氨基-乙酰乙酸酯在乙酸催化下，與穩定同位素標記的苯胺發生縮合反應后，再加入三氯氧磷，反應得到同位素標記的3-甲基-喹噁啉-2-羧酸酯；S3：在堿性條件下，將穩定同位素標記的3-甲基-喹噁啉-2-羧酸酯水解，反應結束后調節pH至酸性后，穩定同位素標記的3-甲基-喹噁啉-2-羧酸從水溶液中析出。

進一步地，所述步驟S1中的有機酸為甲酸、乙酸、丙酸或三氟乙酸；所述乙酰乙酸酯為乙酰乙酸甲酯、乙酰乙酸乙酯、乙酰乙酸異丙酯或乙酰乙酸苯甲酯；所述亞硝酸鹽為亞硝酸鈉或亞硝酸鉀。

進一步地，所述步驟S1中亞硝酸鹽與乙酰乙酸酯的摩爾比為1∶1.5-2.0，反應溫度為0-10℃，反應時間為1-2小時。

進一步地，所述步驟S2中的反應溶劑為苯、甲苯或硝基苯。

進一步地，所述步驟S2中的反應溫度為90-100℃，2-羥亞氨基-乙酰乙酸酯與穩定同位素標記的苯胺的摩爾比為1.2-1.0:1，三氯氧磷與穩定同位素標記的苯胺的摩爾比為2.0-3.0:1。

進一步地，所述步驟S2中的堿為氫氧化鈉、氫氧化鉀或氫氧化鋰。