[發明專利]一種利用食用菌廢菌棒生產地衣芽孢桿菌菌肥的方法

在審

• 申請號: 201810087838.7
• 申請日: 2018-01-30
• 公開（公告）號: CN108179126A
• 公開（公告）日: 2018-06-19
• 發明（設計）人: 黃自宇
• 申請（專利權）人: 廣西馳勝農業科技有限公司
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C05F15/00;C05F11/08;C12R1/10
• 代理公司: 北京天奇智新知識產權代理有限公司 11340
• 代理人: 韋莎

1.利用食用菌廢菌棒生產地衣芽孢桿菌菌肥的方法，其特征在于，包括如下步驟：

步驟(1)液體菌種的制備：以地衣芽孢桿菌為菌種，以NA培養基為液體菌種用培養基，制備液體菌種A；

步驟(2)液體菌種的擴大培養：將步驟(1)得到的液體菌種A放進搖瓶中培養，轉速為180r/min，溫度為30±1℃，培養時間為18～24h，得到液體菌種B。

步驟(3)地衣芽孢桿菌固體菌肥的制備：以廢菌棒與麩皮或蔗渣或糖蜜混合后作為制備菌肥生產的固體基礎培養基，分裝發酵罐中，滅菌后，接種步驟(2)所制備的液體菌種B，30～35℃恒溫下發酵30～72h，發酵結束后將其拌勻，即得地衣芽孢桿菌菌肥；

2.根據權利要求1所述的利用食用菌廢菌棒生產地衣芽孢桿菌菌肥的方法，其特征在于：

所述步驟(1)液體菌種的制備為：用接種環將地衣芽孢桿菌菌株的單菌落接種于NA液體培養基中，于恒溫培養箱中培養24h，培養溫度設定為30±1℃，得到液體菌種A；

所述步驟(2)液體菌種的擴大培養為：將液體菌種A接種于LB液體培養基中，溫度設定為30℃，恒溫培養24h，然后置于恒溫搖瓶振蕩培養，轉速180r/min，溫度設定為30±1℃，培養18～24h，即得液體菌種B。

3.根據權利要求2所述的食用菌廢菌棒生產地衣芽孢桿菌菌肥的方法，其特征在于：所述NA培養基由以下重量百分比的組分組成：牛肉浸膏0.3％，蛋白胨0.5％，酵母膏0.5％，氯化鈉0.2％，瓊脂1.8％，余量為水，所述NA培養基pH為7.0；所述LB液體培養基由以下重量百分比的組分組成：牛肉浸膏0.3％，蛋白胨0.5％，酵母膏0.5％，氯化鈉0.2％，余量為水，所述LB液體培養基pH為7.0。

4.根據權利要求1所述的利食用菌廢菌棒生產地衣芽孢桿菌菌肥的方法，其特征在于：所述步驟(3)中地衣芽孢桿菌固體菌肥的制備步驟為：

步驟A.以廢菌棒為主要成份的固體基礎培養基配制：所述廢菌棒與麩皮重量比為2:3～4:1配制，所述廢菌棒與蔗渣或糖蜜按重量比為1:4～4:1配制形成固體基礎培養基；

步驟B.基礎培養基中其他成分的添加：在固體基礎培養基中按質量比添加K₂HPO40.2％、K₃PO₄0.4％，無水硫酸鎂0.2％，酵母粉0.2％，攪拌均勻后加水，調整含水體積比為30％～50％，轉入發酵罐中，發酵罐中裝料量控制在10％-30％體積比范圍內滅菌；

步驟C.地衣芽孢桿菌固體菌肥的培養與制備：往步驟A的培養基中接種步驟(2)中制備的液體菌種B，按接種量3％(v/g)體積接種，30～32℃恒溫下發酵15-47小時，即地衣芽孢桿菌固體發酵產物，發酵結束后將其通風干燥后拌勻，即得地衣芽孢桿菌菌肥。

5.根據權利要求4所述的食用菌廢菌棒生產地衣芽孢桿菌菌肥的方法，其特征在于：

所述步驟A中，所述微生物廢菌棒與蔗渣或糖蜜按重量比為4:1配制形成固體基礎培養基；

所述步驟B中，調整含水體積比為40％，轉入發酵罐中，發酵罐中裝料量控制在30％體積比范圍；

所述步驟C中，接種完成后，在30℃恒溫下發酵32小時，即地衣芽孢桿菌固體發酵產物，發酵結束后將其通風干燥后拌勻，即得地衣芽孢桿菌菌肥。