[發明專利]一種用于多重干細胞復合凍干粉及溶媒的制備方法

有效

• 申請號: 201810102578.6
• 申請日: 2018-02-01
• 公開（公告）號: CN108272643B
• 公開（公告）日: 2020-11-17
• 發明（設計）人: 吳金蕓;張炬
• 申請（專利權）人: 伯仕利生物科技發展（鹽城）有限公司
• 主分類號: C12N5/0775
• 分類號: C12N5/0775;A61K8/02;A61K8/99;A61Q19/00
• 代理公司: 蘇州翔遠專利代理事務所(普通合伙) 32251
• 代理人: 王鑫

本發明利用健康組織塊法培養臍帶和胎盤的間充質干細胞，再以消化法培養脂肪干細胞；并將其培養過程所分泌的細胞因子，進行調配，經成纖維細胞增殖曲線測試，找出最佳生長濃度，并將調配好的培養上清低溫冷凍干燥，配制好適宜的溶媒，作為美容產品的原料，后期可添加至其他美容產品中制備干細胞美容產品。

技術領域

本發明屬于生物技術領域，涉及一種用于多重干細胞復合凍干粉及溶媒的制備方法。

背景技術

隨著人們物質生活水平的逐漸提高，吃飽穿暖對人們來說不再是難題，生活的富裕使得人們開始追求更高層面的生活。愛美之心人皆有之，所有人都希望自己能夠永遠年輕、漂亮，很多人都將目光轉向了各種能提升自己的外表形象的方法。皮膚作為人體最大的組織器官，覆蓋于人體的外表，是美學美容研究的主要組織器官。一時之間，各種化妝品、護膚品等如同雨后春筍一樣的應運而生了。然而，市面上的這些化妝品只是通過遮掩缺陷或是在皮膚表層起作用來達到美麗的目的，只是治標，而不能治本。人們漸漸也不滿足這樣的效果，將目光聚集到了搜尋能從根本上美容的方法。

研究表明，皮膚表皮細胞的自我更新、再生修復以及衰老退變是由來自毛囊或表皮基底層的成體干細胞——表皮干細胞的增殖分化所決定的。研究表明，干細胞能激活機體整體上處于休眠狀態下的各種干細胞群，以替代更新原有的因衰老或病理性等因素所造成組織細胞的衰退和老化，達到組織器官功能的恢復，增強組織器官的活性和原有的抗耐受力，改善因衰老等因素所造成的細胞與細胞間、細胞與細胞外基質間的信息傳遞，增強和加快各組織細胞的新老更替等作用。

傳統的干細胞美容需要將干細胞注射進皮膚真皮層，對操作者的要求較高，且此項操作對愛美人士容易產生心理負擔，有安全性的困擾。而現在研究發現，干細胞培養過程種所分泌的細胞因子，通過涂抹，此類細胞因子因為是小分子物質，極易被水通道運輸滲透至皮膚真皮層，可以達到刺激“喚醒”或營養表皮或真皮干細胞。這些細胞因子所喚醒的作用是：

1、在表皮水平上：影響角化細胞的活性和生長因素，刺激角化細胞遷移和上皮化，刺激表皮細胞分化和矯正，強烈促進表皮修復和愈合。

2、在真皮水平上：刺激成纖維細胞活性，增強細胞外基質收縮和構造，提供皮膚養分促進皮膚傷口愈合和功能再生。

3、在皮膚整體水平上：增強對環境侵襲、紫外線、污染物、刺激物、敏化劑、炎性細胞的抵抗力，鞏固、增強皮膚張肌，增強皮膚彈性，刺激疤痕組織褪色，減少瘢痕形成，延緩皮膚衰老。

其主要機制有：①促進表皮和真皮層細胞(特別是成纖維細胞、上皮細胞、內皮細胞)增殖、分裂、分化，新生細胞增多，使皮膚增厚，逐漸恢復皮膚正常結構和生理功能；②促進膠原纖維、網狀纖維、彈性纖維的形成，調節膠原蛋白和粘多糖的分泌，維持皮膚組織中水分含量和電解質代謝，改善萎縮皮膚的缺水狀態，滋潤皮膚組織；③通過對血管內皮細胞的作用，促進皮膚組織不斷形成新的毛細血管。

皮膚干細胞激活所需要的細胞因子較為多樣，且濃度不一，不同干細胞培養過程中所分泌的細胞因子濃度也有所差異，利用干細胞分泌的細胞因子進行天然的調和配比，達到皮膚干細胞所需最佳濃度，將為美容產品原料的制備提供基礎，是本發明著重要研究的內容。

發明內容

為解決現有技術存在的問題，本發明的目的在于提供一種用于多重干細胞復合凍干粉及溶媒的制備方法。

為實現上述目的及其他相關目的，本發明提供一種用于多重干細胞復合凍干粉及溶媒的制備方法，包括以下步驟：

⑴、臍帶、胎盤間充質干細胞的分離培養

在無菌條件下，收取健康的臍帶和胎盤；在GMP實驗室生物安全柜將胎盤剪碎至1.5-2.5mm³大小的組織塊，將所述組織塊分別置于T175培養瓶所盛的DMEM-LG細胞培養液中，置37℃，5％CO₂培養箱中培養；