[發明專利]一種抗幽門螺旋桿菌脂多糖的卵黃抗體及制備方法與應用

在審

• 申請號: 201810157564.4
• 申請日: 2018-02-24
• 公開（公告）號: CN108440667A
• 公開（公告）日: 2018-08-24
• 發明（設計）人: 趙肅清;肖益熱;鄭希;王甜甜;陳莉莉;賀攀
• 申請（專利權）人: 廣東工業大學
• 主分類號: C07K16/12
• 分類號: C07K16/12;C07K16/02;A61K39/40;A61P31/04;A61P35/00;A61P1/04
• 代理公司: 廣東廣信君達律師事務所 44329
• 代理人: 楊曉松

本發明屬于生物技術領域，具體涉及一種抗幽門螺旋桿菌脂多糖的卵黃抗體及制備方法與應用。本發明首先培養幽門螺旋桿菌，提取幽門螺旋桿菌脂多糖；將幽門螺旋桿菌脂多糖和佐劑混合制成抗原，對蛋雞進行初次免疫和加強免疫，加強免疫共計3～5次；從第一次加強免疫開始，收集雞蛋，分離，得到抗幽門螺旋桿菌脂多糖的卵黃抗體。應用本發明制得的抗幽門螺旋桿菌脂多糖的卵黃抗體添加于食品或制備成保健食品，可用于輔助防治因幽門螺桿菌感染引起的胃潰瘍或胃癌；亦可制成藥品，用于防治因幽門螺桿菌感染引起的胃潰瘍或胃癌。

技術領域

本發明屬于生物技術領域，具體涉及一種抗幽門螺旋桿菌脂多糖的卵黃抗體及制備方法與應用。

背景技術

幽門螺旋桿菌(Helicobacter pylori)是科學家Barry Marshall和Robin Warren發現的，該菌能夠感染胃部組織并且引發潰瘍，而這兩位研究者也因發現了幽門螺桿菌而獲得了2005年的諾貝爾生理學及醫學獎。

幽門螺旋桿菌，又稱幽門螺桿菌，是胃潰瘍和胃癌的致病因子。據估計，一半的世界人口感染上幽門螺旋桿菌。很多感染者產生胃炎癥狀，而且每5名感染者當中，就有1人在他們的生命的某個時刻患上胃潰瘍，在很多情形下，這是一種病情進展快速的致命性疾病。胃炎和胃潰瘍可利用抗生素加以治療；這些治療經常需要使用兩到三種不同類型的抗生素，而且仍然不能夠治愈所有的病人。在最糟糕的情形下，長期的幽門螺旋桿菌炎癥能夠導致胃癌產生。胃癌是一種高度致死性的很難治療的癌癥。在全世界，胃癌每年影響著100萬人，每年有超過70萬人死于胃癌。

日前，來自西澳大學等多個機構的研究人員通過研究深入闡明了幽門螺桿菌重要生物分子的精細結構，該菌是誘發機體胃潰瘍的重要致病菌，相關研究刊登于國際雜志PLoS Pathogens上，研究人員表示，他們深入解析了負責幽門螺桿菌脂多糖產生的酶類及其結構，特殊的脂多糖分子就好像一個保護盾一樣能夠覆蓋到整個細菌細胞表面，相比其它細菌而言其有著一定的特性，脂多糖能夠幫助細菌入侵機體天然的免疫系統來誘發長期的感染。

利用幽門螺桿菌脂多糖免疫產蛋母雞，使母雞體內產生抗體，并產生在蛋黃內含有抗體的雞蛋。該產品是雞在反復攝取幽門螺桿菌脂多糖抗原后，當雞體內產生抗體時產下的蛋。雞蛋中的蛋黃中就存在抗幽門螺桿菌脂多糖的抗體。該抗體可以對抗幽門螺桿菌的內毒素，阻止幽門螺桿菌吸附到胃黏膜上，預防其入侵機體天然的免疫系統和誘發相應的感染，對于胃潰瘍和胃癌有預防和治療作用。

發明內容

為了克服現有技術的的不足和缺點，本發明的首要目的在于提供一種抗幽門螺旋桿菌脂多糖的卵黃抗體的制備方法。

本發明的另一目的在于提供上述制備方法制備得到的抗幽門螺旋桿菌脂多糖的卵黃抗體，該抗體機理明確，可安全、有效地預防胃潰瘍和胃癌的抗幽門螺桿菌脂多糖。

本發明的再一目的在于提供上述幽門螺旋桿菌脂多糖的卵黃抗體的應用。

本發明的目的通過下述技術方案實現：

一種抗幽門螺旋桿菌脂多糖的卵黃抗體的制備方法，包含如下步驟：

培養幽門螺旋桿菌，提取幽門螺旋桿菌脂多糖；將幽門螺旋桿菌脂多糖和佐劑混合制成抗原，對蛋雞進行初次免疫和加強免疫，加強免疫共計3～5次；從第一次加強免疫開始，收集雞蛋，分離，得到抗幽門螺旋桿菌脂多糖的卵黃抗體；

所述的幽門螺旋桿菌脂多糖的制備方法，包含如下步驟：

(1)將幽門螺旋桿菌菌苔洗滌后，用水混懸，反復凍融至菌體裂解，得到裂解液；將裂解液與質量分數為90％的苯酚溶液分別預熱至67.5～68.5℃后混合，67.5～68.5℃劇烈攪拌30～60min，得到混合液；將混合液冰浴至4℃以下，離心，得到酚相；