[發明專利]人工毛囊及其制備方法和應用

有效

• 申請號: 201810094681.0
• 申請日: 2018-01-31
• 公開（公告）號: CN110093306B
• 公開（公告）日: 2022-12-02
• 發明（設計）人: 王旭升;吳耀炯;牟麗莎;曹楠
• 申請（專利權）人: 中山大學
• 主分類號: C12N5/071
• 分類號: C12N5/071;A61F2/10
• 代理公司: 北京清亦華知識產權代理事務所(普通合伙) 11201
• 代理人: 趙天月

1.一種獲得人工毛囊的方法，其特征在于，包括：

將人多能干細胞移植入異種胚胎的皮膚中，所述異種胚胎處于毛發形成階段，所述異種胚胎為豬胚胎；

將移植有人多能干細胞的胚胎在異種母體內繼續進行培養，直至胚胎娩出；以及

分離胚胎中移植有人多能干細胞的皮膚中的毛囊，以便獲得所述人工毛囊；

所述人多能干細胞為誘導多能干細胞，所述移植之前進一步包括：將所述誘導多能干細胞分化為皮膚類器官，所述皮膚類器官包括外胚層細胞，中胚層細胞和神經內胚層細胞；

所述移植之前進一步包括：將所述人多能干細胞與促進毛囊形成的因子混合，所述促進毛囊形成的因子為Wnt10b因子，所述Wnt10b因子的濃度為1ug/mL。

2.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述誘導多能干細胞來源于血液細胞或皮膚細胞。

3.根據權利要求2所述的方法，其特征在于，將所述誘導多能干細胞分化為皮膚類器官包括：

將所述誘導多能干細胞進行懸浮培養，以便得到3D細胞球；

將所述3D細胞球進一步進行分化培養，以便獲得皮膚類器官。

4.根據權利要求2所述的方法，其特征在于，將所述誘導多能干細胞分化為皮膚類器官是在所述多能干細胞與BMP-4，SB431542，FGF-2和LND接觸的條件下進行的。

5.根據權利要求4所述的方法，其特征在于，所述BMP-4的濃度為50ng/mL。

6.根據權利要求4所述的方法，其特征在于，進一步包括將所述皮膚類器官進行消化處理，以便獲得單細胞混合液。

7.根據權利要求6所述的方法，其特征在于，將所述單細胞混合液與基質膠或凝膠類物質混合。

8.根據權利要求7所述的方法，其特征在于，所述基質膠包括選自Geltrex和ColI的至少之一。

9.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述人多能干細胞包括選自毛囊干細胞、皮膚干細胞及其它具有毛囊形成或誘導能力的干細胞。

10.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述人多能干細胞包括基因修飾的多能干細胞或誘導多能干細胞。

11.根據權利要求10所述的方法，其特征在于，所述基因修飾為基因敲除或基因表達。

12.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述分離是在胚胎分娩后的第0~6個月內進行的。