[發(fā)明專利]一種ADSCs用于改善子代大鼠高血壓的評價方法及應(yīng)用

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• 申請?zhí)枺?/td>: 201810094186.X
• 申請日: 2018-01-31
• 公開（公告）號: CN108853519A
• 公開（公告）日: 2018-11-23
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 孫同文;丁顯飛;梁火燕;李礪鋒;焦婷婷;趙瑞巧
• 申請（專利權(quán)）人: 鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院
• 主分類號: A61K49/00
• 分類號: A61K49/00;A61K35/28;A61P9/12
• 代理公司: 常州佰業(yè)騰飛專利代理事務(wù)所(普通合伙) 32231
• 代理人: 劉松

本發(fā)明涉及生物醫(yī)學(xué)技術(shù)領(lǐng)域，尤其是ADSCs用于改善子代大鼠高血壓的評價方法及應(yīng)用，包括以下步驟：1)細胞培養(yǎng)：將ADSCs放置于完全培養(yǎng)基進行培養(yǎng)；2)細胞標記：將1mg/ml SPIO用完全培養(yǎng)基配稀釋為50μg/mL；同時將多聚賴氨酸稀釋為1.5ug/ml，然后將上述兩種溶液以1:1混合，多聚賴氨酸稀釋最終濃度為0.75μg/mL，充分混勻后放置于細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；3)孕期造模：構(gòu)建LPS組、LPS+ADSCs組和對照組；LPS組：SD孕鼠在孕第8、10和12天腹腔注射LPS；LPS+ADSCs組：SD孕鼠在孕第8、10和12天腹腔注射LPS，同時在孕第8天給予尾靜脈注射步驟2制得的ADSCs；對照組：SD孕鼠在孕第8、10和12天腹腔注射等體積生理鹽水；4)MRI下觀察SPIO?ADSCs的遷移；5)觀察子代大鼠的血壓變化。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及生物醫(yī)學(xué)技術(shù)領(lǐng)域，具體領(lǐng)域為ADSCs用于改善子代大鼠高血壓的評價方法及應(yīng)用。

背景技術(shù)

原發(fā)性高血壓是心血管疾病的主要危險因素，對人類健康構(gòu)成嚴重威脅。高血壓一旦發(fā)明，患者往往需要終身服藥，既降低患者生活質(zhì)量，更帶來嚴重的社會經(jīng)濟負擔。雖然國內(nèi)外己對其病因與防治展開了廣泛研究，但其發(fā)病率仍日益升高，且針對成年病人的預(yù)防效果不理想，強烈提示目前僅針對發(fā)病成年個體的防治思路函待拓寬，同時也表明其他重要致病因素的存在。因此，從新的方向探索高血壓的發(fā)病機制，顯得日益重要。研究表明，孕期影響胎兒的環(huán)境因素不僅可以影響胎兒的發(fā)育，也可致其成年子代罹患多種疾病，如高血壓、糖尿病和肥胖等。

脂多糖是(LPS)是革蘭氏陰性菌細胞壁的一種有毒成分，常用來作為炎癥刺激劑模仿非特異性炎癥反應(yīng)。據(jù)目前的研究發(fā)現(xiàn)，胎兒暴露于LPS可導(dǎo)致許多成人慢性疾病的發(fā)生，如高血壓。

超順磁性氧化鐵顆粒(Superparamagnetic Iron Oxide，SPIO)是一種以氧化鐵為基礎(chǔ)的細胞內(nèi)對比劑，基本結(jié)構(gòu)為葡萄糖包裹的氧化鐵顆粒，直徑約80-150nm，其中氧化鐵顆粒直徑約10-50nm，穿透力及弛豫率強為等濃度Gd³⁺的10倍左右。SPIO具有高度的順磁性，能影響局部磁場的均勻性并產(chǎn)生磁化效應(yīng)及質(zhì)子去相位，顯著縮短T2馳豫時間，是一種新型的負性MRI對比劑。SPIO的鐵可進入機體的鐵的代謝過程，實現(xiàn)生物降解，具有無器官毒性的優(yōu)勢。

脂肪間充質(zhì)干細胞(Adipose tissue-derived mesenchymal stem cells,ADSCs)是一種多能間充質(zhì)干細胞，可輕易地從脂肪組織中分離出來，然后分化為內(nèi)皮細胞、脂肪細胞和肌細胞。它們也可能有助于嚴重和長期受損組織的修復(fù)和再生。更重要的是，可以自體移植ADSCs；因此，它們的使用不受道德和倫理規(guī)范的限制。與使用其他類型的干細胞相比，免疫排斥反應(yīng)發(fā)生的風(fēng)險大大降低。迄今為止，已有多項ADSCS在心血管疾病中應(yīng)用的臨床試驗。然而，目前有關(guān)間充質(zhì)干細胞參與原發(fā)性高血壓病理生理學(xué)的數(shù)據(jù)有限。

此外，MRI下使用SPIO標記用于觀察是否ADSCS進入胚胎，尚無相關(guān)報道。

發(fā)明內(nèi)容

發(fā)明專利CN106577509A“孕期脂多糖導(dǎo)致子代大鼠高血壓模型的建立方法”的全文內(nèi)容引述于此。

本發(fā)明的目的在于提供一種ADSCs用于改善子代大鼠高血壓的評價方法及應(yīng)用，以解決現(xiàn)有技術(shù)中針對間充質(zhì)干細胞用于治療原發(fā)性高血壓缺乏相關(guān)研究的問題。

為實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明提供如下技術(shù)方案：

一種ADSCs用于改善子代大鼠高血壓的評價方法，包括以下步驟：

(1)細胞培養(yǎng)：將ADSCs培養(yǎng)于完全培養(yǎng)基；