[發(fā)明專利]阻斷型PD-L1駝源單域抗體及其用途

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201810151835.5
• 申請日: 2018-02-14
• 公開（公告）號: CN110144010B9
• 公開（公告）日: 2021-01-05
• 發(fā)明（設計）人: 萬亞坤;朱敏;沈曉寧
• 申請（專利權）人: 上海洛啟生物醫(yī)藥技術有限公司
• 主分類號: C07K16/28
• 分類號: C07K16/28;C07K16/46;C07K19/00
• 代理公司: 上海一平知識產(chǎn)權代理有限公司 31266
• 代理人: 劉妍珺;徐迅

1.一種抗PD-L1單域抗體VHH鏈的互補決定區(qū)CDR，其特征在于，所述VHH鏈的互補決定區(qū)CDR包含：

SEQ ID NO:5所示的CDR1、SEQ ID NO:6所示的CDR2，SEQ ID NO:7所示的CDR3。

2.一種抗PD-L1單域抗體的VHH鏈，其特征在于，所述VHH鏈包括框架區(qū)FR和權利要求1所述的互補決定區(qū)CDR。

3.如權利要求2所述的VHH鏈，其特征在于，所述的框架區(qū)FR選自下組的一種：

(a)SEQ ID NO:1所示的FR1，SEQ ID NO:2所示的FR2，SEQ ID NO:3所示的FR3，SEQ ID NO:4所示的FR4組成；

(b)SEQ ID NO:10所示的FR1，SEQ ID NO:11所示的FR2，SEQ ID NO:12所示的FR3，SEQ ID NO:13所示的FR4組成。

4.一種抗PD-L1單域抗體，其特征在于，它是針對PD-L1表位的單域抗體，并且具有權利要求2所述的VHH鏈。

5.如權利要求4所述的單域抗體，其特征在于，所述單域抗體包括單體或二聚體。

6.如權利要求4所述的單域抗體，其特征在于，所述單域抗體如SEQ ID NO:8或SEQ ID NO:14所示。

7.一種PD-L1單域抗體-Fc融合蛋白，其特征在于，所述融合蛋白從N’-C’端具有如下元件：

A-Fc；

其中，A元件為SEQ ID NO:14所示的序列；

“-”代表肽鍵。

8.如權利要求7所述的融合蛋白，其特征在于，所述融合蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO:16所示。

9.一種抗PD-L1單域抗體四價體，其特征在于，所述四價體具有如下結構

A-L-P~P-L-A；其中，

P元件為權利要求7所述的融合蛋白，

A元件為SEQ ID NO:14所示的序列；

L代表連接子；

“-”代表肽鍵；

“~”代表二硫鍵。

10.如權利要求9所述的抗PD-L1單域抗體四價體，其特征在于，所述連接子選自以下序列：GGGGSGGGS、GS、(GGGGS)n，其中n=1或2或3或4。

11.如權利要求9所述的抗PD-L1單域抗體四價體，其特征在于，所述PD-L1單域抗體四價體的氨基酸序列如SEQ ID NO:17所示。

12.一種多核苷酸或其組合，其特征在于，所述多核苷酸編碼選自一種或多種蛋白質：如權利要求1所述的抗PD-L1單域抗體VHH鏈的CDR區(qū)、如權利要求2所述的抗PD-L1單域抗體的VHH鏈、如權利要求4所述的抗PD-L1單域抗體、或如權利要求9所述的四價體。

13.如權利要求12所述的多核苷酸或其組合，其特征在于，所述多核苷酸選自下組的一種或多種：SEQ ID NO:9、15、18所示的核苷酸序列。

14.一種表達載體，其特征在于，所述表達載體含有如權利要求12所述的多核苷酸或其組合。

15.一種宿主細胞，其特征在于，所述宿主細胞含有如權利要求14所述的表達載體，或其基因組中整合有如權利要求12所述的多核苷酸或其組合。

16.如權利要求15所述的宿主細胞，其特征在于，所述的宿主細胞選自下組：哺乳動物細胞、大腸桿菌、酵母細胞、噬菌體。