[發明專利]重組口蹄疫病毒樣顆粒及其制備方法和應用在審
| 申請號: | 201810142558.1 | 申請日: | 2018-02-11 |
| 公開(公告)號: | CN110156896A | 公開(公告)日: | 2019-08-23 |
| 發明(設計)人: | 樓覺人 | 申請(專利權)人: | 樓覺人 |
| 主分類號: | C07K19/00 | 分類號: | C07K19/00;C12N9/50;C12N15/62;C12N1/19;C12N7/04;A61K39/135;A61P31/14 |
| 代理公司: | 上海一平知識產權代理有限公司 31266 | 代理人: | 肖艷;徐迅 |
| 地址: | 上海市長寧區虹*** | 國省代碼: | 上海;31 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 口蹄疫病毒 制備方法和應用 病毒樣顆粒 口蹄疫病毒結構蛋白 病毒核酸 免疫保護 免疫動物 滅活病毒 制備 口蹄疫 疫苗 | ||
1.一種融合蛋白,其特征在于,所述的融合蛋白從N端至C端具有式I結構:
P1-2A-3C (I)
式中,
P1為口蹄疫病毒外殼結構蛋白VP元件,
2A為非結構蛋白2A蛋白酶,
3C為非結構蛋白3C蛋白酶,
其中,所述P1-2A元件可在3C蛋白酶的酶切作用下,形成VP0蛋白、VP3蛋白和VP1蛋白。
2.一種分離的多核苷酸,其特征在于,所述的多核苷酸編碼權利要求1所述的融合蛋白。
3.如權利要求2所述的多核苷酸,其特征在于,所述的多核苷酸是經密碼子優化的多核苷酸。
4.一種基因工程細胞,其特征在于,所述基因工程細胞為真核細胞,并且所述細胞的基因組中整合有口蹄疫病毒外殼蛋白的表達盒;或者所述細胞中含有表達載體,所述表達載體含有所述口蹄疫病毒外殼蛋白的表達盒;
其中,所述的表達盒表達權利要求1所得的融合蛋白,
并且所述基因工程細胞在胞內表達所述外殼蛋白,且所述外殼蛋白在所述基因工程細胞內部形成病毒樣顆粒(VLPs)。
5.如權利要求4所述的細胞,其特征在于,所述的病毒樣顆粒由VP0蛋白、VP3蛋白和VP1蛋白形成。
6.如權利要求4所述的細胞,其特征在于,所述病毒為口蹄疫病毒O型,較佳地為FMDVO/BY/CHA/2010株口蹄疫病毒、或OJMS株口蹄疫病毒。
7.如權利要求4所述的細胞,其特征在于,所述細胞為酵母細胞,優選為畢赤酵母細胞,更優選為畢赤酵母KM71菌株。
8.如權利要求4所述的細胞,其特征在于,所述3C蛋白酶包括突變的3C蛋白酶,較佳地,所述3C蛋白酶的第38位的甘氨酸(G)突變為絲氨酸(S),且第48位的苯丙氨酸(F)突變為絲氨酸(S)。
9.一種病毒樣顆粒(VLPs),其特征在于,所述VLPs由權利要求4所述的基因工程細胞表達。
10.一種藥物組合物,其特征在于,所述藥物組合物包括權利要求9所述的病毒樣顆粒,和藥學上可以接受的載體。
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