[發明專利]硝呋太爾制霉素陰道軟膠囊的微生物限度檢查方法

在審

• 申請號: 201810077334.7
• 申請日: 2018-01-26
• 公開（公告）號: CN108315384A
• 公開（公告）日: 2018-07-24
• 發明（設計）人: 翟衛東;張靜
• 申請（專利權）人: 北京朗依制藥有限公司
• 主分類號: C12Q1/18
• 分類號: C12Q1/18
• 代理公司: 青島發思特專利商標代理有限公司 37212
• 代理人: 任永哲

本發明屬于藥物檢測技術領域，具體涉及一種硝呋太爾制霉素陰道軟膠囊的微生物限度檢查方法。菌液制備，供試液制備，需氧菌、霉菌和酵母菌總數的測定，試驗組菌落數減去供試品組菌落數的值與菌液組菌落數的比值在0.5～2范圍內即為合格，控制菌的檢查。本發明樣品處理能夠更好的消除硝呋太爾，減少抑菌性，操作過程簡單，污染的幾率小，防止樣品在檢驗過程中假陰性的出現，患者用藥安全性高。

技術領域

本發明屬于藥物檢測技術領域，具體涉及一種硝呋太爾制霉素陰道軟膠囊的微生物限度檢查方法。

背景技術

細菌性陰道炎病癥為白帶增多，有腥臭味，性交后加重，可伴有外陰瘙癢或燒灼感。但10％～40％的患者并無任何癥狀，只是在體檢中才被發現。

念珠菌性陰道炎病癥為外陰瘙癢，外陰及陰道灼痛，白帶增多呈豆腐渣樣，有時伴有尿頻、尿痛，性交痛，婦科檢查時可見小陰唇內側及陰道粘膜上附著白色膜狀物，擦除后露出紅腫粘膜面，急性期可見受損的糜爛面。

硝呋太爾制霉素陰道軟膠囊，適應癥為細菌性陰道病、滴蟲性陰道炎、念珠菌性外陰陰道炎、陰道混合感染。硝呋太爾為硝基呋喃類衍生物，具有廣譜抗微生物作用，對滴蟲、細菌、白色念珠菌等均具有活性。

關于硝呋太爾制霉素陰道軟膠囊的微生物限度檢查方法至今尚未有報道。

發明內容

本發明的目的是提供一種硝呋太爾制霉素陰道軟膠囊的微生物限度檢查方法，解決硝呋太爾制霉素陰道軟膠囊微生物檢驗中的假陰性現象，患者用藥安全性高。

本發明所述的硝呋太爾制霉素陰道軟膠囊的微生物限度檢查方法，步驟如下：

(1)菌液制備

分別制備金黃色葡萄球菌菌懸液、銅綠假單胞菌菌懸液、枯草芽孢桿菌菌懸液、白色念珠菌菌懸液和黑曲霉孢子懸液；

(2)供試液制備

稱取硝呋太爾制霉素陰道軟膠囊供試品10g，用無菌剪刀剪碎置于無菌均質袋中，加80ml的43℃無菌十四烷酸異丙酯，用均質器拍打1min，倒入無菌三角瓶中，膠囊殼留在無菌均質袋中加入50ml的43℃pH7.0無菌氯化鈉-蛋白胨緩沖液用手把膠囊殼揉碎，再倒入三角瓶中震搖后，加入43℃pH7.0無菌氯化鈉-蛋白胨緩沖液350ml震搖靜置5分鐘，用無菌注射器吸取上層十四烷酸異丙酯和供試品混合的溶液棄去，再用無菌注射器加無菌溶出儀針取水層240-260ml移入無菌三角瓶中，作為1：40的供試液；

(3)需氧菌、霉菌和酵母菌總數的測定

需氧菌為金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌、枯草芽孢桿菌、白色念珠菌和黑曲霉，霉菌為黑曲霉，酵母菌為白色念珠菌。

①試驗組：取1:40供試液1ml，置43℃含3％聚山梨酯80和0.3％大豆卵磷脂的pH7.0無菌氯化鈉-蛋白胨緩沖液500ml中，經薄膜過濾法處理，在最后一次過濾時分別加入金黃色葡萄球菌菌懸液、銅綠假單胞菌菌懸液、枯草芽孢桿菌菌懸液、白色念珠菌菌懸液和黑曲霉孢子懸液，取下濾膜貼于胰酪大豆胨瓊脂培養基上置30-35℃培養箱中培養3天；另外再將分別加入白色念珠菌菌懸液和黑曲霉孢子懸液的濾膜貼于沙氏葡萄糖瓊脂培養基上置20-25℃培養箱中培養5天；

②菌液組：取pH7.0無菌氯化鈉-蛋白胨緩沖液代替供試液，按試驗組操作加入菌液，測定所加的菌液的菌數；

③供試品組：取制備好的供試液，以pH7.0無菌氯化鈉-蛋白胨緩沖液代替菌液，其他同試驗組操作；胰酪大豆胨瓊脂培養基上置30-35℃培養箱中培養5天；沙氏葡萄糖瓊脂培養基上置20-25℃培養箱中培養7天；

④培養后進行需氧菌、霉菌和酵母菌總數的測定，

試驗組菌落數減去供試品組菌落數的值與菌液組菌落數的比值在0.5～2范圍內即為合格；