[發明專利]一種棕櫚酰三肽-1的液相合成方法

在審

• 申請號: 201810156010.2
• 申請日: 2018-02-23
• 公開（公告）號: CN108218956A
• 公開（公告）日: 2018-06-29
• 發明（設計）人: 鄭慶泉
• 申請（專利權）人: 廣州同雋醫藥科技有限公司
• 主分類號: C07K5/083
• 分類號: C07K5/083;C07K1/36;C07K1/02;C07K1/06;C07K1/30
• 代理公司: 廣州三環專利商標代理有限公司 44202
• 代理人: 宋靜娜;郝傳鑫

1.一種棕櫚酰三肽-1的液相合成方法，其特征在于，包括以下步驟：

(1)合成Pal-Gly-OH：將甘氨酸與叔丁醇按質量-體積比為1g：(3～6)mL混合均勻，加入氫氧化鉀或氫氧化鈉水溶液，攪拌至澄清；降溫至0～5℃,滴加棕櫚酰氯和氫氧化鉀或氫氧化鈉水溶液，保持反應體系的pH在7.5～9.5之間，溫度控制在5℃以下；甘氨酸與氫氧化鉀或氫氧化鈉、棕櫚酰氯的摩爾比為1:(2.0～2.5):(1.0～1.2)；甘氨酸與水的質量-體積比為1g:(10～15)mL；滴加完畢撤去冰浴，自然升溫至室溫攪拌2～3個小時，用鹽酸溶液調pH至2～3，過濾，烘干，得到Pal-Gly-OH粗品，粗品用乙酸乙酯、二氯甲烷、甲醇或正庚烷打漿，即得純品Pal-Gly-OH；

(2)合成Pal-Gly-ONb或Pal-Gly-OSU：將步驟(1)獲得的Pal-Gly-OH和DMF按質量體-積比為1g：(3～6)mL混合均勻，加入HONb或HOSU，攪拌至溶解，降溫至0℃，分批加入EDCI，Pal-Gly-OH、HONb或HOSU和EDCI的摩爾比為1:(1.0～1.2):(1.1～1.3)；加料完畢撤去水浴升溫至室溫，攪拌6～10個小時；

(3)合成Boc-His(Trt)-Lys(Z)-OBzl：將H-Lys(Z)-OBzl.HCl與二氯甲烷按質量體-積比為1g:(8～10)mL混合均勻，分批加入碳酸鈉，然后加入Boc-His(Trt)-OH，攪拌10分鐘，降溫至0℃，分批加入EDCI，H-Lys(Z)-OBzl.HCl、碳酸鈉、Boc-His(Trt)-OH和EDCI的摩爾比為1:(1.0～1.1):(1.0～1.1):(1.1～1.3)；加料完畢，撤去水浴升溫至室溫，攪拌4-6小時，反應液分別用水、飽和碳酸氫鈉水溶液、飽和食鹽水洗，濃縮掉一部分二氯甲烷得到Boc-His(Trt)-Lys(Z)-OBzl的二氯甲烷溶液；

(4)合成H-His-Lys(Z)-OBzl：將步驟(3)獲得的Boc-His(Trt)-Lys(Z)-OBzl的二氯甲烷溶液，降溫至0℃，滴加含水10％的三氟乙酸溶液，H-His(Trt)-Lys(Z)-OBzl與三氟乙酸的摩爾比為1.0:(15～20)，滴加完畢，撤去水浴升溫至室溫，攪拌10～15小時；濃縮掉大部分的二氯甲烷，加水，攪拌，過濾，除去生成的副產物三苯甲醇；濾液轉移到反應瓶并降溫至0℃，用氫氧化鈉、碳酸鈉或碳酸氫鈉溶液調pH至6.0～8.0之間，過濾，得到H-His-Lys(Z)-OBzl的濕品；

(5)合成Pal-Gly-His-Lys(Z)-OBzl：向步驟(2)的反應液中加入碳酸氫鈉，控制溫度低于20℃，分批加入步驟(4)所制得的濕品H-His-Lys(Z)-OBzl，H-His-Lys(Z)-OBzl、碳酸氫鈉和Pal-Gly-ONb或Pal-Gly-OSU的摩爾比為1.0:(1.1～1.3):(1.0～1.2)，加料完畢室溫攪拌2～3個小時，加水，攪拌，過濾，得到Pal-Gly-His-Lys(Z)-OBzl的濕粗品，烘干，選用二氯甲烷、甲醇、乙酸乙酯或乙腈打漿，得到精品Pal-Gly-His-Lys(Z)-OBzl；

(6)合成Pal-Gly-His-Lys-OH：將Pal-Gly-His-Lys(Z)-OBzl與甲醇、乙醇或乙酸按質量-體積比1g：(8～10)mL混合均勻，氮氣保護下加入含量為5％的濕Pd/C，Pal-Gly-His-Lys(Z)-OBzl與濕Pd/C的質量比為1.0:(0.05～0.10)，氮氣置換三次，氫氣置換三次，室溫下攪拌16～20小時，過濾除去Pd/C，濾液濃縮至起始原料Pal-Gly-His-Lys(Z)-OBzl與殘留液體的質量體積比為1g:(2～4)mL，加乙腈、丙酮、二氯甲烷、乙酸乙酯或甲醇打漿，過濾，烘干，即得Pal-Gly-His-Lys-OH精品。

2.根據權利要求1所述的棕櫚酰三肽-1的液相合成方法，其特征在于，所述步驟(1)中甘氨酸與氫氧化鉀或氫氧化鈉、棕櫚酰氯的摩爾比為1:2.2:1.1。

3.根據權利要求1所述的棕櫚酰三肽-1的液相合成方法，其特征在于，所述步驟(1)中保持反應體系的pH在8.0～9.0之間，優選為8.5。