[發明專利]一種利用獼猴桃葉片進行組織培養的方法

在審

• 申請號: 201810083010.4
• 申請日: 2018-01-29
• 公開（公告）號: CN107996410A
• 公開（公告）日: 2018-05-08
• 發明（設計）人: 蔡小軍;蔡軍利
• 申請（專利權）人: 寶雞松良農業科技有限公司
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 北京天奇智新知識產權代理有限公司 11340
• 代理人: 陳永寧

1.一種利用獼猴桃葉片進行組織培養的方法，其特征在于，誘導生根的方法為：

把增殖后達到3cm以上，具有3片以上子葉的植株插入專用生根設備(如實施例3)里面的基質上，該基質為MS+蛭石，光照時間16h，1500-2000LX，溫度25±2℃，二氧化碳濃度950ppm，濕度80％，培養室潔凈度1000級以上；培養20天以后形成根系發達的獼猴桃完整植株。

2.根據權利要求1所述的利用獼猴桃葉片進行組織培養的方法，其特征在于，MS+蛭石為每升MS溶液加800g蛭石。

3.根據權利要求1或2所述的利用獼猴桃葉片進行組織培養的方法，其特征在于，具體步驟為：

1)選取健壯獼猴桃植株上翠綠、厚實，離莖尖比較近的葉片做外植體材料，清水洗干凈；

用0.1％升汞溶液滅菌10min，再用75％的酒精滅菌5min，無菌水清洗3—5遍；

把處理后的葉片剪成邊長1.5cm大小的方塊，放入誘導培養基上，

光照800LX，每天10h，溫度25±2℃，濕度70％，培養50天左右形成獼猴桃愈傷組織。

誘導培養基為：MS培養基+蔗糖20g/L+瓊脂6g/L+6-BA0.8mg/L+NAA(萘乙酸)0.2mg/L+2,4-D(2,4-二氯苯氧乙酸)0.5mg/L的培養基；

2)誘導叢生芽

把愈傷組織分割成直徑1cm左右的小塊，清除掉已經死亡的葉片組織，半嵌到MS+蔗糖30g/L+瓊脂6g/L+6-BA5mg/L+NAA0.5mg/L+IAA0.2mg/L的培養基中，光照2000-2500LX，時間14h，溫度25±2℃，濕度70％，培養50天后愈傷組織表面形成不定芽，獲得初代；

3)繼代培養(增殖培養)把愈傷組織上形成的不定芽插入MS+蔗糖30g/L+瓊脂6g/L+6-BA1.2mg/L+IAA0.8mg/L的培養基上，光照2000-3000LX，14h，溫度25±2℃，濕度70％，培養25天，增值率3-5倍，

4)誘導生根把增殖后達到3cm以上，具有3片以上子葉的植株插入專用生根設備里面的基質上，該基質為MS+蛭石，光照時間16h，1500-2000LX，溫度25±2℃，二氧化碳濃度950ppm，濕度80％，培養室潔凈度1000級以上。培養20天以后形成根系發達的獼猴桃完整植株；

5)把獼猴桃完整植株移栽到降解袋里面，移植到溫棚，溫度15-30℃，濕度85％，一周后即可移到大田。