[發明專利]一種負載抗原的水溶性胺化β-1,3-D-葡聚糖納米粒子及其制備方法和應用

有效

• 申請號: 201810145959.2
• 申請日: 2018-02-12
• 公開（公告）號: CN108295049B
• 公開（公告）日: 2020-07-14
• 發明（設計）人: 容敏智;金靜維;章明秋
• 申請（專利權）人: 中山大學
• 主分類號: A61K9/51
• 分類號: A61K9/51;A61K47/36;A61K39/39
• 代理公司: 廣州粵高專利商標代理有限公司 44102
• 代理人: 任重

本發明公開了一種負載抗原的水溶性胺化β?1,3?D?葡聚糖納米粒子及其制備方法和應用。所述納米粒子包括以下重量份數的原料組成：水溶性胺化β?1,3?D?葡聚糖3.5~5.5份；離子交聯劑0.06~1.19份；抗原蛋白0.3~0.7份；其中，離子交聯劑為低分子量陰離子交聯劑。本發明所述負載抗原的水溶性胺化β?1,3?D?葡聚糖納米粒子的粒徑較小，為100～1200nm；水溶性好，抗原蛋白的包封率高，最高能達到86.5%；能保持抗原蛋白的結構和免疫原性的穩定，并且能夠持續釋放抗原蛋白，蛋白持續釋放時間超過125h，5h內釋放率低于40%；能明顯提高動物體內IgG1和IgG2a抗體的滴度。同時，所述納米粒子的制備方法簡單，反應條件溫和，反應效率較高。

技術領域

本發明涉及生物醫學材料領域，更具體地，涉及一種負載抗原的水溶性胺化β-1,3-D-葡聚糖納米粒子及其制備方法和應用。

背景技術

β-1,3-D-葡聚糖主要存在于細菌、真菌、酵母和海藻的細胞壁中，相關研究主要有兩個方面，一是對酵母多糖免疫調節活性的研究，另一個是對食用蘑菇多糖抗腫瘤活性的研究。雖然上述研究針對不同原材料，但隨著對它們有效成分的分離，關注點都集中于β-1,3-D-葡聚糖。人們發現β-1,3-D-葡聚糖具有許多生理活性，例如：抗傳染性疾病和腫瘤的免疫調節活性；刺激造血功能和輻射后保護作用；保護組織器官免受氧化損傷；在治療高膽固醇血癥、糖尿病、高血壓、急性鼻炎、關節炎和促進傷口愈合方面的作用等。在眾多的生理活性中，免疫調節活性最受關注，其它活性均與免疫調節活性有關。免疫調節機制的研究結果認為，β-1,3-D-葡聚糖是通過與細胞表面一些模式識別受體的特異性識別，再經過一系列的信號途徑產生相應的生理反應。

由于β-1,3-D-葡聚糖具有良好的免疫調節活性，又兼有生物兼容性和生物降解性，因此具有作為疫苗佐劑應用的潛力。雖然已有相關研究報道了酵母β-1,3-D-葡聚糖作為疫苗佐劑具有增強免疫的作用。然而，酵母葡聚糖顆粒的尺寸大小受限于酵母細胞，且不是純的β-1,3-D-葡聚糖，不利于更大程度的發揮β-1,3-D-葡聚糖所具有的功效。

鑒于此，如何采用β-1,3-D-葡聚糖為原料，更好的發揮和利用β-1,3-D-葡聚糖原有的功效，是當前利用β-1,3-D-葡聚糖制備納米疫苗迫切需要解決的問題。

發明內容

本發明的目的在于克服現有技術的上述不足，提供一種負載抗原的水溶性胺化β-1,3-D-葡聚糖納米粒子。本發明所述負載抗原的水溶性胺化β-1,3-D-葡聚糖納米粒子的粒徑較小，為100～1200nm，水溶性好，抗原蛋白的包封率高，最高能達到86.5%；能保持抗原蛋白的結構和免疫原性的穩定，并且能夠持續釋放抗原蛋白，蛋白持續釋放時間超過125h，5h內釋放率低于40%；能明顯提高動物體內IgG1和IgG2a抗體的滴度。

本發明的另一目的在于提供所述負載抗原的水溶性胺化β-1,3-D-葡聚糖納米粒子的制備方法。

本發明的再一目的在于提供所述負載抗原的水溶性胺化β-1,3-D-葡聚糖納米粒子的應用。

本發明的上述目的是通過一下方案予以實現的：

一種負載抗原的水溶性胺化β-1,3-D-葡聚糖納米粒子，所述納米粒子包括以下重量份數的原料組成：

水溶性胺化β-1,3-D-葡聚糖 3.5～5.5份；

離子交聯劑 0.06～1.19份；

抗原蛋白 0.3～0.7份；

其中，所述離子交聯劑為低分子量陰離子交聯劑。