[發明專利]絲素水凝膠包裹的過表達ncRNA的MSC外泌體制備方法與在抗后肢衰老中的應用在審
| 申請號： | 201810140513.0 | 申請日： | 2018-02-11 |
| 公開（公告）號： | CN110144324A | 公開（公告）日： | 2019-08-20 |
| 發明（設計）人： | 李楊欣;韓超珊 | 申請（專利權）人： | 蘇州大學 |
| 主分類號： | C12N5/10 | 分類號： | C12N5/10;A61K9/06;A61P39/00;A61P9/10 |
| 代理公司： | 北京集佳知識產權代理有限公司 11227 | 代理人： | 常亮 |
| 地址： | 215104 江蘇*** | 國省代碼： | 江蘇;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 水凝膠 后肢 絲素 衰老 絲素蛋白水凝膠 生物技術領域 細胞外基質 轉運 應用 滯留 細胞 釋放 傳遞 | ||
1.過表達ncRNA的外泌體，其特征在于，所述ncRNA的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示；所述間充質干細胞為臍帶間充質干細胞。
2.權利要求1所述過表達ncRNA的外泌體的制備方法，其特征在于，由miRNAmimics轉染間充質干細胞后，經培養制得；所述ncRNA的序列如SEQ ID NO:1所示；所述間充質干細胞為臍帶間充質干細胞。
3.根據權利要求1所述的外泌體，其特征在于，所述培養采用去除外泌體的含有10％胎牛血清的α-MEM培養基。
4.根據權利要求1所述的外泌體，其特征在于，所述培養后，收集上清液經分離獲得過表達miRNA的外泌體。
5.權利要求1所述的外泌體或權利要求2～4任一項所述制備方法制備的外泌體在制備促進缺血組織血流恢復和/或抗衰老的制劑中的應用。
6.一種促進缺血組織血流恢復和/或抗衰老的制劑，其特征在于，包括由絲素蛋白和過表達miRNA的外泌體制得的凝膠；
所述過表達ncRNA的外泌體為權利要求1所述的外泌體或權利要求2～4任一項所述制備方法制備的外泌體。
7.根據權利要求6所述的制劑，其特征在于，所述絲素蛋白與外泌體的質量比為20:0.55。
8.權利要求6或7所述制劑的制備方法，其特征在于，將絲素蛋白水溶液經3次30％強度的超聲，每次超聲30s，然后與權利要求1所述的外泌體或權利要求2～4任一項所述制備方法制備的外泌體混合，35℃～40℃放置5min～10min，制成凝膠制劑。
9.根據權利要求8所述的制備方法，其特征在于，所述絲素蛋白水溶液的濃度為0.04g/mL。
10.根據權利要求8或9所述制劑的制備方法，其特征在于，所述絲素蛋白水溶液的體積與外泌體的質量比為0.5mL：0.55mg。
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