[發(fā)明專(zhuān)利]一種測(cè)定玉米須中黃酮類(lèi)成分含量的方法

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201810164051.6
• 申請(qǐng)日: 2018-02-27
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN108132317A
• 公開(kāi)（公告）日: 2018-06-08
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 劉景圣;張浩;趙城彬;張大力;董怡麟;許秀穎;曹勇;吳玉柱;鄭明珠;蔡丹;劉回民;李有寶;閔偉紅;習(xí)士霞;黃洪亮;劉惠麟
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)
• 主分類(lèi)號(hào): G01N30/02
• 分類(lèi)號(hào): G01N30/02;G01N30/06;G01N30/14;G01N30/54;G01N30/72
• 代理公司: 沈陽(yáng)東大知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 21109
• 代理人: 馬海芳

一種測(cè)定玉米須中黃酮類(lèi)成分含量的方法，屬于色譜?質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)領(lǐng)域。該方法包括(1)將玉米須粉末加入乙醇水溶液浸泡12h以上，振搖混勻，將混合均勻的溶液回流1～6h后，室溫冷卻，得到玉米須乙醇水溶液，將玉米須乙醇水溶液渦旋混勻，取上清液采用微孔濾膜過(guò)濾，得到檢測(cè)液；取檢測(cè)液進(jìn)行超高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜測(cè)試，對(duì)測(cè)試結(jié)果進(jìn)行分析，采用外標(biāo)法得到玉米須中黃酮類(lèi)成分含量。本方法建立了超高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜(UPLC?MS/MS)方法，同時(shí)測(cè)定玉米須中黃酮類(lèi)成分含量，該方法準(zhǔn)確性強(qiáng)、靈敏度高、分離速度快，能夠定性定量測(cè)定玉米須中的黃酮類(lèi)成分含量。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種測(cè)定玉米須中黃酮類(lèi)成分含量的方法。

背景技術(shù)

玉米須，別名玉麥須、玉蜀黍蕊、棒頭毛，是禾本科植物玉蜀黍Zeamays L.的干燥花絲和柱頭，在《中華本草》、《全國(guó)中草藥匯編》等藥學(xué)論著中均有記載?，F(xiàn)常用于藥茶，藥膳中，作為糖尿病、高血壓的輔助治療藥物。玉米須味甘、淡，性平，不僅入陽(yáng)明胃經(jīng)，而且歸腎、肝、膽經(jīng)，傳統(tǒng)用于利水消腫、清肝利膽。

我國(guó)是玉米產(chǎn)量大國(guó)，所以玉米須是一種來(lái)源豐富、價(jià)格低廉且易于采集的中藥材。而且，現(xiàn)代藥理研究結(jié)果表明，玉米須有降血糖，抗癌、抑菌、增強(qiáng)免疫功能、利尿、降血壓等作用?；瘜W(xué)研究表明，黃酮類(lèi)成分是玉米須的重要組成成分，且對(duì)藥理活性的發(fā)揮起到重要作用。如異鼠李素具有抗脂質(zhì)氧化、降低血清膽固醇及甘油三酯等作用，且能明顯抑制腫瘤細(xì)胞DNA生長(zhǎng)和增殖，對(duì)人體多種癌細(xì)胞株有殺傷作用；槲皮素對(duì)去甲腎上腺促人血管平滑肌細(xì)胞增殖有抑制作用；木犀草苷對(duì)心肌細(xì)胞損傷具有保護(hù)作用，并且可以抑制腫瘤細(xì)胞的增殖作用；而木犀草素近期發(fā)現(xiàn)其對(duì)腫瘤干細(xì)胞增殖具有顯著影響；刺芒柄花素對(duì)抗癌、改善骨質(zhì)疏松和改善婦女更年期癥狀等有一定的作用。由此可見(jiàn)，對(duì)玉米須中黃酮類(lèi)成分進(jìn)行質(zhì)量控制對(duì)其合理應(yīng)用具有重要意義。

現(xiàn)有的檢測(cè)技術(shù)中，液相色譜和質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)應(yīng)用廣泛，但是對(duì)于玉米須中含有的黃酮類(lèi)成分鮮有報(bào)道。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的是提供一種測(cè)定玉米須中黃酮類(lèi)成分含量的方法，本方法建立了超高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜(UPLC-MS/MS)方法，同時(shí)測(cè)定玉米須中黃酮類(lèi)成分含量，該方法準(zhǔn)確性強(qiáng)、靈敏度高、分離速度快，能夠定性定量測(cè)定玉米須中的黃酮類(lèi)成分含量。

為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用以下技術(shù)方案：

本發(fā)明的一種測(cè)定玉米須中黃酮類(lèi)成分含量的方法，包括以下步驟：

步驟1：玉米須中黃酮類(lèi)成分提取

(1)將玉米須粉末加入乙醇水溶液浸泡12h以上，振搖，得到混合均勻的溶液；

(2)將混合均勻的溶液回流1～6h后，室溫冷卻，得到玉米須乙醇水溶液，其質(zhì)量濃度為0.01～0.03g/ml；

(3)將玉米須乙醇水溶液渦旋混勻，取上清液采用微孔濾膜過(guò)濾，得到檢測(cè)液；

步驟2：測(cè)試

取檢測(cè)液進(jìn)行超高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜測(cè)試，對(duì)測(cè)試結(jié)果進(jìn)行分析，采用外標(biāo)法得到玉米須中黃酮類(lèi)成分含量；

其中，

(1)超高效液相色譜的測(cè)試條件為：

采用Thermo Hypersil GOLD色譜柱，選用流動(dòng)相進(jìn)行等度或梯度洗脫；進(jìn)樣量為5～10μL；柱溫為25～35℃；

所述的流動(dòng)相為甲醇-水、甲醇-0.1％甲酸水溶液、甲醇-水-冰醋酸、乙腈-水、乙腈-水-冰醋酸中的一種；