[發明專利]一種基于大腸埃希氏菌快速篩選電子煙液的方法

有效

• 申請號: 201810119217.2
• 申請日: 2018-02-06
• 公開（公告）號: CN108315385B
• 公開（公告）日: 2021-10-26
• 發明（設計）人: 米其利;高茜;段沅杏;趙偉;鞏效偉;樓牧夢;劉曉艷;郭紹翠;夭建華
• 申請（專利權）人: 云南中煙工業有限責任公司
• 主分類號: C12Q1/18
• 分類號: C12Q1/18;C12Q1/10;C12Q1/06;C12R1/19
• 代理公司: 昆明正原專利商標代理有限公司 53100
• 代理人: 金耀生;羅繼元

本發明涉及一種基于大腸埃希氏菌快速篩選電子煙液的方法，屬于電子煙研發技術領域。本發明將體外抑菌檢測法和煙液調配技術組合，首先制備含不同植物提取物的煙液，采用微量稀釋抑菌檢測技術對所制備的煙液進行篩選，獲得具有抑菌活性的煙液。本發明方法的特點在于：采用大腸埃希氏菌作為測試菌株，確定了適用于電子煙液的微量稀釋抑菌檢測體系，篩選檢測效率高，可在較短時間內獲得具抑菌活性的煙液配方，為安全、高品質電子煙液的獲得提供有效技術支持。

技術領域

本發明涉及一種基于大腸埃希氏菌快速篩選電子煙液的方法，屬于電子煙研發技術領域。

背景技術

電子煙，又稱為電霧化卷煙，是一種外觀、生理感受、心理感知、吸食方式等方面接近傳統卷煙的新型煙草制品。電子煙通過電子加熱手段向呼吸系統傳送尼古丁，主要由煙桿、霧化器、吸嘴、充電器及煙彈等組成。煙液是電子煙產品的主要吸食原料，在低溫受熱下揮發產生煙霧，其配方也是電子煙的核心技術之一。但是，煙液煙霧的香氣味與傳統卷煙味道差別較大，消費者接受度不高，因此煙液配方需要改進，以滿足消費者的需求。例如發明專利CN104397871B公開了一種含茶葉提取物的電子煙煙液配方，添加了茶葉提取物，提升了抽吸香煙的煙氣、豐富煙香、盡可能減少吸煙危害，還起到生津保潤，減少刺激和提高電子煙質量的作用。發明專利CN105876867A公開了一種含杜仲提取物的電子煙液配方，除了具有較好的香氣，口感好，還具有抗癌防癌、抗病毒、抗氧化、抗衰老、降血壓、消炎抑菌、保膽利肝、鎮靜催眠、補腎強身、止痛安胎、減肥和防止老年癡呆等作用。因此，天然的植物提取物是電子煙液的優質配方原料。

此外，電子煙是一種反復使用的電子產品，長時間使用容易滋生細菌，研發具有抑菌活性的煙液成為電子煙研發的重要內容。細菌的種類非常繁多，對人體健康的影響和作用差異巨大，有些作用不明顯，有些具有益生作用，被稱為益生菌，有些具有危害作用，被稱為致病菌。大量研究表明，同一活性成分對不同細菌的抑菌作用差異顯著，因此針對不同測試菌株篩選抑菌活性成分非常重要。目前尚沒有針對不同細菌篩選電子煙油抑菌活性的公開報道。

發明內容

本發明的目的在于克服現有技術之不足，提供一種基于大腸埃希氏菌快速篩選電子煙液的方法，將體外抑菌檢測法和煙液調配技術組合，先制備含不同植物提取物的煙液，采用微量稀釋抑菌檢測技術對所制備的煙液進行篩選，獲得具有抑菌活性的煙液，為安全、高品質電子煙液的獲得提供有效技術支持。

大腸埃希氏菌(Escherichia coli)，俗稱大腸桿菌，是埃希氏菌屬的代表菌，是人和許多動物腸道中最主要且數量最多的一種細菌，一般情況下多數不致病，在一定條件下可引起腹瀉等疾病。本發明基于大腸埃希氏菌，將體外抑菌檢測法和煙液調配技術組合，首先制備含不同植物提取物的煙液，采用微量稀釋抑菌檢測技術對所制備的煙液進行篩選，獲得具有較好抑菌活性的煙液，為安全、高品質電子煙液的獲得提供有效技術支持。

本發明的技術方案為：一種基于大腸埃希氏菌快速篩選電子煙液的方法包括以下步驟：

(1)受試電子煙液樣品的制備

稱取基礎電子煙液樣品10.0g，根據感官評吸效果確定植物提取物的添加量，添加量范圍0.01～0.50g，對照組為基礎電子煙液。

(2)抑菌活性的測定

1)菌株活化培養：自液氮罐中取出凍存的菌株，置于37℃水浴中快速融解得到復蘇菌液；將復蘇菌液以1.0％(v/v)的比例接種于滅菌營養肉湯培養基中，置于恒溫水浴搖床中36℃，120rpm培養16～20h，獲得第1次活化菌液；再將第1次活化菌液以1.0％(v/v)的比例接種于滅菌營養肉湯培養基中，然后置于恒溫水浴搖床中36℃，120rpm培養16～20h，得到第2次活化菌液；