[發(fā)明專利]一種利用小分子化合物誘導人多能干細胞分化為肝細胞的方法有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 201810146411.X | 申請日： | 2018-02-12 |
| 公開（公告）號： | CN108486037B | 公開（公告）日： | 2022-03-15 |
| 發(fā)明（設計）人： | 張琪;杜聰;奉源;許燕;邱東波 | 申請（專利權）人： | 中山大學附屬第三醫(yī)院(中山大學肝臟病醫(yī)院) |
| 主分類號： | C12N5/071 | 分類號： | C12N5/071 |
| 代理公司： | 廣州粵高專利商標代理有限公司 44102 | 代理人： | 陳衛(wèi) |
| 地址： | 510630 *** | 國省代碼： | 廣東;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 利用 分子 化合物 誘導 多能 干細胞 化為 肝細胞 方法 | ||
1.一種誘導人多能干細胞分化為肝細胞的方法，其特征在于，分為以下三個步驟：
S1.通過抑制PI3K/AKT信號通路并且激活Wnt信號通路，誘導人多能干細胞分化為限定性內胚層細胞，包括以下步驟：
S11.使用人胚胎干細胞培養(yǎng)基mTeSR?加入DMSO，將人多能干細胞預培養(yǎng)22～26小時；
S12.將RPMI1640培養(yǎng)基中加入無胰島素的B-27細胞培養(yǎng)添加劑和CHIR99021，利用所得培養(yǎng)基替換S11的培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)22～26小時；
S13.再將S12的培養(yǎng)基更換為含有無胰島素的B-27細胞培養(yǎng)添加劑的RPMI1640培養(yǎng)基，繼續(xù)培養(yǎng)22～26小時；
S2.使用DMSO、小分子化合物TGF-β信號通路抑制劑和丁酸鈉誘導限定性內胚層細胞分化為肝祖細胞，同時抑制限定性內胚層細胞分化為胰腺祖細胞，培養(yǎng)5天；
S3.誘導肝祖細胞分化為肝細胞，用小分子化合物TGF-β信號通路抑制劑抑制膽管上皮細胞的分化，同時用地塞米松、氫化可的松、FH1和FPH1促進肝細胞成熟和增殖，培養(yǎng)5天。
2.權利要求1所述的方法在定向誘導人多能干細胞分化為肝細胞中的應用。
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