[發明專利]一種海洋低溫葡萄糖氧化酶及其在海產品保鮮中的應用

在審

• 申請號: 201810159029.2
• 申請日: 2018-02-26
• 公開（公告）號: CN108220262A
• 公開（公告）日: 2018-06-29
• 發明（設計）人: 遲乃玉;李蓉;張慶芳;喬慧;王曉輝
• 申請（專利權）人: 大連大學
• 主分類號: C12N9/04
• 分類號: C12N9/04;A23B4/22;A23B4/20;A23L3/3571;A23L3/3562;C12R1/80
• 代理公司: 大連八方知識產權代理有限公司 21226
• 代理人: 朱秀芬

1.一種海洋低溫葡萄糖氧化酶，其特征在于，所述海洋低溫葡萄糖氧化酶產自海洋Penicillium crustosum（GenBank登錄號MG983981）。

2.權利要求1所述海洋低溫葡萄糖氧化酶的制備方法，其特征在于，所述方法具體如下：

將Penicillium crustosum接種于發酵培養基，發酵培養獲得發酵液，過濾菌體后8000r/min 離心20min，硫酸銨鹽析過夜，離心，沉淀使用緩沖液復溶后超濾，過葡聚糖層析柱，獲得純酶液。

3.如權利要求2所述的海洋低溫葡萄糖氧化酶的制備方法，其特征在于，發酵培養基為1-10% 葡萄糖、0.1-3.0% 胰蛋白胨、0.1-2.0% NaNO₃、0.1-0.3% FeSO₄、0.1-0.5% MgSO₄、0.1-1.0% KH₂PO₄，發酵條件為15-25℃、140-200r/min；硫酸銨濃度為75%，離心條件為12000r/min離心10min；超濾條件為截留量為100kDa的超濾管，5000r/min超濾10min；緩沖液為1 mol/L pH7.0的磷酸鈉緩沖液，柱層析填料為Sephadex G-100。

4.如權利要求1所述的海洋低溫葡萄糖氧化酶在海產品保鮮中的應用。

5.如權利要求4所述的海洋低溫葡萄糖氧化酶在海產品保鮮中的應用，其特征在于，所述海產品為對蝦，帶魚。

6.如權利要求4或5所述的海洋低溫葡萄糖氧化酶在海產品保鮮中的應用，其特征在于，保鮮的方法具體如下：

將需要保鮮的海產品先在海洋低溫葡萄糖氧化酶溶液和葡萄糖溶液的混合液中浸漬2~20min，浸漬后再置于保鮮盒中低溫保鮮；其中海洋低溫葡萄糖氧化酶溶液的濃度為10~60mg/L，葡萄糖溶液的濃度為1~15mg/L，海洋低溫葡萄糖氧化酶溶液與葡萄糖溶液混合的體積比為1:1~3。

7.如權利要求6所述的海洋低溫葡萄糖氧化酶在海產品保鮮中的應用，其特征在于，需要保鮮的海產品為對蝦時，海洋低溫葡萄糖氧化酶溶液濃度為10~40mg/L，葡萄糖溶液的濃度為1~10mg/L，海洋低溫葡萄糖氧化酶溶液與葡萄糖溶液混合的體積比為1:1~2，浸漬時間為2~10min。

8.如權利要求7所述的海洋低溫葡萄糖氧化酶在海產品保鮮中的應用，其特征在于，對蝦冷藏保存時，海洋低溫葡萄糖氧化酶溶液濃度為20 mg/L，葡萄糖溶液的濃度為5mg/L，海洋低溫葡萄糖氧化酶溶液與葡萄糖溶液混合的體積比為1:1，浸漬時間為4min；對蝦冷凍保存時，海洋低溫葡萄糖氧化酶溶液濃度為15mg/L，葡萄糖溶液的濃度為4mg/L，海洋低溫葡萄糖氧化酶溶液與葡萄糖溶液混合的體積比為1:1.5，浸漬時間為6 min。

9.如權利要求6所述的海洋低溫葡萄糖氧化酶在海產品保鮮中的應用，其特征在于，需要保鮮的海產品為帶魚時，海洋低溫葡萄糖氧化酶溶液濃度為20~60mg/L，葡萄糖溶液的濃度為2~15mg/L，海洋低溫葡萄糖氧化酶溶液與葡萄糖溶液混合的體積比為1:1~3，浸漬時間為4~20min。

10.如權利要求9所述的海海洋低溫葡萄糖氧化酶在海產品保鮮中的應用，其特征在于，帶魚冷藏保存時，海洋低溫葡萄糖氧化酶溶液濃度為35mg/L，葡萄糖溶液濃度為8mg/L，海洋低溫葡萄糖氧化酶和葡萄糖溶液混合的體積比為1:2，浸漬時間為8min；帶魚冷凍保存時，海洋低溫葡萄糖氧化酶溶液濃度為30mg/L，葡萄糖溶液的濃度為6mg/L，海洋低溫葡萄糖氧化酶溶液與葡萄糖溶液混合的體積比為1:1.5，帶魚浸漬時間為10min。