[發明專利]一種從藤五加莖皮中分離出茋類有效成分的方法

在審

• 申請號: 201810105960.2
• 申請日: 2018-02-02
• 公開（公告）號: CN108276375A
• 公開（公告）日: 2018-07-13
• 發明（設計）人: 胡浩斌;梁海鵬;李海明;袁如楠;韓明虎;張臘臘;武蕓
• 申請（專利權）人: 隴東學院
• 主分類號: C07D313/14
• 分類號: C07D313/14;C07C41/34;C07C41/36;C07C43/23;C07C43/215;C07C37/70;C07C37/82;C07C39/21;C07D307/83
• 代理公司: 蘭州中科華西專利代理有限公司 62002
• 代理人: 李艷華

本發明涉及一種從藤五加莖皮中分離出茋類有效成分的方法，該方法包括以下步驟：⑴將新鮮的藤五加莖皮晾干、粉碎、過篩后，經微波提取、減壓濃縮，得到粗提物；⑵粗取物依次用石油醚、乙酸乙酯分別萃取至萃取液變為無色后，將乙酸乙酯萃取液合并，經減壓蒸干得待分離樣品；⑶將待分離樣品用混合溶劑超聲溶解后得到樣品溶液；⑷確定制備型HSCCC兩相溶劑體系；⑸將固定相和流動相分別超聲脫氣后，依次泵入到制備型逆流色譜儀的多層螺旋管中，再注入樣品溶液進行純化分離；⑹按色譜圖依次收集到7個色譜峰組分，將7個組分分別經減壓濃縮、真空干燥后，得到7種茋類化合物。本發明操作簡單易行、提取量大、重現性好，所得7種茋類化合物的純度均高于98.0%。

技術領域

本發明涉及中藥材有效成分提取技術領域，尤其涉及一種從藤五加莖皮中分離出茋類有效成分的方法。

背景技術

藤五加（Acanthopanax leucorrhizus）屬五加屬多年生落葉小灌木，是我國特有的民間藥用植物，主要分布于陜西、甘肅、云貴、長江中下游等地。其藥用部位主要為根皮和莖皮，具有祛風濕、通經絡、強艋骨等功效，主治風濕痹痛、拘攣麻木、腰膝酸軟、半身不遂、跌打損傷、水腫、皮膚溫癢、陰囊濕腫等癥。藤五加莖皮的主要藥效成分為茋類、黃酮、苯丙素、萜類、木脂素、香豆素、多糖等類成分。研究發現，從藤五加莖皮中分離出的部分茋類成分對SMMC-7721（人肝癌細胞）、HL-60（人早幼粒白血病細胞）和MCF-7（人乳腺癌細胞）等具有不同程度的選擇性抑制作用，極少數茋類成分經過結構修飾后可作為有開發前景的抗腫瘤藥物的先導物。但由于大多數茋類化合物在自然界中含量低、難以分離和結構鑒定，限制了對其系統研究和開發。

目前，對于茋類成分的分離方法主要是傳統的溶劑輔助各種色譜法（如硅膠柱色譜、聚酰胺柱色譜、制備薄層色譜、ODS、Sephadex LH-20柱色譜及HPLC等方法），但都不同程度地存在著工藝復雜、周期長、溶劑消耗量大、提取率低、純度不高等缺點。

發明內容

本發明所要解決的技術問題是提供一種快捷、高效的從藤五加莖皮中分離出茋類有效成分的方法。

為解決上述問題，本發明所述的一種從藤五加莖皮中分離出茋類有效成分的方法，包括以下步驟：

⑴將新鮮的藤五加莖皮晾干、粉碎、過40~60目篩后，經微波提取、減壓濃縮，得到粗提物；

⑵將所述粗取物依次用其質量3~4倍體積的石油醚、乙酸乙酯分別萃取3~4次，直至萃取液變為無色后，將乙酸乙酯萃取液合并，經減壓蒸干得待分離樣品；

⑶將所述待分離樣品用混合溶劑按1000 mg:50 mL的比例超聲溶解后得到樣品溶液；

⑷經TLC篩選、分析型HSCCC優選，將正己烷、乙酸乙酯、甲醇和水按照5:4:7:5的體積比加入到分液漏斗中，充分振蕩均勻后靜置過夜，待兩相體系平衡后，上相為固定相，下相為流動相，即得制備型HSCCC兩相溶劑體系；

⑸將所述固定相和所述流動相分別超聲脫氣15 min后，依次泵入到制備型逆流色譜儀的多層螺旋管中，再注入所述樣品溶液進行純化分離；

⑹按色譜圖依次收集到7個色譜峰組分，將7個組分分別經減壓濃縮、真空干燥后，得到7種茋類化合物；所述7種茋類化合物分別為4-羥基-11,12, 13-三甲氧基二苯并[b,f]噁庚英、異丹葉大黃素、3,4′,5-三甲氧基-(E)-二苯乙烯、2′,3,4′,5-四羥基-(E)-二苯乙烯、3′-異戊烯基-(E)-白藜蘆醇、3,4′,5-三羥基-2′-甲氧基-(E)-二苯乙烯和2-(3′-羥基-5′-甲氧基苯)-4-羥基苯并呋喃。