[發明專利]一種利用食用菌廢菌棒生產地衣芽孢桿菌菌肥的方法

在審

• 申請號: 201810087838.7
• 申請日: 2018-01-30
• 公開（公告）號: CN108179126A
• 公開（公告）日: 2018-06-19
• 發明（設計）人: 黃自宇
• 申請（專利權）人: 廣西馳勝農業科技有限公司
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C05F15/00;C05F11/08;C12R1/10
• 代理公司: 北京天奇智新知識產權代理有限公司 11340
• 代理人: 韋莎

本發明提供一種利用食用菌廢菌棒生產地衣芽孢桿菌菌肥的方法，步驟如下：以地衣芽孢桿菌(Bacillus licheniformis)為菌種，以LB液體培養基為液體菌種用培養基，制備生產用液體菌種；以食用菌廢菌棒與麩皮或蔗渣或糖蜜混合后作為制備菌肥生產的固體基礎培養基，分裝于發酵罐中，滅菌后，接種液體菌種，30～35℃恒溫下發酵30～72h，制備地衣芽孢桿菌固體發酵產物，發酵結束后將其拌勻，即得地衣芽孢桿菌菌肥。本發明采用固態發酵方式，利用食用菌廢菌棒含有豐富的菌體蛋白、多種代謝產物，作為固態發酵培養基成份之一，即可為菌株發酵提供所需養分，降低生產成本，又可降低農副產品廢棄物對環境的污染,提高地衣芽孢桿菌活菌數含量，提高肥效。

【技術領域】

本發明涉及生物肥料制作領域，特別涉及一種利用廢菌棒生產地衣芽孢桿菌菌肥的方法。

【背景技術】

地衣芽孢桿菌(B.licheniformis)是一類需氧或兼性厭氧G+細菌，在一定條件下能產生抗逆性內生孢子，產生脂肽類、肽類、磷脂類、多烯類、氨基酸類、核酸類物質等多種抗生素。這些抗生素對多種動、植物及人類病原菌起到很好的抑制作用。地衣芽孢桿菌還產生蛋白酶、脂肪酶和淀粉酶等。進入2l世紀以來，關于地衣芽孢桿菌在飼料工業上的應用研究很多，在醫藥、畜牧、水產業等中都有廣泛的應用，地衣芽孢桿菌包含在農業部允許的添加劑菌種目錄中，已廣泛應用于醫藥、農藥、食品、飼料加工、環境污染治理等各個行業，是芽孢桿菌中較具應用潛力的菌種之一。目前，地衣芽孢桿菌固態肥料混合品很多，原材料為麩皮、米糠、黃豆粉餅、花生粉餅等農業副產物，存在價格高、高溫滅菌后粘度增加、疏松度不夠、空隙小、后續接種困難等問題，且質量參差不齊，有些所含雜菌數不符合要求，但雜菌率高，影響了地衣芽孢桿菌菌肥的肥效性。食用菌，是一個“短平快”產業，其營養豐富，口味鮮美，已逐漸成為人們餐桌上的新寵。在我國政府一系列方針政策的指引下，迎來了前所未有的良好機遇，其產量占世界總產量的70％以上，其總產值在中國種植業中的排名僅次于糧、棉、油、菜、果，居第六位，是我國農民發家致富的新途徑。據統計，2014年，全國食用菌種植產量達3169萬噸，隨著食用菌大規模的種植興起，其栽培廢棄物伴隨而生，越來越多。據統計，我國每年食用菌栽培產生的栽培廢棄物高達3000萬噸以上未能得到有效的循環利用，被隨意堆放在房前屋后、路旁、地頭、河渠溝谷中，對水源、空氣、土壤與環境造成了嚴重污染，給食用菌產業的發展、人民生活環境和生活質量帶來一系列的負面影響，食用菌廢棄物中含有豐富的菌體蛋白、多種代謝產物及未被充分利用的營養物質等大量資源，可考慮作為地衣芽胞桿菌固態發酵原料進行生產。

【發明內容】

鑒于上述內容，有必要提供一種利用食用菌廢菌棒生產地衣芽孢桿菌菌肥的方法，利用廢菌棒食用菌廢棄物中含有豐富的菌體蛋白、多種代謝產物，作為固態發酵培養基成分之一，為地衣芽孢桿菌菌株提供養分，降低生產成本，又可降低食用菌廢菌棒對環境的污染，同時提高地衣芽孢桿菌活菌數含量，提高肥效。

為達到上述目的，本發明所采用的技術方案是：

步驟(1)液體菌種的制備：以地衣芽孢桿菌(Bacillus licheniformis)為菌種，以NA培養基為液體菌種用培養基，制備液體菌種A；

步驟(2)液體菌種的擴大培養：將步驟(1)得到的液體菌種放進搖瓶中培養，轉速為180r/min，溫度為30±1℃，培養時間為18～24h，得到液體菌種B。

步驟(3)地衣芽孢桿菌(Bacillus licheniformis)固體菌肥的制備：以廢菌棒與麩皮或蔗渣或糖蜜混合后作為制備菌肥生產的固體基礎培養基，分裝發酵罐中，滅菌后，接種步驟(2)所制備的液體菌種B，30～35℃恒溫下發酵30～72h，制備地衣芽孢桿菌固體發酵產物，發酵結束后將其拌勻，即得地衣芽孢桿菌菌肥；

所述步驟(1)液體菌種的制備為：用接種環將地衣芽孢桿菌菌株的單菌落接種于NA液體培養基中，于恒溫培養箱中培養24h，培養溫度設定為30±1℃，得到液體菌種A；