[發(fā)明專利]促進(jìn)造血干/祖細(xì)胞分化為紅系細(xì)胞的誘導(dǎo)培養(yǎng)基及應(yīng)用有效
| 申請(qǐng)?zhí)枺?/td> | 201810081321.7 | 申請(qǐng)日: | 2018-01-29 |
| 公開(公告)號(hào): | CN110093313B | 公開(公告)日: | 2023-04-14 |
| 發(fā)明(設(shè)計(jì))人: | 裴雪濤;李艷華;陳琳;聶紀(jì)芹;習(xí)佳飛;岳文;姚海雷;張博文 | 申請(qǐng)(專利權(quán))人: | 華南生物醫(yī)藥研究院;中國(guó)人民解放軍軍事科學(xué)院軍事醫(yī)學(xué)研究院 |
| 主分類號(hào): | C12N5/078 | 分類號(hào): | C12N5/078 |
| 代理公司: | 北京清亦華知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 11201 | 代理人: | 趙天月 |
| 地址: | 510200 廣東*** | 國(guó)省代碼: | 廣東;44 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關(guān)鍵詞: | 促進(jìn) 造血 細(xì)胞 化為 誘導(dǎo) 培養(yǎng)基 應(yīng)用 | ||
1.一種促進(jìn)造血干/祖細(xì)胞分化為紅系細(xì)胞的誘導(dǎo)培養(yǎng)基,其特征在于,所述培養(yǎng)基為天冬氨酸和絲氨酸和SCGM基礎(chǔ)培養(yǎng)基;
所述誘導(dǎo)培養(yǎng)基中所述天冬氨酸的濃度為50~200nmol/mL;
所述絲氨酸的濃度為200~400?nmol/mL。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的誘導(dǎo)培養(yǎng)基,其特征在于,所述誘導(dǎo)培養(yǎng)基進(jìn)一步包括:
干細(xì)胞因子SCF,所述干細(xì)胞因子的濃度為30~250ng/mL;
胰島素樣生長(zhǎng)因子IGF-1,所述胰島素樣生長(zhǎng)因子的濃度為10~100ng/mL;
紅細(xì)胞生成素EPO,所述紅細(xì)胞生成素的濃度為1~20U/mL;
轉(zhuǎn)鐵蛋白,所述轉(zhuǎn)鐵蛋白的濃度為50~400μg/mL;
地塞米松,所述地塞米松的濃度為0.1~5μM;
谷氨酰胺,所述谷氨酰胺的濃度為1~10mM;
和類脂,所述類脂的濃度為10~100μg/mL。
3.天冬氨酸和絲氨酸在促進(jìn)造血干/祖細(xì)胞分化為紅系細(xì)胞中的應(yīng)用。
4.一種促進(jìn)造血干/祖細(xì)胞分化為紅系細(xì)胞的方法,其特征在于,包括:
將造血干/祖細(xì)胞擴(kuò)增培養(yǎng);
將擴(kuò)增后的造血干/祖細(xì)胞在權(quán)利要求1所述的誘導(dǎo)培養(yǎng)基中培養(yǎng)。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的方法,其特征在于,所述造血干/祖細(xì)胞來(lái)自于外周血、臍帶血和/或骨髓。
6.根據(jù)權(quán)利要求4所述的方法,其特征在于,將擴(kuò)增后的造血干/祖細(xì)胞在誘導(dǎo)培養(yǎng)基中培養(yǎng)7~25天。
7.根據(jù)權(quán)利要求4所述的方法,其特征在于,將所述造血干/祖細(xì)胞在不含有天冬氨酸和絲氨酸的擴(kuò)增培養(yǎng)基中培養(yǎng)5~10天后,更換誘導(dǎo)培養(yǎng)基,然后在誘導(dǎo)培養(yǎng)基中培養(yǎng)7~25天。
8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的方法,其特征在于,所述擴(kuò)增培養(yǎng)基還包括如下組分:
干細(xì)胞因子SCF,所述干細(xì)胞因子的濃度為30~100ng/mL;
血小板生成素TPO,所述血小板生成素的濃度為5~50ng/mL;
白介素-3IL-3,所述白介素-3的濃度為10~50?ng/mL;
白介素-6IL-6,所述白介素-6的濃度為1~50ng/mL;
和Flt3配體,所述Flt3配體的濃度為10~100?ng/mL。
9.一種促進(jìn)造血干/祖細(xì)胞分化成紅系細(xì)胞的試劑盒,其特征在于,
所述試劑盒的組成為第一培養(yǎng)基、第二培養(yǎng)基、天冬氨酸和絲氨酸,所述第一培養(yǎng)基為Stemspan基礎(chǔ)培養(yǎng)基;所述第二培養(yǎng)基為SCGM基礎(chǔ)培養(yǎng)基;所述天冬氨酸的濃度為50~200nmol/mL,所述絲氨酸的濃度為200~400nmol/mL。
10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的試劑盒,其特征在于,所述第一培養(yǎng)基還包括如下組分:
干細(xì)胞因子SCF,所述干細(xì)胞因子的濃度為30~100ng/mL,
血小板生成素TPO,所述血小板生成素的濃度為5~50ng/mL,
白介素-3IL-3,所述白介素-3的濃度為10~50?ng/mL,
白介素-6IL-6,所述白介素-6的濃度為1~50ng/mL,
和Flt3配體,所述Flt3配體的濃度為10~100?ng/mL,
所述第二培養(yǎng)基還包括如下組分:
干細(xì)胞因子SCF,所述干細(xì)胞因子的濃度為30~250ng/mL,
胰島素樣生長(zhǎng)因子IGF-1,所述胰島素樣生長(zhǎng)因子的濃度為10~100ng/mL,
紅細(xì)胞生成素EPO,所述紅細(xì)胞生成素的濃度為1~20U/mL,
轉(zhuǎn)鐵蛋白,所述轉(zhuǎn)鐵蛋白的濃度為50~400μg/mL,
地塞米松,所述地塞米松的濃度為0.1~5μM,
谷氨酰胺,所述谷氨酰胺的濃度為1~10mM,
類脂,所述類脂的濃度為10~100μg/mL,
天冬氨酸和絲氨酸,所述天冬氨酸的濃度為50~200nmol/mL,所述絲氨酸的濃度為200~400nmol/mL。
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