[發明專利]基于MOFs孔道限域效應的核酸轉染方法

有效

• 申請號: 201810163046.3
• 申請日: 2018-02-26
• 公開（公告）號: CN108410910B
• 公開（公告）日: 2022-08-05
• 發明（設計）人: 鄧鶴翔;周翔;彭雙;別秉霖
• 申請（專利權）人: 武漢大學
• 主分類號: C12N15/87
• 分類號: C12N15/87
• 代理公司: 武漢科皓知識產權代理事務所(特殊普通合伙) 42222
• 代理人: 薛玲

1.基于MOFs孔道限域效應的核酸轉染方法，其特征在于，包括如下步驟：

（1）制備孔徑和核酸匹配的MOFs材料；

（2）在步驟（1）所得MOFs材料中負載核酸分子，得到對核酸分子有限域效應的MOFs材料；

（3）將負載有核酸分子的MOFs材料用于免疫細胞轉染實驗；

步驟（1）中制備MOFs材料的方法，包括以下步驟：

（1a）將具有水楊酸結構的配體材料進行軸向的延伸，合成苯環數目為2或3的配體，所述配體的化學結構式為：

或；

（1b）將配體和鎳鹽溶解在N,N-二甲基甲酰胺中，然后加入水，乙醇和三乙胺的混合溶液，室溫反應一定時間即得到納米級的MOFs材料；

（1c）將制備的MOFs材料進行活化，得到低細胞毒性的納米級MOFs材料；

步驟（1a）中采用Suzuki偶聯反應，利用鈀催化劑，在氬氣保護氛圍中反應，通過柱層析的方式純化產物，實現苯環的依次遞增，具有水楊酸結構的配體材料為2,5-二羥基對苯二甲酸；

步驟（1b）中所述鎳鹽為六水硝酸鎳；乙醇和三乙胺的體積比為9：9：1；鎳鹽與配體的摩爾比為（2.5~3）：1，

所述核酸轉染方法為非治療目的。

2.根據權利要求1所述的基于MOFs孔道限域效應的核酸轉染方法，其特征在于，步驟（2）中負載核酸的方法包括溶液浸泡法，將不同孔徑的MOFs材料分別加入到含熒光標記的核酸分子的溶劑中，經攪拌、離心、洗滌得到負載熒光標記的核酸分子的MOFs材料。

3.根據權利要求1所述的基于MOFs孔道限域效應的核酸轉染方法，其特征在于，所述免疫細胞轉染實驗具體步驟為，負載熒光標記的核酸的MOFs材料分別與不同的免疫細胞進行孵育，然后檢測進入細胞內的熒光進行評估。