[發明專利]一種磁珠時間分辨熒光免疫定量檢測NGAL試劑盒

在審

• 申請號: 201810135472.6
• 申請日: 2018-02-09
• 公開（公告）號: CN108333371A
• 公開（公告）日: 2018-07-27
• 發明（設計）人: 李根平
• 申請（專利權）人: 廣州源起健康科技有限公司
• 主分類號: G01N33/68
• 分類號: G01N33/68
• 代理公司: 廣州市深研專利事務所 44229
• 代理人: 姜若天

本發明公開了一種磁珠時間分辨熒光免疫定量檢測NGAL試劑盒，包括包被NGAL單克隆抗體的免疫磁珠、NGAL校準品溶液、銪標記的NGAL單克隆抗體溶液、清洗液和增強液。所述的包被NGAL免疫磁珠為帶有官能團修飾的直徑1~3μm的超順磁珠與NGAL單克隆抗體共價偶聯物。本發明的靈敏度高，NGAL的靈敏度為1ng/mL，血清(漿)、尿液樣本不需要稀釋；檢測時間短，30min出報告；樣品需求量少，一次上樣只需50μL；配套全自動時間分辨免疫分析儀，操作簡單，無人為誤差并節省人力。

技術領域

本發明涉及體外試劑檢測技術領域，具體地說，本發明涉及一種磁珠時間分辨熒光免疫定量檢測NGAL試劑盒。

背景技術

急性腎損傷(Acute Kidney Injury，AKI)是由各種原因引起的腎功能在短時間(幾小時至幾天)內突然下降而出現的臨床綜合癥。AKI臨床多發且病死率較高，流行病學調查表明在總住院病人中的發病率為5％～7％，而在重癥監護病房病人中發病率為25％，其中病死率約為50％～80％。因此盡早診斷AKI已成為腎病治療的一個關鍵因素。但缺乏特異性的早期臨床診斷指標，是治療該病的主要障礙。

中性粒細胞明膠酶相關載脂蛋白(Neutrophil Gelatinase-associatedLipocalin，NGAL)是脂質運載蛋白lipocalin超家族的2號成員，相對分子質量為25kD，由人類中性粒細胞分泌。缺血性或腎毒性腎損傷時，NGAL由腎臟大量表達，并被釋放到尿液和血漿。NGAL含量在損傷發生后2小時內升高，使之成為早期且敏感的腎損傷生物標志物。

目前檢測NGAL的方法主要有熒光免疫層析法、膠乳增強免疫比濁法、化學發光法。熒光免疫層析法和膠乳增強免疫比濁法雖然操作簡單、檢測時間短，但其存在檢測靈敏度低、準確度較差、重復性差等缺點；化學發光法雖然具有靈敏度和準確度高、線性范圍寬等優點，但是存在儀器設備昂貴、檢測時間長等缺點，不適合基層社區醫院使用。因此，我們需要更快提供準確結果的檢測方法。

發明內容

本發明的目的在于針對現有技術中存在的上述問題，提出了一種磁珠時間分辨熒光免疫定量檢測NGAL試劑盒。本發明將時間分辨熒光免疫分析技術與磁微粒相結合，提供了一種成本低廉、操作簡單、準確、靈敏度高、檢測范圍寬的，基于磁微粒的時間分辨熒光免疫分析試劑盒，能夠定量檢測樣品中NGAL含量，檢測結果更加準確可靠，具有更高的檢測靈敏度和特異性，并達到了較佳的性能參數。本發明的試劑盒將大大提高AKI的診斷率，在AKI早期診斷、療效觀察和預后判斷中發揮越來越重要的作用。

為實現上述目的，本發明采用了如下技術方案：

一種磁珠時間分辨熒光免疫定量檢測NGAL試劑盒，包括包被NGAL單克隆抗體的免疫磁珠、NGAL校準品溶液、銪標記的NGAL單克隆抗體溶液、清洗液和增強液。

在上述磁珠時間分辨熒光免疫定量檢測NGAL試劑盒中，所述的包被NGAL免疫磁珠為帶有官能團修飾的直徑1～3μm的超順磁珠與NGAL單克隆抗體共價偶聯物，其中所使用的磁珠為羧基磁珠、氨基磁珠、羥基磁珠、甲苯磺酰基磁珠、NHS磁珠、鏈酶親和素磁珠、蛋白A磁珠、蛋白G磁珠、抗小鼠IgG磁珠、親水磁珠、疏水磁珠中的一種或幾種。

在上述磁珠時間分辨熒光免疫定量檢測NGAL試劑盒中，所述的單克隆抗體為針對NGAL不同表位的抗體。