[發明專利]一種熱帶假絲酵母菌及其應用、以及一種長鏈二元酸的生產方法

在審

• 申請號: 201810172091.5
• 申請日: 2018-03-01
• 公開（公告）號: CN110218661A
• 公開（公告）日: 2019-09-10
• 發明（設計）人: 徐敏;郝英利;楊晨;秦兵兵;李乃強;劉修才
• 申請（專利權）人: 上海凱賽生物技術研發中心有限公司;凱賽生物產業有限公司
• 主分類號: C12N1/16
• 分類號: C12N1/16;C12P7/64;C12R1/74
• 代理公司: 北京律智知識產權代理有限公司 11438
• 代理人: 王瑩;于寶慶

1.一種熱帶假絲酵母菌(Candida tropicalis)菌株CAT H1614，其保藏編號為CCTCCNO：M 2013143。

2.包括如權利要求1所述的熱帶假絲酵母菌菌株CAT H1614的菌劑。

3.如權利要求1所述的熱帶假絲酵母菌菌株CAT H1614在發酵制備長鏈二元酸中的應用。

4.一種發酵生產長鏈二元酸的方法，其特征在于，采用如權利要求1所述的熱帶假絲酵母菌菌株CAT H1614進行發酵生產長鏈二元酸。

5.如權利要求4所述的方法，其特征在于，所述發酵過程包括菌株生長期和轉化期，其中，所述轉化期中，控制發酵體系的pH值為7.0以下；優選為4.0～6.8；更優選為5.0～6.5。

6.如權利要求5所述的方法，其特征在于，所述菌株生長至稀釋30倍后的菌體光密度OD₆₂₀大于0.5時，控制發酵體系的pH值為7.0以下；優選為4.0～6.8；更優選為5.0～6.5。

7.如權利要求4-6任一項所述的方法，其特征在于，用于所述發酵過程的底物包括烷烴，優選包括C9～C22的正烷烴；更優選包括C9～C18的正烷烴；最優選包括C10、C11、C12、C13、C14、C15或C16的正烷烴；

和/或，用于所述發酵過程的培養基包括以下成分(w/v)：葡萄糖1％～5％、玉米漿0.1％～0.9％、酵母膏0.1％～0.5％、硝酸鉀0.05％～1.2％、磷酸二氫鉀0.05％～1.0％、尿素0.05％～0.3％、硫酸銨0.05％～0.3％以及氯化鈉0.05％～0.2％；或者包括以下成分(w/v)：葡萄糖1％～5％、硝酸鉀0.05％～0.6％、磷酸二氫鉀0.02％～0.6％、硫酸銨0.05％～0.3％以及硫酸鎂0.05％～0.3％。

8.如權利要求4～7任一項所述的方法，其特征在于，所述發酵過程中，所述菌株的接種量為10％～30％；

和/或，溫度為28～32℃；

和/或，風量為0.3～0.7vvm；

和/或，壓力為0.05～0.14MPa；

和/或，所述菌株生長期中，發酵體系的pH值不低于3.0，優選為3.5～6.5。

9.一種長鏈二元酸的制備方法，包括：

S1：發酵制得長鏈二元酸發酵液；以及

S2：對所得的長鏈二元酸發酵液進行提取純化處理制得所述長鏈二元酸；

其中，所述步驟S1采用權利要求4～8任一項所述的方法制得所述長鏈二元酸發酵液。

10.如權利要求9所述的制備方法，其特征在于，所述步驟S2的提取純化處理包括：將所得的長鏈二元酸發酵液酸化，分離得固形物，再將所述固形物溶解在有機溶劑中，分離得清液，結晶，由此得到長鏈二元酸。

11.如權利要求10所述的制備方法，其特征在于，所述酸化的pH值為2.5～5，優選為3～4；

和/或，所述分離的方法為離心或過濾；

和/或，所述有機溶劑包括：醇、酸、酮和酯的一種或多種；其中，所述醇包括甲醇、乙醇、異丙醇和正丁醇中的一種或多種；所述酸包括乙酸；所述酮包括丙酮；所述酯包括乙酸乙酯和/或乙酸丁酯；

和/或，所述固形物溶解在有機溶劑后，脫色，再分離得清液，所述脫色的方法優選活性炭脫色；所述活性炭的添加量為不超過溶液體積的5％；所述脫色的溫度為85～100℃；所述脫色的時間為15～165min；

和/或，所述結晶為降溫結晶；所述降溫結晶包括以下步驟：降溫至65～80℃，保溫1～2小時后，再降溫至25～35℃，結晶；

和/或，所述結晶后，分離出晶體，由此得到長鏈二元酸；所述分離的方法為離心分離。

12.如權利要求10或11所述的制備方法制得的長鏈二元酸。