[發(fā)明專利]一種海洋低溫葡萄糖氧化酶及其在海產(chǎn)品保鮮中的應(yīng)用

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201810159029.2
• 申請日: 2018-02-26
• 公開（公告）號: CN108220262A
• 公開（公告）日: 2018-06-29
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 遲乃玉;李蓉;張慶芳;喬慧;王曉輝
• 申請（專利權(quán)）人: 大連大學
• 主分類號: C12N9/04
• 分類號: C12N9/04;A23B4/22;A23B4/20;A23L3/3571;A23L3/3562;C12R1/80
• 代理公司: 大連八方知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 21226
• 代理人: 朱秀芬

本發(fā)明屬于發(fā)酵工程領(lǐng)域，具體是一種海洋低溫葡萄糖氧化酶及其在海產(chǎn)品保鮮中的應(yīng)用。該酶產(chǎn)自海洋Penicillium crustosum（GenBank登錄號MG983981）。其應(yīng)用在海產(chǎn)品保鮮中，保鮮方法為將需要保鮮的海產(chǎn)品先在海洋低溫葡萄糖氧化酶溶液和葡萄糖溶液的混合液中浸漬2~20 min，浸漬后再置于保鮮盒中低溫保鮮；其中海洋低溫葡萄糖氧化酶溶液的濃度為10~60 mg/L，葡萄糖溶液的濃度為1~15 mg/L，海洋低溫葡萄糖氧化酶溶液與葡萄糖溶液混合的體積比為1:1~3。本發(fā)明低溫葡萄糖氧化酶在低溫條件下，除氧更高效，能夠有效防止蛋白質(zhì)、脂肪等營養(yǎng)成分的氧化，替代了存在安全隱患的化學保鮮。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于發(fā)酵工程領(lǐng)域，具體是一種海洋低溫葡萄糖氧化酶及其在海產(chǎn)品保鮮中的應(yīng)用。

背景技術(shù)

近年來海產(chǎn)品以富含蛋白和不飽和脂肪酸等獨特營養(yǎng)成分而受追捧。我國海域遼闊，擁有豐富海洋資源，海產(chǎn)品的生產(chǎn)將創(chuàng)造巨大經(jīng)濟財富。但海產(chǎn)品因蛋白和水分含量高，存在大量細菌，捕撈出水后極易腐爛變質(zhì)，影響加工、運輸、銷售和保存。因此海產(chǎn)品捕撈后應(yīng)及時采取保鮮措施，以減少營養(yǎng)的消耗和產(chǎn)品的腐爛變質(zhì)。

目前，海產(chǎn)品保鮮常用方法包括低溫保鮮、化學保鮮等。單純的低溫保鮮會造成海產(chǎn)品口感的變化。化學保鮮利用化學制劑作為保鮮劑，但往往會造成化學藥物殘留。隨著化學保鮮引起的安全問題日益嚴重，生物保鮮因其天然、安全的特點而逐漸被廣泛利用。

葡萄糖氧化酶作為一種新型食品添加劑，具有綠色、安全、無污染等特點。用于海產(chǎn)品保鮮，一方面可以氧化葡萄糖產(chǎn)生葡萄糖酸，降低海產(chǎn)品表面pH值，達到抑菌的目的；另一方面，氧氣的除去，可以抑制微生物的生長，并且防止脂肪等營養(yǎng)成分氧化。葡萄糖氧化酶的添加，可保持海產(chǎn)品的色、香、味，提供更高的營養(yǎng)價值。但是在低溫條件下，葡萄糖氧化酶活性低，保鮮效果不佳。

發(fā)明內(nèi)容

為解決上述問題，本發(fā)明提供了一種海洋低溫葡萄糖氧化酶，本發(fā)明還提供了海洋低溫葡萄糖氧化酶的制備方法及其在海產(chǎn)品保鮮中的應(yīng)用。

為實現(xiàn)上述發(fā)明目的，本發(fā)明采用以下技術(shù)方案：

一種海洋低溫葡萄糖氧化酶，所述海洋低溫葡萄糖氧化酶產(chǎn)自海洋Penicillium crustosum，（GenBank登錄號MG983981）。

上述海洋低溫葡萄糖氧化酶的制備方法，所述方法具體如下：

制備過程為Penicillium crustosum接種于發(fā)酵培養(yǎng)基，經(jīng)發(fā)酵培養(yǎng)，獲得發(fā)酵液，過濾菌體后8000r/min 離心20min，硫酸銨鹽析過夜，離心，沉淀使用緩沖液復溶后超濾，過葡聚糖層析柱，獲得純酶液。

上述制備方法中，發(fā)酵培養(yǎng)基為1-10% 葡萄糖、0.1-3.0% 胰蛋白胨、0.1-2.0%NaNO₃、0.1-0.3% FeSO₄、0.1-0.5% MgSO₄、0.1-1.0% KH₂PO₄，發(fā)酵條件為15-25℃、140-200r/min；硫酸銨濃度為75%，離心條件為12000 r/min離心10 min；超濾條件為截留量為100 kDa的超濾管，5000 r/min超濾10 min；緩沖液為1 mol/L pH7.0的磷酸鈉緩沖液，柱層析填料為Sephadex G-100。

上述海洋低溫葡萄糖氧化酶應(yīng)用在海產(chǎn)品保鮮中。

具體地，所述海產(chǎn)品為對蝦，帶魚。

上述海洋低溫葡萄糖氧化酶用于海產(chǎn)品保鮮的保鮮方法為：