[發(fā)明專利]一種乳酸鏈球菌素的提取方法在審
| 申請?zhí)枺?/td> | 201810150346.8 | 申請日： | 2018-02-13 |
| 公開（公告）號： | CN108374033A | 公開（公告）日： | 2018-08-07 |
| 發(fā)明（設計）人： | 鐘文文 | 申請（專利權）人： | 鐘文文 |
| 主分類號： | C12P21/02 | 分類號： | C12P21/02;C07K14/315;C07K1/14;C12R1/46 |
| 代理公司： | 北京知呱呱知識產(chǎn)權代理有限公司 11577 | 代理人： | 李芙蓉;馮建基 |
| 地址： | 276000 *** | 國省代碼： | 山東;37 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 乳酸鏈球菌素 發(fā)酵液 震蕩 離心分離菌體 鏈球菌 分子微生物 磷酸鈉溶液 濃縮上清液 乳酸鏈球菌 發(fā)酵乳酸 穩(wěn)定性強 洗滌菌體 上清液 除雜 吸附 洗脫 微生物 | ||
1.一種乳酸鏈球菌素的提取方法，其特征在于：所述提取方法包括以下步驟：
(1)發(fā)酵乳酸鏈球菌，得到乳酸鏈球菌發(fā)酵液；
(2)調(diào)節(jié)發(fā)酵液的pH值至4～5，在10～25℃震蕩0.5～5h，使乳酸鏈球菌素吸附在乳酸鏈球菌菌體上；
(3)離心分離乳酸鏈球菌菌體，用pH值為6.0的磷酸鈉溶液洗滌菌體1～3次，然后將菌體懸浮于pH為2.0的NaCl溶液中，振蕩0.5～4h后離心去除菌體，得到上清液；
(4)調(diào)節(jié)上清液的pH值至6.0，濃縮至原體積的5％～10％，得到濃縮液；
(5)采用Sephadex G-25層析柱去除濃縮液中的鹽和雜質(zhì)蛋白，收集洗脫液，即得到本發(fā)明的乳酸鏈球菌素。
2.根據(jù)權利要求1所述的乳酸鏈球菌素的提取方法，其特征在于：所述步驟(1)中發(fā)酵乳酸鏈球菌采用的培養(yǎng)基為：蔗糖4.22g/100mL，大豆蛋白胨1.0g/100mL，酵母膏0.5g/100mL，Na2HPO4為0.8g/100mL，MgSO4·7H2O 0.02g/100mL，其余為水。
3.根據(jù)權利要求1所述的乳酸鏈球菌素的提取方法，其特征在于：所述步驟(1)中發(fā)酵乳酸鏈球菌的發(fā)酵溫度為28～30℃，發(fā)酵周期為10～24h。
4.根據(jù)權利要求1所述的乳酸鏈球菌素的提取方法，其特征在于：所述步驟(3)中磷酸鈉溶液的濃度為5mmol/L。
5.根據(jù)權利要求1所述的乳酸鏈球菌素的提取方法，其特征在于：所述步驟(3)中NaCl溶液的濃度為100mmol/L。
6.根據(jù)權利要求1所述的乳酸鏈球菌素的提取方法，其特征在于：所述步驟(4)中濃縮的方式為旋轉蒸發(fā)。
7.根據(jù)權利要求1所述的乳酸鏈球菌素的提取方法，其特征在于：所述步驟(5)中層析柱的洗脫條件為：流速為0.5～2mL/min，用去離子水進行洗脫。
8.根據(jù)權利要求1所述的乳酸鏈球菌素的提取方法，其特征在于：所述步驟(5)收集洗脫液后還進行以下操作：旋轉蒸發(fā)濃縮至洗脫液體積的20％～80％。
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