[發明專利]PLEKHO1基因的用途及其相關藥物

在審

• 申請號: 201810128244.6
• 申請日: 2018-02-08
• 公開（公告）號: CN108342389A
• 公開（公告）日: 2018-07-31
• 發明（設計）人: 陳新頁
• 申請（專利權）人: 上海滴英生物醫藥科技有限公司
• 主分類號: C12N15/113
• 分類號: C12N15/113;C12N15/867;C12N7/01;C12Q1/6886;A61K31/713;A61K31/7088;A61P35/00
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1.一種降低腫瘤細胞中PLEKHO1基因表達的分離的核酸分子，所述核酸分子包含雙鏈RNA或shRNA，所述雙鏈RNA中含有能夠在嚴緊條件下與PLEKHO1基因雜交的核苷酸序列；所述shRNA中含有能夠在嚴緊條件下與PLEKHO1基因雜交的核苷酸序列。

2.如權利要求1所述的一種降低腫瘤細胞中PLEKHO1基因表達的分離的核酸分子，其特征在于，所述雙鏈RNA包含第一鏈和第二鏈，所述第一鏈和第二鏈互補共同形成RNA二聚體，并且所述第一鏈的序列與PLEKHO1基因中的靶序列基本相同；所述shRNA包括正義鏈片段和反義鏈片段，以及連接所述正義鏈片段和反義鏈片段的莖環結構，所述正義鏈片段和所述反義鏈片段的序列互補，并且所述正義鏈片段的序列與PLEKHO1基因中的靶序列基本相同。

3.如權利要求2所述的一種降低腫瘤細胞中PLEKHO1基因表達的分離的核酸分子，其特征在于，所述PLEKHO1基因的靶序列含有SEQ ID NO:1所示序列；所述雙鏈RNA為小干擾RNA，所述小干擾RNA第一鏈的序列為SEQ ID NO:9所示序列；所述shRNA的序列為SEQ ID NO:14所示序列。

4.一種PLEKHO1基因干擾核酸構建體，含有編碼權利要求1-3任一權利要求所述分離的核酸分子中的shRNA的基因片段，并能表達shRNA。

5.如權利要求4所述PLEKHO1基因干擾核酸構建體，其特征在于，所述PLEKHO1基因干擾核酸構建體為干擾慢病毒載體。

6.如權利要求5所述PLEKHO1基因干擾核酸構建體，其特征在于，所述干擾慢病毒載體由將編碼所述shRNA的基因片段克隆入慢病毒載體后獲得，所述慢病毒載體選自：

pLKO.1-puro、pLKO.1-CMV-tGFP、pLKO.1-puro-CMV-tGFP、pLKO.1-CMV-Neo、pLKO.1-Neo、pLKO.1-Neo-CMV-tGFP、pLKO.1-puro-CMV-TagCFP、pLKO.1-puro-CMV-TagYFP、pLKO.1-puro-CMV-TagRFP、pLKO.1-puro-CMV-TagFP635、pLKO.1-puro-UbC-TurboGFP、pLKO.1-puro-UbC-TagFP635、pLKO-puro-IPTG-1xLacO、pLKO-puro-IPTG-3xLacO、pLP1、pLP2、pLP/VSV-G、pENTR/U6、pLenti6/BLOCK-iT-DEST、pLenti6-GW/U6-laminshrna、pcDNA1.2/V5-GW/lacZ、pLenti6.2/N-Lumio/V5-DEST、pGCSIL-GFP或pLenti6.2/N-Lumio/V5-GW/lacZ中的任一。

7.一種PLEKHO1基因干擾慢病毒，由權利要求5-6任一權利要求所述干擾慢病毒載體在慢病毒包裝質粒、細胞系的輔助下，經過病毒包裝而成。

8.一種用于預防或治療腫瘤的藥物組合物，其有效物質含有權利要求1-3任一權利要求所述的降低腫瘤細胞中PLEKHO1基因表達的分離的核酸分子，權利要求4-6任一權利要求所述PLEKHO1基因干擾核酸構建體和/或權利要求7所述的PLEKHO1基因干擾慢病毒，以及藥學上可接受的載體、稀釋劑或賦形劑。

9.如權利要求8所述的一種用于預防或治療腫瘤的藥物組合物，在制備治療肺癌或膠質瘤的腫瘤治療藥物中的應用；PLEKHO1基因在制備或篩選腫瘤治療藥物中的用途。

10.一種用于降低腫瘤細胞中PLEKHO1基因表達的試劑盒，其特征在于，所述試劑盒包括：存在于容器中的，權利要求1-3任一權利要求所述的分離的核酸分子，權利要求4-6任一權利要求所述PLEKHO1基因干擾核酸構建體和/或權利要求7所述的PLEKHO1基因干擾慢病毒。