[發明專利]一種天然吲哚，其制備方法及應用

有效

• 申請號: 201810127225.1
• 申請日: 2018-02-08
• 公開（公告）號: CN108299274B
• 公開（公告）日: 2021-01-15
• 發明（設計）人: 譚琳;伊莎貝爾;孫香榮;范夢凱;馬伏寧
• 申請（專利權）人: 中國熱帶農業科學院海口實驗站
• 主分類號: C07D209/08
• 分類號: C07D209/08;C12P17/10;A61P3/10;A61P25/28;C11B9/00;C12R1/63
• 代理公司: 北京匯思誠業知識產權代理有限公司 11444
• 代理人: 王剛;龔敏

1.一種吲哚的制備方法，其特征在于，至少包括如下步驟：

步驟1、提供新喀里多尼亞菌的發酵液，其中，所述新喀里多尼亞菌的保藏編號為CCTCCNO：M 2017802；

步驟2、將發酵液用有機溶劑進行萃取，得到粗提物；

步驟3、將粗提物用硅膠柱進行層析，以100%的己烷、體積比為6.5~7：3~3.5的己烷-乙酸乙酯、體積比為4.5~5.5：4.5~5.5的己烷-乙酸乙酯、100%的乙酸乙酯、體積比為6.5~7：3~3.5的乙酸乙酯-甲醇、體積比為4.5~5.5：4.5~5.5乙酸乙酯-甲醇、100%的甲醇作為洗脫劑依次洗脫，洗脫的同時采用薄層層析色譜收集相同的成分，得到8個組分，依次為F1、F2、F3、F4、F5、F6、F7和F8；

步驟4、將制備得到的F3用硅膠柱進行層析，以體積比為7.5~8.5：1.5~2.5的己烷-丙酮作為洗脫劑進行洗脫，洗脫的同時采用薄層層析色譜收集相同的成分，得到7個組分，依次為F3.1、F3.2、F3.3、F3.4、F3.5、F3.6和F3.7；

步驟5、將制備得到的F3.2用硅膠柱進行層析，以己烷-丙酮的體積比分別為9:1、8:2、7:3、6:4、5:5作為洗脫劑進行梯度洗脫，洗脫的同時采用薄層層析色譜收集相同的成分，得到8個組分，依次為F3.2.1、F3.2.2、F3.2.3、F3.2.4、F3.2.5、F3.2.6、F3.2.7和F3.2.8；其中的組分F3.2.2即為所述吲哚。

2.根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于，在步驟1中，所述發酵液的制備方法為：將所述新喀里多尼亞菌接種到液體培養基中，28℃~30℃培養10~14天，離心收獲上清，即得所述發酵液。

3.根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于，在步驟2中，所述有機溶劑為乙酸乙酯，所述有機溶劑與所述發酵液的體積比為1：0.5~1.5；萃取的次數為1~3次，萃取的時間為12~36小時。

4.根據權利要求3所述的制備方法，其特征在于，萃取的時間為24小時。

5.根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于，萃取后收集有機相，在40℃~45℃的條件下進行干燥，即得所述粗提物。

6.根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于，在步驟3中，以100%的己烷、體積比為7:3的己烷-乙酸乙酯、體積比為5:5的己烷-乙酸乙酯、100%的乙酸乙酯、體積比為7:3乙酸乙酯-甲醇、體積比為5:5乙酸乙酯-甲醇、100%的甲醇作為洗脫劑依次洗脫；

在步驟4中，以體積比為8：2的己烷-丙酮作為洗脫劑進行洗脫。

7.根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于，在步驟3中所用的硅膠柱為60目，在步驟4中所用的硅膠柱為60目，在步驟5中所用的硅膠柱為60目。

8.根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于，在步驟3中，通過對所收集得到8個組分進行乙酰膽堿酯酶抑制活性和α-葡萄糖苷酶抑制活性分析，F3同時具有乙酰膽堿抑制活性和α-葡萄糖苷酶抑制活性；

在步驟4中，通過對所收集得到7個組分進行乙酰膽堿酯酶抑制活性和α-葡萄糖苷酶抑制活性分析，僅F3.2同時具有乙酰膽堿酯酶抑制活性和α-葡萄糖苷酶抑制活性；

在步驟5中，通過對所收集得到8個組分進行乙酰膽堿酯酶抑制活性和α-葡萄糖苷酶抑制活性分析，僅F3.2.2同時具有乙酰膽堿酯酶抑制活性和α-葡萄糖苷酶抑制活性。

9.根據權利要求8所述的制備方法，其特征在于，在步驟3中，通過對所收集得到8個組分進行乙酰膽堿酯酶抑制活性和α-葡萄糖苷酶抑制活性分析，在同時具有乙酰膽堿抑制活性和α-葡萄糖苷酶抑制活性的組分中，F3的乙酰膽堿抑制活性按照乙酰膽堿抑制活性由大到小的順序排列為第二位；F3的α-葡萄糖苷酶抑制活性按照α-葡萄糖苷酶抑制活性由大到小的順序排列為第二位。