[發明專利]一種UPLC-Q-Tof/MS同時測定保健酒中四種天然產物的方法

有效

• 申請號: 201810165820.4
• 申請日: 2018-02-28
• 公開（公告）號: CN108362805B
• 公開（公告）日: 2020-05-01
• 發明（設計）人: 馬金同;劉露;馬雷;胡心行;劉國英;李安軍;周慶伍;沈小梅
• 申請（專利權）人: 安徽瑞思威爾科技有限公司
• 主分類號: G01N30/06
• 分類號: G01N30/06;G01N30/88
• 代理公司: 安徽省合肥新安專利代理有限責任公司 34101
• 代理人: 喬恒婷

本發明公開了一種UPLC?Q?Tof/MS同時測定保健酒中四種天然產物的方法，首先使用Ben的C18色譜柱進行梯度洗脫分離，然后采用電噴霧離子源，在正離子模式下進行掃描，對四種天然產物對應的特征離子進行提取并獲得積分峰面積，從而實現對甜菜堿、蘆丁、白藜蘆醇、葉酸的快速分析鑒定。本發明快速、準確的同時檢測了保健酒中甜菜堿、蘆丁、白藜蘆醇、葉酸，并給出甜菜堿、蘆丁、白藜蘆醇、葉酸在質譜中的離子特征，從而可以實現對保健酒中甜菜堿、蘆丁、白藜蘆醇、葉酸準確定性定量。

技術領域

本發明涉及一種UPLC-Q-Tof/MS同時測定保健酒中四種天然產物的方法，屬于檢測技術領域。

背景技術

研究證明甜菜堿對人體心血管類、神經類、肝臟類和高半胱氨酸尿癥等疾病有一定的治療作用；白藜蘆醇具有抗腫瘤，降血壓，抗血小板聚集，抗細菌和真菌感染，影響胃酸分泌等多種生理活性；蘆丁作為黃酮類化合物的典型代表，具有抗自由基活性、抗脂質過氧化作用、抗病毒、拮抗血小板活化因子作用、抗急性胰腺炎、舒張血管以及對胃潰瘍的保護作用等生理活性或藥理作用；葉酸作為胎兒生長發育不可缺少的營養素，具有參與遺傳物質和蛋白質的代謝，影響動物胰腺的分泌，促進生長，提高機體免疫力等生理功能。目前關于4種天然產物的同時檢測方法鮮有報道。目前可見文獻中，4種天然產物表征需要凝膠滲透色譜和高效液相色譜分離純化，再試用質譜、核磁共振等手段進行表征。這一手段耗時長，步驟復雜，無法滿足快速分析檢測的要求。

保健酒中基質復雜、成分多樣，不僅干擾目標化合物的測定，還給儀器帶來損害，故有效的前處理方式是保健酒中天然產物測定一個亟待解決的難題。

發明內容

為了避免上述現有技術所存在的不足，本發明旨在提供一種UPLC-Q-Tof/MS(超高效液相色譜-四級桿串聯飛行時間質譜聯用)同時測定保健酒中四種天然產物的方法。本發明快速、準確的同時檢測了保健酒中甜菜堿、蘆丁、白藜蘆醇、葉酸，并給出甜菜堿、蘆丁、白藜蘆醇、葉酸在質譜中的離子特征，從而可以實現對保健酒中甜菜堿、蘆丁、白藜蘆醇、葉酸準確定性定量。本發明檢測方法可用于保健酒質量控制中。

本發明UPLC-Q-Tof/MS同時測定保健酒中四種天然產物的方法，首先使用Ben(表面帶電雜化顆粒)的C18色譜柱進行梯度洗脫分離，然后采用電噴霧離子源，在正離子模式下進行掃描，對四種天然產物對應的特征離子進行提取并獲得積分峰面積，從而實現對甜菜堿、蘆丁、白藜蘆醇、葉酸的快速分析鑒定。

本發明UPLC-Q-Tof/MS同時測定保健酒中四種天然產物的方法，包括如下步驟：

步驟1：標準品的準備

將甜菜堿、蘆丁、白藜蘆醇、葉酸分別用乙腈溶解，配成母液標品，母液標品的各濃度分別為甜菜堿100mg/L，蘆丁400mg/L，白藜蘆醇400mg/L，葉酸50mg/L；

步驟2：色譜檢測條件

色譜柱：ACQUITY UPLC Ben C18Column，2.1mm×100mm，1.7μm；

流動相：流動相A：1％甲酸水溶液，流動相B：乙腈；

流動梯度洗脫程序：0-2min，92％A+8％B～80％A+20％B；2-3min，80％A+20％B～70％A+30％B；3-4min，70％A+30％B～30％A+70％B，4-7min，70％A+30％B～92％A+8％B；7-10min，92％A+8％B，流速0.3mL/min；

柱溫：30℃；

進樣量5μL；

步驟3：質譜檢測條件