[發(fā)明專利]一種五嶺龍膽種子再生體系建立及快速繁育方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201810141694.9
• 申請日: 2018-02-11
• 公開（公告）號: CN108243961B
• 公開（公告）日: 2021-04-27
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 陳世品;肖春梅;馬良;林文俊;何碧珠;郜祥雄
• 申請（專利權(quán)）人: 福建農(nóng)林大學(xué)
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 福州元創(chuàng)專利商標代理有限公司 35100
• 代理人: 蔡學(xué)俊

本發(fā)明提供一種五嶺龍膽種子再生體系建立及快速繁育方法，解決現(xiàn)有技術(shù)中五嶺龍膽野生資源少，藥用價值好，自然繁衍能力、傳播擴散能力不強，自然更新困難、優(yōu)良種苗稀缺等問題，采集飽滿成熟度為80?90%未開裂的五嶺龍膽蒴果，放入保鮮袋包好，帶回實驗室后去除蒴果周圍的雜質(zhì)，用洗滌劑漂洗干凈以及進行消毒處理后，用消毒濾紙吸干表面水分，用手術(shù)刀縱切果實,鑷子夾取種子，將種子均勻接種到培養(yǎng)基上。經(jīng)芽誘導(dǎo)培養(yǎng)、芽增殖培養(yǎng)；誘導(dǎo)無根苗生根，生根率可達100%，幼苗移栽濕度應(yīng)保持在75％～85％，避免陽光直射，成活率可達99%以上；成苗移植后成活率高，節(jié)約了大量成本，幼苗健壯挺拔，長勢良好，整齊一致。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于植物繁殖領(lǐng)域，具體涉及一種五嶺龍膽種子再生體系建立及快速繁育方法。

背景技術(shù)

五嶺龍膽（Gentiana davidii）又稱落地荷花、歇地龍膽、鯉魚膽、矮桿鯉魚膽，龍膽科龍膽屬多年生草本植物，高10-20厘米。葉對生，矩圓狀披針形或線狀披針形，長2.5-4厘米，寬0.5-1厘米，鈍尖，基部變狹連合，營養(yǎng)枝的葉蓮座狀。花數(shù)朵簇生莖頂端，頭狀，基部被莖上部的3-5葉所包圍；花萼漏斗狀，裂片不等大，條狀披針形；花冠漏斗狀，紫色，裂片卵形，子房橢圓形，具柄。蒴果，種子灰褐色，近圓形，表面蜂窩狀。生于山坡草叢、山坡路旁、林緣、林下，海拔350-2500米。產(chǎn)湖南、江西、安徽、浙江、福建、廣東、廣西。具有清熱解毒，利尿，明目。用于化膿性骨髓炎，尿路感染，結(jié)膜炎；外用治癤癰。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于提供一種五嶺龍膽種子再生體系建立及快速繁育方法，解決現(xiàn)有技術(shù)中五嶺龍膽野生資源少，藥用價值好，自然繁衍能力、傳播擴散能力不強，自然更新困難、優(yōu)良種苗稀缺等問題。

為實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用如下技術(shù)方案：

一種五嶺龍膽種子再生體系建立及快速繁育方法，包括如下步驟：

1）材料選取與消毒：采摘當年80-90%成熟莢果用洗滌劑漂洗干凈，再置于流水中沖洗20分鐘；種子消毒處理：將莢果進行清洗，置飽和漂白粉上清液中浸泡15min，并用軟毛刷刷洗莢果外部，沖洗干凈后，自來水下滴沖0.5-1h，雙蒸水沖蕩2-3次，置超凈工作臺內(nèi)用75%酒精消毒30s后倒去酒精，加入0.1%升汞處理10-13min，將汞液倒入廢汞瓶，無菌水沖3-4遍后，用消毒濾紙吸干表面水分后，待用；

2）誘導(dǎo)培養(yǎng)：取飽滿經(jīng)消毒處理后的莢果用槍狀鑷夾住莢果，手術(shù)刀順著莢果垂直方向剖開，取出莢果內(nèi)種子，分別接種于經(jīng)高溫、高壓滅菌的芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基中；培養(yǎng)條件：接種后5-8d在無燈光條件下培養(yǎng)，無燈光培養(yǎng)結(jié)束后光照強度調(diào)整為1000～1500lx，培養(yǎng)時間15-20d，培養(yǎng)室溫度為23±2℃，光照時間5h/d，得到誘導(dǎo)芽植株；

3）增殖培養(yǎng)：將經(jīng)上述誘導(dǎo)培養(yǎng)，所得到的生長良好的芽植株切成莖段長1.0-1.5cm，接種在增殖培養(yǎng)基中，光照時間10h/d，光照強度1500～2000lx，增殖培養(yǎng)時間20-30d，得到增殖培養(yǎng)的幼苗；

4）誘導(dǎo)生根：將增殖培養(yǎng)出來帶有葉2-3片，株高3-4cm無根幼苗單株切下，轉(zhuǎn)移到生根培養(yǎng)基中；光照時間10h/d，光照強度1500-2000lx，誘導(dǎo)生根時間15-20d，得到誘導(dǎo)生根的幼苗，生根率可達100%；

5）試管苗培養(yǎng)完成：當誘導(dǎo)生根培養(yǎng)試管苗生長至高5-6cm，根3-5條，葉5片，葉長2-3cm時完成五嶺龍膽種子誘導(dǎo)萌發(fā)及快速微繁殖培養(yǎng)；

6）將完成生根培養(yǎng)試管瓶苗放在自然光下煉苗5-7天后，打開瓶蓋煉苗1-2天，以增強試管苗對室外環(huán)境的適應(yīng)能力；然后從培養(yǎng)瓶中取出培養(yǎng)植株，洗去附著在根系的殘留培養(yǎng)基，移入蛭石和腐殖土的質(zhì)量比1:2混合的基質(zhì)中，保濕遮陰，溫度控制在15-30℃，濕度應(yīng)保持在75％-85％，避免陽光直射；2-3周后植株適應(yīng)能力逐漸增強，獲得自然生長健壯完整種苗。