[發明專利]一種三價卵黃抗體口服液的制備方法

在審

• 申請號: 201810114766.0
• 申請日: 2018-02-06
• 公開（公告）號: CN110115762A
• 公開（公告）日: 2019-08-13
• 發明（設計）人: 杜新永;劉軍偉;趙立媛;張敏
• 申請（專利權）人: 青島潤達生物科技有限公司
• 主分類號: A61K39/395
• 分類號: A61K39/395;A61K9/08;A61P31/20
• 代理公司: 北京匯信合知識產權代理有限公司 11335
• 代理人: 陳圣清

本發明公開了一種三價卵黃抗體口服液的制備方法，將初步制備得到的卵黃抗體水溶液進行微孔過濾，依次加入pH6.6的PBS液和硫柳汞，其中卵黃抗體水溶液：PBS液：硫柳汞的體積比為（0.7?0.9）：（0.04?0.06）：（0.001?0.002），混勻，用蠟密封，置于4℃冷藏保存，即得。本發明方法制備的初制卵黃抗體純度能夠達到85%，相較于現有方法，純度得到了顯著的提高；經氯仿?甲醇體系處理后可以很大程度上保證卵黃抗體的生物活性，對于小鵝瘟、番鴨細小、鴨大舌病特異性強，易于市場推廣。

技術領域

本發明屬于抗體藥物領域，特別是涉及一種小鵝瘟、番鴨細小、鴨大舌病三價卵黃抗體口服液的制備方法。

背景技術

小鵝瘟由鵝細小病毒引起的雛鵝急性敗血性傳染病。病雛鵝的臨診特點是精神委頓，食欲廢絕，嚴重下痢，有時出現神經癥狀，死亡率高。對養鵝業的發展，影響極大，搞好小鵝瘟的防治工作是當務之急，小鵝瘟不僅可以感染鵝，在一定程度上也可感染其他禽類。

番鴨細小由細小病毒引起，是雛番鴨的一種急性傳染病。病理變化是纖維素性腸炎、胰臟呈點狀壞死，以3周齡內的雛番鴨多發，最早是3日齡發病。患病雛番鴨精神沉郁、厭食、怕冷、軟腳、喜蹲、喘氣、張口呼吸，喙發紺，顯著消瘦。糞便稀薄呈灰白或灰黃色。患病后期角弓反張及腿部癱瘓，病程2～7天。少數病愈雛番鴨大多成為生長不良的僵鴨，出現個體小、消瘦、掉羽等癥狀；

鴨大舌病是由多種原因引起的一種以鴨鵝舌頭長，上下喙短，舌頭被長長的露在喙的外面為特征的一種疾病。由于鴨鵝的舌頭被長長的伸出并露在喙（嘴）的外面，使鴨鵝無法采食及飲水，鴨鵝常常因無法進食而死亡。發病較輕的鴨只也常因舌頭外漏而影響賣相，造成不收此類鴨只或扣除斤稱，出欄時屠宰場每只扣2-3元，致使養鴨戶蒙受極大的經濟損失。

卵黃抗體IgY 是的一種免疫球蛋白Ig，IgY 在功能上相當于哺乳動物IgG，但結構上有所不同，具有典型的的免疫球蛋白的空間構象。卵黃抗體具有很多優越性。（1）由于鳥類與哺乳類動物種系發生學的差距，鳥類更適于生產抗哺乳動物抗原的特異性抗體。卵黃抗體不會激發補體系統，不與抗哺乳動物抗原的抗體發生反應，不與哺乳動物和細菌的Fc受體結合，這在免疫診斷中具有重要意義。（2）卵黃抗體作為一種具有生物活性的免疫球蛋白，在貯存、生產、加工、攝食及消化過程中保證其穩定性是非常關鍵的。多項試驗表明，IgY具有較好的穩定性，耐酸、耐堿、耐熱。卵黃抗體較易保存，4℃條件下存放5 年或室溫條件下存放6 個月對抗體活性無明顯影響。（3）卵黃抗體量大，成本低，便于規模化生產。卵黃中抗體濃度能長期維持在相當于甚至超過血清抗體濃度的水平上。總的來講，卵黃抗體對動物沒有毒副作用，用卵黃抗體治療動物疾病不但避免了血清價格昂貴、產量低的缺點，而且可以避免血清在治療過程中引起的副作用，是一種很有前途的新型免疫球蛋白制劑。因此，卵黃抗體在禽畜疾病診斷、治療和預防的應用越來越多。目前卵黃抗體的制備及生產工藝已經成熟，可以保質保量的生產。

發明內容

本發明的目的，在于提供一種小鵝瘟、番鴨細小、鴨大舌病三價卵黃抗體口服液的制備方法，該制備方法簡單，能夠最大程度保留抗體活性，對于小鵝瘟、番鴨細小、鴨大舌病特異性。

本發明的技術方案是：

一種三價卵黃抗體口服液的制備方法，步驟如下：

（1）選取無特定病原體蛋雞在潔凈養殖場隔離飼養，對蛋雞進行3次免疫，每次給每只雞注射小鵝瘟、番鴨細小、鴨大舌病三價疫苗注射劑量分別為（0.6-0.8mL）、（1.0-1.4mL）、（2.2-2.6mL），每次間隔15天；

（2）完成第3次免疫21天后，收集雞蛋，對卵黃中的卵黃抗體進行免疫學檢測，小鵝瘟、番鴨細小、鴨大舌病的卵黃抗體瓊脂擴散效價達到1:16以上的雞蛋為小鵝瘟、番鴨細小、鴨大舌病病毒高免雞蛋，收集貯存在16℃條件下備用；