[發明專利]人工毛囊及其制備方法和應用

有效

• 申請號: 201810094681.0
• 申請日: 2018-01-31
• 公開（公告）號: CN110093306B
• 公開（公告）日: 2022-12-02
• 發明（設計）人: 王旭升;吳耀炯;牟麗莎;曹楠
• 申請（專利權）人: 中山大學
• 主分類號: C12N5/071
• 分類號: C12N5/071;A61F2/10
• 代理公司: 北京清亦華知識產權代理事務所(普通合伙) 11201
• 代理人: 趙天月

本發明提出了一種獲得人工毛囊的方法。該方法包括：將人多能干細胞移植入異種胚胎的皮膚中，所述異種胚胎處于毛發形成階段；將移植有人多能干細胞的胚胎在異種母體內繼續進行培養，直至胚胎娩出；以及分離胚胎中移植有人多能干細胞的皮膚中的毛囊，以便獲得所述人工毛囊。根據本發明實施例的方法獲得的人工毛囊數量多，結構形態與正常皮膚中的毛囊類似，可用于人不同部位的毛囊移植，如頭皮、眉毛、胡須、體毛等；同時獲得的人工毛囊移植回到多能干細胞提供者不會出現免疫排斥反應，安全性大大提高。

技術領域

本發明涉及生物技術領域，具體地，本發明涉及人工毛囊及其制備方法和應用。

背景技術

脫發導致的頭發稀少，已經成為困擾現代男性(包括部分女性)越來越嚴重的亞健康問題，脫發雖然不會嚴重的生理健康為題，但是脫發會嚴重的影響個人的心理狀態，所以會嚴重的降低個人的生活質量。據不完全統計，我國目前有超過2億人存在不同程度的脫發問題，在全球該類人群體已經超過10億。病理性異常頭發脫落，如男性的禿頂，是在某些因素的作用下毛囊長期處于休止期而無法進入生長周期，現在臨床上針對病理性脫發的藥物甚少，而且這些藥物也是只針對很少比例的患者有作用，比如米諾地爾和非那雄胺，都是臨床最廣泛應用的兩種防脫發藥物，是兩種藥物不僅要長期服用，有不同程度的副作用，同時防脫效果也比較微弱。

干細胞(stem cells)是人體及其各種組織細胞的初始來源，其最顯著的生物學特征是既有自我更新和不斷增殖的能力，又有多向分化的潛能。干細胞根據不同的來源分為成體干細胞(somaticstem cells)和胚胎干細胞(embryonic stem cells，ES細胞)。成體干細胞包括骨髓間充質干細胞、胰腺干細胞、神經干細胞等，在成體組織中存在的。2006年，日本京都大學中山伸彌(Yamanaka)研究小組采用體外基因轉染技術，從24個因子中篩選出Oct4、Sox2、c-Myc、Klf4等4個轉錄因子，通過逆轉錄病毒將上述4個轉錄因子導入胚胎小鼠成纖維細胞或成年小鼠尾部皮膚成纖維細胞，在小鼠ES(胚胎干細胞)細胞的培養條件下獲得了Fbx15+的多潛能干細胞系，這類iPS細胞在細胞形態、增殖能力、表面抗原標志、基因表達譜、多潛能干細胞特異性基因的表觀遺傳學狀態、端粒酶活性等方面與hES細胞相似，并且在體外培養時和在小鼠體內畸胎瘤形成中均可分化為3個胚層的不同細胞類型(Takahashi K et al.Cell 2007；131：861-872)。這一被學界稱為生物科學“里程碑”的重大突破有望幫助科學家繞過克隆技術的倫理、道德紛爭，為醫學應用打開大門。

自20世紀90年代中期以來，橢圓形頭皮切割采集是獲得毛發移植毛囊集落的首選方法。在過去20年中，毛囊單位提取(FUE)已成為越來越受歡迎的獲得供者頭發的方法(Rassman,Bernstein et al.2002,Facial Plast Surg Clin North Am,Harris 2013,Dermatol Surg.)。FUE使用手動或機器人裝置來從供體區域獲取獨立毛囊單位(Cole2013,Facial Plast Surg Clin North Am.)，FUE相對于橢圓供體收獲的主要優點是無供體頭發收獲然后縫合或縫合封閉的線性瘢痕。這是一個很大的優勢，特別是對于頭發短的執法者，也不會看到很明顯的傷痕。雖然FUE具有無線性瘢痕的優點，仍然存在其他方面的問題和潛在的長期副作用。與全層皮膚切口一樣，收獲每個毛囊單位會產生一個1mm直徑的沖頭的瘢痕。這些瘢痕會對剩余毛囊的著色及發育有影響。此外，無論FUE是通過手動，機動或機器人打孔進行的，與供體橢圓頭皮切割收獲毛囊一樣，存在來自供體區域的頭發明顯消耗的風險，即供體區域的毛發會明細減少。這可能會產生醫源性“蛾食”或“偽梅毒”外觀(N et al.J Plast Reconstr Aesthet Surg.2012,Poswal A et al.Indian JDermatol.2011)。FUE是獲得供者頭發的有效和有用的方式。它產生比橢圓形頭皮切割供體毛囊獲取會產生少的可見瘢痕。與任何手術技術一樣，該方法存在局限性和副作用。