[發(fā)明專利]檢測抗環(huán)瓜氨酸肽抗體的均相免疫檢測試劑盒及其應(yīng)用

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• 申請?zhí)枺?/td>: 201810143134.7
• 申請日: 2018-02-11
• 公開（公告）號: CN110161247A
• 公開（公告）日: 2019-08-23
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 饒星;廖智星;劉宇卉;李臨;其他發(fā)明人請求不公開姓名
• 申請（專利權(quán)）人: 北京科美生物技術(shù)有限公司
• 主分類號: G01N33/68
• 分類號: G01N33/68;G01N33/543
• 代理公司: 北京聿宏知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11372
• 代理人: 吳大建;方莉

1.一種制備用于檢測抗環(huán)瓜氨酸肽抗體的均相免疫檢測試劑盒的方法，其包括：

制備第一組合物，所述第一組合物包含組分a，所述組分a由能夠與單線態(tài)氧反應(yīng)生成可檢測信號的受體以及與之結(jié)合的第一抗原構(gòu)成，其中所述第一抗原能夠與抗環(huán)瓜氨酸肽抗體的抗原表位第一識別位點特異性結(jié)合；

制備第二組合物，所述第二組合物包含組分b，所述組分b由能夠與抗環(huán)瓜氨酸肽抗體的抗原表位第二識別位點特異性結(jié)合的第二抗原以及與之結(jié)合的特異性配對物中的一個成員構(gòu)成；

制備第三組合物，所述第三組合物包含組分c，所述組分c由能夠在激發(fā)狀態(tài)產(chǎn)生單線態(tài)氧的供體以及與之結(jié)合的特異性配對物中的另一個成員構(gòu)成。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述第一抗原和所述第二抗原相同或不同，二者獨立地選自合成的含瓜氨酸的環(huán)型肽、含瓜氨酸的線型肽、由至少2個單一含瓜氨酸的肽段合成在一條肽鏈上形成的多肽、含有至少2個單一含瓜氨酸的肽段的瓜氨酸肽段混合物和瓜氨酸化蛋白。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述第一抗原和所述第二抗原分別獨立地選自合成的含環(huán)瓜氨酸的環(huán)形肽、含瓜氨酸的線型肽、由至少2個單一含瓜氨酸的肽段合成在一條肽鏈上形成的多肽和含有至少2個單一含瓜氨酸的肽段的瓜氨酸肽段混合物。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的方法，其特征在于，所述第一抗原和所述第二抗原分別獨立地為由2-4個含瓜氨酸的肽段合成在一條肽鏈上形成的多肽或含有2-4個單一含瓜氨酸的肽段的瓜氨酸肽段混合物；優(yōu)選所述含瓜氨酸的肽段選自SEQ ID No.1-4。

5.根據(jù)權(quán)利要求1-4中任意一項所述的方法，其特征在于，所述第一抗原通過中間體與受體相結(jié)合，所述中間體為親水性高分子物質(zhì)。

6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的方法，其特征在于，所述中間體為蛋白質(zhì)，優(yōu)選選自血藍蛋白、卵清蛋白、牛血清白蛋白或牛甲狀腺球蛋白。

7.根據(jù)權(quán)利要求5所述的方法，其特征在于，所述中間體選自樹枝狀大分子、聚羧酸酯、聚巰基和聚乙二醇。

8.根據(jù)權(quán)利要求1-7中任意一項所述的方法，其特征在于，所述第二抗原與生物素結(jié)合，而所述供體與鏈霉親和素結(jié)合。

9.根據(jù)權(quán)利要求1-8中任意一項所述的方法，其特征在于，所述組分a在第一組合物中的總濃度為10-200μg/mL，優(yōu)選20-150μg/mL，更優(yōu)選25-100μg/mL；和/或，所述組分b在第二組合物中的濃度為0.1-10μg/mL，優(yōu)選0.5-5μg/mL，更優(yōu)選1-3μg/mL。

10.根據(jù)權(quán)利要求1-9中任意一項所述的方法，其特征在于，所述受體包含烯烴化合物和金屬螯合物，其為非粒子形式，且在含水介質(zhì)中可溶；和/或，所述受體為填充有發(fā)光化合物和鑭系元素的高分子微粒。

11.根據(jù)權(quán)利要求1-10中任意一項所述的方法，其特征在于，所述供體為光活化的或化學(xué)活化的敏化劑，其為非粒子形式，且在含水介質(zhì)中可溶；和/或，所述供體為填充有感光化合物的高分子微粒，在光激發(fā)下能夠產(chǎn)生單線態(tài)氧。

12.一種如權(quán)利要求1-11中任意一項所述的方法制備得到的用于檢測抗環(huán)瓜氨酸肽抗體的均相免疫檢測試劑盒。

13.一種檢測待測樣本中抗環(huán)瓜氨酸肽抗體的均相免疫檢測方法，其包括使用如權(quán)利要求12所述的試劑盒來檢測待測樣本中是否存在抗環(huán)瓜氨酸肽抗體和/或確定抗環(huán)瓜氨酸肽抗體的含量。