[發明專利]一種小黃魚蛋白粉及其用途

在審

• 申請號: 201810130342.3
• 申請日: 2018-02-08
• 公開（公告）號: CN108450639A
• 公開（公告）日: 2018-08-28
• 發明（設計）人: 葉常青;謝超
• 申請（專利權）人: 舟山海研食品科技有限公司
• 主分類號: A23J1/04
• 分類號: A23J1/04;A23J3/04;A61K38/01
• 代理公司: 北京華識知識產權代理有限公司 11530
• 代理人: 趙永強

1.一種小黃魚蛋白粉，其制備方法包括：預處理、脫脂、提取水溶蛋白、提取鹽溶蛋白、提取醇溶蛋白、制備總蛋白，其特征在于：所述預處理步驟為：在液氮環境中，將小黃魚組織按料液比1:8-10加入裂解液中并研磨均勻，再用電動勻漿器勻漿60-90秒，1-4℃冰箱中靜置1-2小時，于10000-13000r/min、1-4℃條件下離心60-90分鐘，收集上清，懸浮及沉淀重復研磨、勻漿、離心后取上清，合并上清液后過濾，將濾液濃縮至30-35%分裝至-60～-80℃保存，備用。

2.根據權利要求1所述的一種小黃魚蛋白粉，其特征在于：所述預處理步驟中的裂解液為3-5mol/L尿素、3-5mol/L硫脲、1-2%CHAPS、30-45mmol/LTris、7-8mmol/L 4-乙基苯甲酸、0.4-0.5mmol/L L-赤蘚糖，余量為去離子水，使用前加入65-85mmol/L DTT。

3.根據權利要求1所述的一種小黃魚蛋白粉，其特征在于：所述脫脂步驟為：將預處理后的濃縮液在真空冷凍干燥機中冷凍干燥24-36小時，粉碎，采用超臨界CO₂萃取，萃取壓力為45-60MPa、溫度為50-55℃，萃取60-90分鐘回收油脂并得到脫脂粕，粉碎后得脫脂粉。

4.根據權利要求3所述的一種小黃魚蛋白粉，其特征在于：所述脫脂步驟中，超臨界CO₂萃取的萃取壓力為45-60MPa、溫度為50-55℃。

5.根據權利要求1所述的一種小黃魚蛋白粉，其特征在于：所述提取水溶蛋白步驟為：將35-40份小黃魚脫脂粉放入容器中，加400-450份去離子水，室溫條件下攪拌浸提2-3小時，然后在8000-10000r/min、1-4℃條件下離心15-20分鐘，過濾取上清；在沉淀中加入200-240份去離子水對再次水提，操作條件與前者相同，合并2次所得的上清液，冷凍干燥，所得樣品即為水溶蛋白。

6.根據權利要求1所述的一種小黃魚蛋白粉，其特征在于：所述提取鹽溶蛋白步驟為：向提取水溶蛋白后的沉淀加入350-360份1-1.2mol/L氯化鈉溶液，室溫條件下攪拌浸提2-3小時，然后在8000-10000r/min、1-4℃條件下離心15-20分鐘，過濾取上清；在沉淀中加入160-180份1-1.2mol/L氯化鈉溶液再次鹽提，操作條件與前者相同，合并上清液，透析后離心獲得沉淀，冷凍干燥即得鹽溶蛋白。

7.根據權利要求6所述的一種小黃魚蛋白粉，其特征在于：所述提取鹽溶蛋白步驟中，透析操作為：將上清液在1-4℃溫度下置于去離子水中透析72-96小時，透析膜規格為8000-12000Da，其間換水2-3次。

8.根據權利要求1所述的一種小黃魚蛋白粉，其特征在于：所述提取醇溶蛋白步驟為：向提取鹽溶蛋白后所得的沉淀加入80-100份體積分數為75-85%的乙醇，室溫條件下攪拌浸提2-3小時，然后在8000-10000r/min、1-4℃條件下離心15-20分鐘，過濾取上清液；在沉淀中加入20-25份體積分數為75-85%的乙醇再次浸提，操作條件與前者相同，合并上清液，旋轉蒸發濃縮后再進行冷凍干燥即得醇溶蛋白。

9.根據權利要求1所述的一種小黃魚蛋白粉，其特征在于：所述制備總蛋白步驟為：將提取醇溶蛋白后所得的沉淀用400-500份0.05-0.08mol/L的氫氧化鈉溶液進行浸提，室溫條件下攪拌浸2-3小時，然后在8000-10000r/min、1-4℃條件下離心15-30分鐘，過濾取上清液，然后在沉淀中加入200-220份0.05-0.08mol/L氫氧化鈉溶液進行再次浸提，操作條件與前者相同；合并2次所得上清液，邊攪拌邊向其中滴加0.2-0.25g/mL的三氯乙酸，至三氯乙酸的最終濃度為0.05-0.06g/mL，離心后取沉淀，用預冷的丙酮洗滌3-4次，然后將沉淀進行熱風干燥，所得樣品即為堿溶蛋白，將水溶蛋白、鹽溶蛋白、醇溶蛋白與堿溶蛋白混合即得小黃魚蛋白粉。

10.一種小黃魚蛋白粉的用途，其特征在于：所述小黃魚蛋白粉作為一種優質的食品蛋白質資源在保健品、制劑、肽類藥物再加工領域的應用。