[發明專利]一種棕櫚酰三肽-1的液相合成方法

在審

• 申請號: 201810156010.2
• 申請日: 2018-02-23
• 公開（公告）號: CN108218956A
• 公開（公告）日: 2018-06-29
• 發明（設計）人: 鄭慶泉
• 申請（專利權）人: 廣州同雋醫藥科技有限公司
• 主分類號: C07K5/083
• 分類號: C07K5/083;C07K1/36;C07K1/02;C07K1/06;C07K1/30
• 代理公司: 廣州三環專利商標代理有限公司 44202
• 代理人: 宋靜娜;郝傳鑫

本發明公開了一種棕櫚酰三肽?1的液相合成方法，通過對棕櫚酰三肽?1分段合成，分別合成了棕櫚酰三肽?1序列中的二肽片段H?His?Lys(Z)?OBzl和另外一個片段Pal?Gly?OH，然后這兩個片段以活化酯的方法合成了棕櫚酰三肽片段，再通過氫化反應得到終產品棕櫚酰三肽?1。本發明克服了固相反應中每一步必須使用保護氨基酸、溶劑種類多、試劑明顯過量及溶劑難回收的缺點，具有合成方法簡單、產品成本低、對環境更為綠色化等優點，且能夠大規模生產，可以工業化生產棕櫚酰三肽?1。

技術領域

本發明屬于藥物合成技術領域，具體涉及一種棕櫚酰三肽-1的液相合成方法。

背景技術

棕櫚酰三肽-1能夠大量促進肌膚膠原蛋白產生，使面部肌膚飽滿并賦予彈性，提高肌膚水含量與鎖水保濕度，使皮膚觸感柔潤滑膩，由內而外的提亮膚色不再晦暗。

棕櫚酰三肽-1的合成方法包括傳統的固相肽合成及液相肽合成方法兩種，由于其序列短，固相合成氨基酸用量大，成本高，且不易實現大量制備；液相合成法氨基酸用量小，收率高，可以大量制備。但現有的液相合成法工藝復雜，大量使用有機溶劑，成本高且不環保。

發明內容

基于此，本發明的目的在于克服上述現有技術的不足之處而提供一種棕櫚酰三肽-1的液相合成方法，其具有制備工藝簡單、產品成本低、溶劑易于回收和環保等優點。

為實現上述目的，本發明采用的技術方案為：一種棕櫚酰三肽-1的液相合成方法，包括以下步驟：

(1)合成Pal-Gly-OH：將甘氨酸與叔丁醇按質量-體積比為1g：(3～6)mL混合均勻，加入氫氧化鉀或氫氧化鈉水溶液，攪拌至澄清；降溫至0～5℃,滴加棕櫚酰氯和氫氧化鉀或氫氧化鈉水溶液，保持反應體系的pH在7.5～9.5之間，溫度控制在5℃以下；甘氨酸與氫氧化鉀或氫氧化鈉、棕櫚酰氯的摩爾比為1:(2.0～2.5):(1.0～1.2)；甘氨酸與水的質量-體積比為1g:(10～15)mL；滴加完畢撤去冰浴，自然升溫至室溫攪拌2～3個小時，用鹽酸溶液調pH至2～3，過濾，烘干，得到Pal-Gly-OH粗品，粗品用乙酸乙酯、二氯甲烷、甲醇或正庚烷打漿，即得純品Pal-Gly-OH；

(2)合成Pal-Gly-ONb或Pal-Gly-OSU：將步驟(1)獲得的Pal-Gly-OH和DMF按質量-體積比為1g：(3～6)mL混合均勻，加入HONb或HOSU，攪拌至溶解，降溫至0℃，分批加入EDCI，Pal-Gly-OH、HONb或HOSU和EDCI的摩爾比為1:(1.0～1.2):(1.1～1.3)；加料完畢撤去水浴升溫至室溫，攪拌6～10個小時；

(3)合成Boc-His(Trt)-Lys(Z)-OBzl：將H-Lys(Z)-OBzl.HCl與二氯甲烷按質量-體積比為1g:(8～10)mL混合均勻，分批加入碳酸鈉，然后加入Boc-His(Trt)-OH，攪拌10分鐘，降溫至0℃，分批加入EDCI，H-Lys(Z)-OBzl.HCl、碳酸鈉、Boc-His(Trt)-OH和EDCI的摩爾比為1:(1.0～1.1):(1.0～1.1):(1.1～1.3)；加料完畢，撤去水浴升溫至室溫，攪拌4-6小時，反應液分別用水、飽和碳酸氫鈉水溶液、飽和食鹽水洗，濃縮掉一部分二氯甲烷得到Boc-His(Trt)-Lys(Z)-OBzl的二氯甲烷溶液；

(4)合成H-His-Lys(Z)-OBzl：將步驟(3)獲得的Boc-His(Trt)-Lys(Z)-OBzl的二氯甲烷溶液降溫至0℃，滴加含水10％的三氟乙酸溶液，H-His(Trt)-Lys(Z)-OBzl與三氟乙酸的摩爾比為1.0:(15～20)，滴加完畢，撤去水浴升溫至室溫，攪拌10～15小時；濃縮掉大部分的二氯甲烷，加水，攪拌，過濾，除去生成的副產物三苯甲醇；濾液轉移到反應瓶并降溫至0℃，用氫氧化鈉、碳酸鈉或碳酸氫鈉溶液調pH至6.0～8.0之間，過濾，得到H-His-Lys(Z)-OBzl的濕品；