[發明專利]一種熱帶假絲酵母菌及其應用、以及一種長鏈二元酸的生產方法

在審

• 申請號: 201810172091.5
• 申請日: 2018-03-01
• 公開（公告）號: CN110218661A
• 公開（公告）日: 2019-09-10
• 發明（設計）人: 徐敏;郝英利;楊晨;秦兵兵;李乃強;劉修才
• 申請（專利權）人: 上海凱賽生物技術研發中心有限公司;凱賽生物產業有限公司
• 主分類號: C12N1/16
• 分類號: C12N1/16;C12P7/64;C12R1/74
• 代理公司: 北京律智知識產權代理有限公司 11438
• 代理人: 王瑩;于寶慶

本發明公開了一種熱帶假絲酵母菌(Candida tropicalis)菌株CAT H1614、包括其的菌劑，其應用和一種發酵生產長鏈二元酸的方法及長鏈二元酸的制備方法。本發明的熱帶假絲酵母菌菌株CAT H1614在pH值低于7.0的環境下可長時間保持高活力，由此特別適用于生物法生產長鏈二元酸，發酵過程產酸快，產量高，還能降低發酵周期。本發明提供的長鏈二元酸發酵方法和制備方法具有顯著的成本優勢，而且能有效地減輕對資源和環境的壓力，因此具有非常明顯的工業化價值優勢。

技術領域

本發明涉及發酵領域，具體涉及一種熱帶假絲酵母菌及其在發酵領域中的應用，以及一種長鏈二元酸的生產方法。

背景技術

長鏈二元酸(LCDA)的通式為(HOOC(CH₂)nCOOH，n≥7)，有著非常廣泛的用途，以長鏈二元酸為原料可以合成特種尼龍、高級香料、高檔熱熔膠、耐寒增塑劑、高級潤滑油、高級防銹劑、高級油漆和涂料等。長鏈二元酸通?？梢杂没瘜W法或生物法來合成?；瘜W法合成路線長，反應需要高溫高壓，對催化劑要求比較苛刻，因此在工業規模上的長鏈二元酸品種較少，只有十二碳長鏈二元酸等少數品種。而生物法是以長鏈烷烴為底物，通過微生物轉化得到，其生產過程常溫、常壓，可以規?；a如從C9到C18等多種長鏈二元酸。

生物法生產長鏈二元酸已經被研究了很多年。學者最早從油田中篩選到能生產長鏈二元酸的菌株，對菌株進行誘變來提高長鏈二元酸的產率。有的學者也研究了長鏈二元酸合成過程中的關鍵酶。國外研究長鏈二元酸的文獻大多是對菌株進行基因改造，通過阻斷或者弱化脂肪酸β氧化的相關酶系，強化脂肪酸α-ω氧化的酶系來提高產品的產率。公開的專利如CN 1071951A、CN 1067725C、CN 1259424C、200410018255.7、200610029784.6等都提供了微生物發酵生產長鏈二元酸的方法，這些方法都要求在發酵過程中，特別是在產酸期要將發酵液的pH值調整到7.0以上，主要的原因是：第一，發酵菌株熱帶假絲酵母在偏堿性環境下有較高的酶活力，因此堿性條件催化效率高；第二，在堿性環境下，可以使得長鏈二元酸以溶解于水的二元酸的鹽形式存在，使得發酵過程中，保持良好的傳質。因此，現有常規的發酵生產長鏈二元酸的方法中，都要求在發酵時，特別是產酸期(轉化期)，發酵體系pH值大于7.0。并且，在發酵過程中，隨著長鏈二元酸的積累量增加，需要添加大量的堿來中和生成的長鏈二元酸。在發酵完畢的發酵液中，長鏈二元酸以鹽的形式存在于發酵液中，在提取純化二元酸的過程中又需要加大量的酸將體系中長鏈二元酸的鹽轉化為長鏈二元酸產品，造成發酵處理液體系中鹽的濃度高達50000-70000ug/ml，這些高鹽廢水難以處理，對環境來說是非常重要的挑戰，嚴重影響了生物法長鏈二元酸產業的發展。

專利US 6569670B2報道了在pH值5.8的環境下用脂肪酸為原料生產長鏈二元酸的方法，其主要原因是在pH值7.0以上，脂肪酸會以脂肪酸鹽的形式存在，特別容易起泡，導致發酵無法進行，所以必須在較低的pH值下進行發酵，但低pH值下菌株代謝緩慢，生產效率低。

發明內容

為克服現有的發酵生產長鏈二元酸工藝中存在的缺陷，本發明的第一個目的是提供一種新型的熱帶假絲酵母菌，其在pH值7.0以下的發酵體系中也具有很高活性，非常適用于發酵生產長鏈二元酸。

本發明的第二個目的是提供一種包括所述熱帶假絲酵母菌的菌劑。

本發明的第三個目的是提供一種所述熱帶假絲酵母菌的應用。

本發明的第四個目的是提供一種發酵生產長鏈二元酸的方法。

本發明的第五個目的是提供一種長鏈二元酸的制備方法。

本發明的第六個目的是提供一種長鏈二元酸。

本發明提供的熱帶假絲酵母菌(Candida tropicalis)菌株CAT H1614，其保藏編號為CCTCC NO：M 2013143。