[發明專利]一種基于CuInZnS/ZnS量子點的增強型電化學發光劑的制備及其應用

有效

• 申請號: 201810088123.3
• 申請日: 2018-01-30
• 公開（公告）號: CN108276987B
• 公開（公告）日: 2020-04-28
• 發明（設計）人: 馬強;劉旸;陳雪倩
• 申請（專利權）人: 吉林大學
• 主分類號: C09K11/02
• 分類號: C09K11/02;C09K11/62;G01N21/76;G01N27/26;C12Q1/68
• 代理公司: 長春吉大專利代理有限責任公司 22201
• 代理人: 朱世林;胡景陽

1.一種基于CuInZnS/ZnS量子點的增強型電化學發光劑的制備方法，其特征在于：包含如下步驟：

步驟一：CuInZnS/ZnS量子點的制備

1)將氯化銅、氯化銦、氯化鋅和蒸餾水按(1～3):(1～14):(1～14):(100～300)的摩爾比例混合；向體系內加入巰基丙酸，氯化銅和巰基丙酸摩爾比為1：1～1：5，溶液變渾濁，產生黃色顆粒；

2)再向溶液中加入氫氧化鈉調節pH為7～12，沉淀消失，溶液變為澄清；

3)繼續攪拌5～60分鐘后，向上述體系中加入硫脲，硫脲和氯化銅的摩爾比為3：1～15：1，待其溶解后，溶液變為淡粉色；

4)將全部溶液轉移到聚四氟乙烯的反應釜中，反應釜放置于烘箱中2～36個小時，溫度在60～250℃，繼續向體系中加入氯化鋅、檸檬酸鈉、巰基丙酸和硫化鈉，氯化鋅、檸檬酸鈉、巰基丙酸、硫化鈉和上述加入的氯化銅的摩爾比為(1～50):(2～50)：(5～100)：(1～20)：1，在50～150℃條件下加熱1～24小時，取出后冷卻至室溫，將產物離心分離后，用無水乙醇反復清洗3～5次，得到CuInZnS/ZnS量子點；

步驟二：基于CuInZnS/ZnS量子點的增強型電化學發光劑的制備方法，其步驟如下：

1)氯金酸和蒸餾水的質量比為1：20000～1：100000混合，回流加熱至沸騰，加入檸檬酸鈉，檸檬酸鈉和氯金酸質量比為1：1～1：5，溶液顏色由淺黃色變為深紅色，離心后得到金納米粒子；

2)將金納米粒子、多巴胺和蒸餾水混合，納米粒子、多巴胺和蒸餾水質量比為1：1：50000～1：5：100000，溶液pH調控范圍為6-10，在4℃-80℃間下攪拌0.5～24小時，溶液變為棕色，采取透析分離方式，透析2-24小時，用水和無水乙醇反復清洗3-5次，制備得到包裹金納米粒子的聚多巴胺微球；

3)將CuInZnS/ZnS量子點、包裹金納米粒子的聚多巴胺微球和蒸餾水按質量比1:5:100000～5:10：1000000混合，在25～60℃條件下震蕩20～1200分鐘，將產物離心分離后，用無水乙醇反復清洗3～5次，得到基于CuInZnS/ZnS量子點的增強型電化學發光劑。

2.如權利要求1所述的一種基于CuInZnS/ZnS量子點的增強型電化學發光劑在制備基因檢測方面的電化學發光傳感器的應用，其特征在于，包含如下步驟：

1)將玻碳電極浸泡于0.001～0.01g/L的聚二烯丙基二甲基氯化銨溶液中5～60分鐘；

2)氮氣吹干后浸泡于0.001～0.01g/L的聚丙乙烯磺酸鈉溶液中5～60分鐘；

3)氮氣吹干后，在電極表面滴涂可以和目標基因發生特異性結合的捕獲DNA，滴涂量為電極有效面積每平方毫米1～5nmol捕獲DNA，再將電極與已知不同濃度的目標基因，在室溫至100℃條件下反應5～60分鐘，電極有效面積每平方毫米加入0～3nmol；

4)再將上述電極與氨基修飾的和目標基因同序列的探針DNA及增強型電化學發光劑在室溫至100℃條件下反應5-60分鐘，氨基修飾的探針DNA和增強型電化學發光劑的比例為電極有效面積每平方毫米加入1～3nmol探針DNA和10～50μg增強型電化學發光劑，按電極有效面積每平方毫米加入0.02～1mmol過硫酸鉀作為共反應物，在-2.5～2.5V的電壓條件下，讀取電致化學發光強度，以電致化學發光強度為縱坐標，以目標DNA濃度為橫坐標，繪制分析工作曲線，將電極置于未知濃度的目標DNA中，讀取電致化學發光強度，從而計算其濃度。