[發明專利]一種蛋白質Dhw1及其編碼基因dhw1和應用有效
| 申請號： | 201810079409.5 | 申請日： | 2018-01-26 |
| 公開（公告）號： | CN107987134B | 公開（公告）日： | 2018-08-31 |
| 發明（設計）人： | 丁宏偉 | 申請（專利權）人： | 上海國禮生物科技有限公司 |
| 主分類號： | C07K14/00 | 分類號： | C07K14/00;C12N15/11;C12N15/70;A01N43/50;A01P21/00 |
| 代理公司： | 上海諾衣知識產權代理事務所(普通合伙) 31298 | 代理人： | 衣然 |
| 地址： | 201417 上海*** | 國省代碼： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 蛋白質 dhw1 及其 編碼 基因 應用 | ||
1.一種蛋白質Dhw1，所述蛋白質Dhw1的氨基酸序列如SEQ ID No.1所示。
2.一種編碼權利要求1所述蛋白質Dhw1的基因dhw1，其特征在于，所述基因dhw1的核苷酸序列如SEQ ID No.2所示。
3.根據權利要求1所述的蛋白質Dhw1在促進農作物生長中的應用。
4.根據權利要求3所述的蛋白質Dhw1在促進小麥和塔菜生長中的應用。
5.一種生產權利要求1所述的蛋白質Dhw1的方法，其特征在于，包括以下步驟：
S1、人工合成權利要求2所述基因dhw1；
S2、得到轉化有S1中基因dhw1的工程菌種；
S3、將S2中的工程菌種經培養后收集菌體發酵液；
S4、將S3中的菌體發酵液進行分離純化得到蛋白質Dhw1。
6.根據權利要求5所述的方法，其特征在于，所述S1包括以下步驟：
S11：分別進行基因dhw1的單鏈oligo的設計與合成；
S12：利用PCR方法將S11中的單鏈oligo拼接成雙鏈DNA，即得到基因dhw1。
7.根據權利要求5所述的方法，其特征在于，所述S2包括以下步驟：
S21：將基因dhw1克隆到pET28a載體得到dhw1-pET28a載體；
S22：將S21中得到的dhw1-pET28a載體轉化至DH5a細胞，將轉化后的DH5a細胞中的質粒提取后進行基因測序；
S23：將基因測序結果正確的質粒轉化BL21感受態細胞，得到目的工程菌種。
8.根據權利要求5所述的方法，其特征在于，所述S3中的工程菌種在LB液體培養基中培養。
9.根據權利要求5所述的方法，其特征在于，所述S4中的分離純化包括以下步驟：將菌種發酵液離心后，破壁，再用硫酸銨鹽析，得到蛋白質Dhw1。
10.根據權利要求9所述的方法，其特征在于，采用超聲波進行破壁處理。
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