[發(fā)明專利]一種富銅酵母產(chǎn)品及其生產(chǎn)方法

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201810097813.5
• 申請日: 2018-01-31
• 公開（公告）號: CN108048386A
• 公開（公告）日: 2018-05-18
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 馮杰;王國華;李海云;丁成
• 申請（專利權(quán)）人: 浙江大學(xué)
• 主分類號: C12N1/36
• 分類號: C12N1/36;C12N1/16;A23K10/18
• 代理公司: 杭州求是專利事務(wù)所有限公司 33200
• 代理人: 鄭海峰

1.一種富銅酵母產(chǎn)品的生產(chǎn)方法，其特征在于包括如下步驟：

1)制備耐高銅的酵母菌種

1.1)分別配置不同銅濃度的的麥芽糖培養(yǎng)基，將啤酒酵母菌種分別接種不同銅濃度的的麥芽糖培養(yǎng)基中培養(yǎng)；培養(yǎng)后選定菌種部分存活的含銅溶度最高的麥芽糖培養(yǎng)基；該麥芽糖培養(yǎng)基中存活菌種作為誘變菌種；

1.2)將誘變菌種接種到誘變培養(yǎng)基上進(jìn)行誘變培養(yǎng)25～30h；

1.3)將誘變后的菌株進(jìn)行分離篩選，接種到含銅的麥芽糖培養(yǎng)基中培養(yǎng)，篩選出抗銅能力強(qiáng)的菌種，即為耐高銅富銅酵母菌種；

2)高銅含量富銅酵母的生產(chǎn)工藝

2.1)斜面菌種培養(yǎng)：耐高銅富銅酵母菌種接種于糖含量5～20％，含銅量50～120μg/ml，pH值4.0～5.5的麥芽汁固體培養(yǎng)基上，培養(yǎng)溫度28～30℃，培養(yǎng)25～30h，得到斜面酵母菌種；

2.2)一級液體種子培養(yǎng)：將斜面酵母菌種稀釋至菌株數(shù)496萬/ml，取2ml稀釋液接種于裝有250ml糖含量5～20％，含銅量50～120μg/ml，pH值4.0～5.5的麥芽汁培養(yǎng)基的三角瓶中，培養(yǎng)溫度28～30℃，培養(yǎng)25～30h，得到一級液體種子培養(yǎng)液；

2.3)二級液體種子培養(yǎng)：將100ml一級液體種子培養(yǎng)液接種于裝有50～100L糖含量5～20％，含銅量50～120μg/ml，pH值4.0～5.5的麥芽汁培養(yǎng)基的發(fā)酵罐中，培養(yǎng)溫度28～30℃，培養(yǎng)25～30h，得到二級液體種子培養(yǎng)液；

2.4)發(fā)酵罐培養(yǎng)：將1000ml二級液體種子培養(yǎng)液接種于裝有1000～2000L糖含量5～20％，含銅量50～120μg/ml，pH值4.0～5.5的麥芽汁培養(yǎng)基的發(fā)酵罐中，培養(yǎng)溫度28～30℃，培養(yǎng)25～30h，得到富銅酵母培養(yǎng)液；

2.5)分離干燥：分離機(jī)分離，60～90℃烘干；

2.6)粉碎：粉碎機(jī)粉碎后既得到富銅酵母產(chǎn)品，銅含量為每千克酵母2000～5000毫克。

2.如權(quán)利要求1所述的生產(chǎn)方法，其特征在于所述的步驟1.1)和步驟1.3)中的含銅的麥芽糖培養(yǎng)基的總糖含量5～20％，含銅量50～120μg/ml，pH值4.0～5.5，培養(yǎng)溫度28～30℃，培養(yǎng)25～30h。

3.如權(quán)利要求1所述的生產(chǎn)方法，其特征在于所述的步驟1.3)中的含銅的麥芽糖培養(yǎng)基的含銅量高于步驟1.1)中的含銅的麥芽糖培養(yǎng)基。

4.如權(quán)利要求1所述的生產(chǎn)方法，其特征在于所述的步驟1.2)中的誘變培養(yǎng)基中的誘變劑為N-甲基-N-硝基-N-亞硝基胍，濃度1.8～3.2mg/mL，總糖含量5～20％，pH值4.0～5.5。

5.如權(quán)利要求1所述的生產(chǎn)方法，其特征在于所述含銅的麥芽糖培養(yǎng)基所含銅為無機(jī)銅，所述的無機(jī)銅包括氧化銅、硫酸鹽、碳酸鹽或氯化物鹽；所述麥芽糖培養(yǎng)基和誘變培養(yǎng)基的氮源為尿素、硝酸銨、硫酸銨和磷酸氫氨中的一種或幾種；所述麥芽糖培養(yǎng)基和誘變培養(yǎng)基的磷源為植酸鈣、磷酸氫氨、磷酸氫二氨、磷酸氫二鉀中的一種或幾種。

6.一種如權(quán)利要求1所述方法制備得到的富銅酵母產(chǎn)品。

7.權(quán)利要求6所述富銅酵母產(chǎn)品在制備動物飼料中的應(yīng)用。