[發(fā)明專(zhuān)利]一種細(xì)胞培養(yǎng)基及其制備方法在審
| 申請(qǐng)?zhí)枺?/td> | 201810166153.1 | 申請(qǐng)日: | 2018-02-27 |
| 公開(kāi)(公告)號(hào): | CN108424874A | 公開(kāi)(公告)日: | 2018-08-21 |
| 發(fā)明(設(shè)計(jì))人: | 艾譞;林杰庚 | 申請(qǐng)(專(zhuān)利權(quán))人: | 廣州瑞貝斯藥業(yè)有限公司 |
| 主分類(lèi)號(hào): | C12N5/00 | 分類(lèi)號(hào): | C12N5/00 |
| 代理公司: | 廣州三環(huán)專(zhuān)利商標(biāo)代理有限公司 44202 | 代理人: | 宋靜娜;郝傳鑫 |
| 地址: | 510000 廣東省廣州市高新技術(shù)產(chǎn)業(yè)*** | 國(guó)省代碼: | 廣東;44 |
| 權(quán)利要求書(shū): | 查看更多 | 說(shuō)明書(shū): | 查看更多 |
| 摘要: | |||
| 搜索關(guān)鍵詞: | 凝集素 殼聚糖季銨鹽 細(xì)胞培養(yǎng)基 絲膠蛋白 淋巴細(xì)胞 類(lèi)胰島素生長(zhǎng)因子 表皮生長(zhǎng)因子 淋巴細(xì)胞增殖 絲膠蛋白溶液 體外細(xì)胞培養(yǎng) 細(xì)胞增殖能力 人血白蛋白 血球凝集素 血細(xì)胞 凝集 谷氨酰胺 精子細(xì)胞 免疫能力 細(xì)胞生長(zhǎng) 整體實(shí)驗(yàn) 存活率 維生素C 維生素E 制備 細(xì)胞 生長(zhǎng) | ||
1.一種細(xì)胞培養(yǎng)基,其特征在于,主要包括以下含量的組分,DMEM/F12培養(yǎng)基80~90v/v%、絲膠蛋白溶液25~500mg/ml、殼聚糖季銨鹽溶液2.0~5mg/ml、人血白蛋白35~70mg/ml、植物血球凝集素20~80mg/ml、維生素C 20~100ug/ml、維生素E 20~80ug/ml、表皮生長(zhǎng)因子0.5~10ng/ml、類(lèi)胰島素生長(zhǎng)因子5~20ng/ml、L-谷氨酰胺1~5mmol/ml。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的細(xì)胞培養(yǎng)基,其特征在于,主要包括以下含量的組分,DMEM/F12培養(yǎng)基80~90v/v%、絲膠蛋白溶液100~400mg/ml、殼聚糖季銨鹽溶液2.5~4mg/ml、人血白蛋白40~60mg/ml、植物血球凝集素50~60mg/ml、維生素C 50~80ug/ml、維生素E 20~80ug/ml、表皮生長(zhǎng)因子2~10ng/ml、類(lèi)胰島素生長(zhǎng)因子10~15ng/ml、L-谷氨酰胺2~5mmol/ml。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的細(xì)胞培養(yǎng)基,其特征在于,主要包括以下含量的組分,DMEM/F12培養(yǎng)基90v/v%、絲膠蛋白溶液200mg/ml、殼聚糖季銨鹽溶液3mg/ml、人血白蛋白40mg/ml、植物血球凝集素60mg/ml、維生素C 60ug/ml、維生素E 60ug/ml、表皮生長(zhǎng)因子5ng/ml、類(lèi)胰島素生長(zhǎng)因子10ng/ml、L-谷氨酰胺3mmol/ml。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的細(xì)胞培養(yǎng)基,其特征在于,主要包括以下含量的組分,DMEM/F12培養(yǎng)基85v/v%、絲膠蛋白溶液100mg/ml、殼聚糖季銨鹽溶液2.5mg/ml、人血白蛋白50mg/ml、植物血球凝集素50mg/ml、維生素C 50ug/ml、維生素E 20ug/ml、表皮生長(zhǎng)因子2ng/ml、類(lèi)胰島素生長(zhǎng)因子15ng/ml、L-谷氨酰胺2mmol/ml。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的細(xì)胞培養(yǎng)基,其特征在于,主要包括以下含量的組分,DMEM/F12培養(yǎng)基80v/v%、絲膠蛋白溶液400mg/ml、殼聚糖季銨鹽溶液4mg/ml、人血白蛋白60mg/ml、植物血球凝集素50mg/ml、維生素C 80ug/ml、維生素E 80ug/ml、表皮生長(zhǎng)因子10ng/ml、類(lèi)胰島素生長(zhǎng)因子15ng/ml、L-谷氨酰胺5mmol/ml。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的細(xì)胞培養(yǎng)基,其特征在于,所述絲膠蛋白溶液200mg/ml、殼聚糖季銨鹽溶液3mg/ml、植物血球凝集素60mg/ml。
7.一種如權(quán)利要求1至6任一項(xiàng)所述的細(xì)胞培養(yǎng)基的制備方法,其特征在于,包括以下步驟:
1)準(zhǔn)確稱(chēng)取相應(yīng)濃度的基礎(chǔ)培養(yǎng)基干粉、殼聚糖季銨鹽、維生素C、維生素E、人血白蛋白、植物血球凝集素溶于體積為800ml,溫度為20~30℃的超純水中,攪拌至溶解完全,得溶液A;
2)向溶液A中加入相應(yīng)濃度的絲膠蛋白溶液、表皮生長(zhǎng)因子、類(lèi)胰島素生長(zhǎng)因子、L-谷氨酰胺,攪拌均勻,加入溫度為20~30℃的超純水至體積為1L,得溶液B;
3)用其后加入1M HCl調(diào)pH值至7.2,得到溶液C;
4)將溶液用0.2um PVDF濾膜過(guò)濾除菌,即得。
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