[發明專利]一種脂肪酶-磷酸鈣復合酶晶體、其制備方法及其催化合成克林霉素棕櫚酸酯的方法

有效

• 申請號: 201810108258.1
• 申請日: 2018-02-02
• 公開（公告）號: CN108342433B
• 公開（公告）日: 2020-12-22
• 發明（設計）人: 王安明;章鵬飛;余建云
• 申請（專利權）人: 杭州師范大學
• 主分類號: C12P19/64
• 分類號: C12P19/64;C12N9/20
• 代理公司: 深圳市合道英聯專利事務所(普通合伙) 44309
• 代理人: 謝成毅;廉紅果

本發明一種脂肪酶?磷酸鈣復合酶晶體、其制備方法及其催化合成克林霉素棕櫚酸酯的方法，屬于抗生素藥物合成技術領域。所述方法以式I所示克林霉素游離堿和式II所示棕櫚酸乙烯酯為底物，在脂肪酶?磷酸鈣復合酶晶體的催化作用下，與反應溶劑在30～80℃進行反應6～30h，制得式III所示克林霉素棕櫚酸酯。用于上述方法的一種脂肪酶?磷酸鈣復合酶晶體，所述脂肪酶?磷酸鈣復合酶晶體為疏棉狀嗜熱絲孢菌脂肪酶的磷酸鈣晶體。本發明具有以下有益效果：方法成本少，固定化酶不溶于有機溶劑，可多次循環使用，收率最高可達75.8％，安全可靠且環境污染少，適合于工業化生產。

技術領域

本發明屬于抗生素藥物合成技術領域，涉及一種脂肪酶-磷酸鈣復合酶晶體、其制備方法及其催化合成克林霉素棕櫚酸酯的方法。

背景技術

酶是一類由生物細胞產生且具有催化活性的特殊三維空間構象的蛋白質。眾所周知，因綠色環保和節能高效，生物催化作為綠色催化的一種而備受人們的關注。然而酶是生物催化中使用最普遍的，經常被用作催化劑。酶作為一種生物催化劑催化的反應具有專一性強(酶催化具有區域選擇性和立體選擇性)、催化效率高、在常溫常壓等溫和條件下能進行操作等優點。目前，酶催化技術在醫藥方面的應用是當前最為關注的領域之一，這主要是因為醫藥產品一般附加值高，且大多是光學活性物質，作為十分優良的催化劑—酶，用于多種高效藥物的合成及制備將十分有效，潛力巨大。

克林霉素又名氯潔霉素，由Magerlein等人開發出發，是以氯離子取代林可霉素分子中第7位羥基而得到的半合成衍生物，其抗菌作用較林可霉素強4～8倍，在臨床上已逐步取代了林可霉素的位置。其制品有克林霉素鹽酸鹽、克林霉素棕櫚酸酯、克林霉素磷酸酯。

克林霉素作用機制為抑制細菌蛋白質合成，抗菌譜與林可霉素相同，耐藥性較小。其臨床上主要用于厭氧菌引起的腹腔和婦科感染，還用于敏感的革蘭氏陽性菌引起的呼吸系統、關節、軟組織感染，是治療金黃色葡萄球菌骨髓炎的首選藥物。由于其適用癥為人群常見病情，因此成為國內穩步增長的一個品種。

鹽酸克林霉素棕櫚酸酯是一種常用的抗生素。它是由鹽酸克林霉素經過某種化學修飾而得到的，由于克林霉素的口味極差，故不適合口服用藥，而制成克林霉素棕櫚酸酯后其口味大大改善，適合口服用藥。克林霉素棕櫚酸酯為一前體藥物，口服用藥后很快就在人體內水解出游離狀的克林霉素從而發揮效用。它的抗菌作用是同類抗生素林可霉素的2～8倍，對厭氧桿菌、革蘭陽性需氧菌、衣原體、支原體等均有活性。臨床上常用于應對敏感菌引起的敗血癥、細菌性內膜炎、呼吸道遂、骨關節、軟組織、耳部、泌尿生殖系統感染，以及對青霉素過敏的患者；此外對各種厭氧菌感染亦適用，并廣泛用于治療厭氧菌引起的潰瘍，對各種類型的骨髓炎更有明顯的效果。

國內已有多家企業開發了克林霉素系列品種。截至2006年10月，SFDA已核準下達的克林霉素系列原料藥生產批件為47個。雖然持有克林霉素原料藥生產批文企業已有30家，但實際上仍在生產的企業僅為10余家，生產規模有限，最大的生產規模約為60噸，較小的生產能力僅為數噸。全國總體規模為130噸左右，主要生產企業有浙江臺州海翔藥業、重慶凱林制藥、浙江誠意藥業、蘇州第四制藥廠、南陽普康等。

在半合成青霉素、頭孢類的快速發展下，克林霉素原料藥的工業化生產相對較為平穩，沒有大起大落的現象，20多年來產量增長緩慢，從而影響了上游產品林可霉素的進一步消化。目前，從林可霉素原料藥產量來看，2004年已超過了2500多噸，2005年又比上一年增長了5.44％，為2710.78噸。然而，其下游制劑產品并不暢銷，其主要作為克林霉素系列產品的原料使用。

在林可霉素、慶大霉素用量銳減的形勢下，克林霉素系列產品市場受到生產企業的廣泛看好，由此推動了克林霉素系列產品近年來迅速增長。目前市面上的克林霉素是制劑品種繁多，包括注射器、乳膏、滴眼液、載藥珊瑚人工骨、復合蓋髓劑，成為一個具有多種釋藥途徑的成人、兒童口服的多劑型藥物。