[發明專利]一種太子參破壁飲片的質量檢測方法

在審

• 申請號: 201810074812.9
• 申請日: 2018-01-25
• 公開（公告）號: CN108287211A
• 公開（公告）日: 2018-07-17
• 發明（設計）人: 黃勇;徐浩坤;謝宇;苗旭輝
• 申請（專利權）人: 貴州廣濟堂藥業有限公司
• 主分類號: G01N30/90
• 分類號: G01N30/90;G01N5/04;G01N21/78;G01N15/02;C12Q1/06
• 代理公司: 貴州貴達律師事務所 52111
• 代理人: 張佳佳

1.一種太子參破壁飲片的質量檢測方法，包括性狀檢測、鑒別、檢查及浸出物測定。

2.根據權利要求1所述的一種太子參破壁飲片的質量檢測方法，其中，所述性狀檢測為：

取太子參破壁飲片樣品適量，平鋪于光滑紙上5-7cm²，將其表面壓平，在明亮處觀察，太子參破壁飲片為淡黃白色、類白色至黃色粉末，氣微、味微甘，色澤均勻一致、無花紋與色斑。

3.根據權利要求1所述的一種太子參破壁飲片的質量檢測方法，其中，所述鑒別采用薄層色譜法，具體為：

取太子參破壁飲片樣品1-1.5g，加甲醇10-15ml，溫浸，振搖30-40分鐘，濾過，濾液濃縮至1-1.5ml，作為供試品溶液；另取太子參對照藥材1-1.5g，加甲醇10-15ml，溫浸，振搖30-40分鐘，濾過，濾液濃縮至1-1.5ml，制成對照藥材溶液；照中國藥典2015年版四部通則0502薄層色譜法試驗，吸取供試品溶液和對照藥材溶液各1-1.5μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以體積比為4:1:1的正丁醇-冰醋酸-水為展開劑，將硅膠G薄層板置于用展開劑預飽和15-20分鐘的展開缸內，展開，取出，晾干，噴以0.2％茚三酮乙醇溶液，在100-105℃加熱到斑點清晰；供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，應顯相同顏色的斑點。

4.根據權利要求1所述的一種太子參的質量檢測方法，其中，所述檢查包括水分檢查、總灰分檢查、二氧化硫殘留量檢查、粒徑分布檢查、未破壁細胞限度檢查及微生物限度檢查，具體為：

(1)水分檢查：

取太子參破壁飲片樣品2.5-3.5g，精密稱定，平鋪于干燥至恒重的扁形稱量瓶中，厚度不超過5mm，打開瓶蓋在100-105℃干燥5-6小時，將瓶蓋蓋好，移置干燥器中，冷卻30-35分鐘，精密稱定，再在上述溫度干燥1-1.5小時，冷卻，稱重，至連續兩次稱重的差異不超過5mg為止；水分檢查中，太子參破壁飲片水分值為不得超過14.0％；

(2)總灰分檢查：

取太子參破壁飲片樣品5-6g，精密稱定，置熾灼至恒重的坩堝中，稱定重量，準確至0.01g，緩緩熾熱，注意避免燃燒，至完全炭化時，逐漸升高溫度至600-630℃，使完全灰化并恒重；總灰分檢查中，太子參破壁飲片灰分值為不得超過4.0％；

(3)二氧化硫殘留量檢查：

取太子參破壁飲片樣品9.5-10.5g，精密稱定，若二氧化硫殘留量較高，超過1000mg/kg，可適當減少取樣量，但應不少于5g；置兩頸圓底燒瓶中，加水300-400ml；打開回流冷凝管開關給水，將冷凝管的上端口出連接一橡膠導氣管置于100ml錐形瓶底部；錐形瓶內加入3-4％過氧化氫溶液50-60ml作為吸收液，橡膠導氣管的末端應在吸收液液面以下；使用前，在吸收液中加入3-4滴2.5-3mg/ml甲基紅乙醇溶液指示劑，并用0.01mol/L氫氧化鈉滴定液滴定至黃色；開通氮氣，使用流量計調節氣體流量至約0.2-0.3L/min；打開分液漏斗的活塞，使6-6.5mol/L的鹽酸溶液10-11ml流入蒸餾瓶，立即加熱兩頸燒瓶內的溶液至沸，并保持微沸；燒瓶內的水沸騰1.5-1.8h后，停止加熱；吸收液放冷后，置于磁力攪拌器上不斷攪拌；用0.01mol/L的氫氧化鈉滴定，至黃色持續時間20秒不褪，并將滴定結果用空白實驗校正；二氧化硫殘留量檢查中，太子參破壁飲片的二氧化硫殘留量的限度為不得超過150mg/kg；

(4)粒徑分布檢查：

取太子參破壁飲片樣品0.5-1g，用激光粒度分析儀測定粉體粒徑；粒徑分布檢查中，粒徑分布D₉₀不得大于45μm；

(5)未破壁細胞限度檢查：

稱取太子參破壁飲片樣品0.010g，加入體積比為1:1的水合氯醛試液–水0.5-1ml，超聲處理至完全溶散，吸取所有溶液裝片，每片以不溢出、無氣泡、分布均勻為度，在100倍顯微鏡下檢視，計算大于100μm且完整的細胞的顆粒數目，其中若多個完整的細胞連成一片，且整片也超過100μm的，以整片為一個計算；未破壁細胞限度檢查中，大于100μm且完整的細胞的顆粒數目，不得超過100個；

(6)微生物限度檢查：

取太子參破壁飲片樣品10g，加入至200ml胰酪大豆胨液體培養基稀釋瓶中，振搖，混勻制成1:20的供試液；吸取混勻的1:20供試液1ml，在離稀釋劑面上約1cm處沿管壁注入裝有9ml的TSB稀釋劑的試管中，混勻成1:200的稀釋液；吸取混勻的1:200稀釋液1ml，在離稀釋劑面上約1cm處沿管壁注入裝有9ml的TSB稀釋劑的試管中，混勻成1:2000的稀釋液；

a、需氧菌總數、霉菌和酵母菌總數檢查：

采用平皿法計數，取上述1:20供試液和1:200、1:2000的稀釋液各2ml注入2個平皿中，每平皿各1ml，再取1ml稀釋液至平皿中作為陰性對照，將胰酪大豆胨瓊脂培養傾注入平皿，每皿約20ml，隨時轉動平皿，使樣液與瓊脂混勻后置水平臺上待凝；取上述1:20供試液2ml注入2個平皿中，每平皿各1ml，再取1ml稀釋液至平皿中作為陰性對照，將沙氏葡萄糖瓊脂培養基傾注入平皿，每皿約20ml，隨時轉動平皿，使樣液與瓊脂混勻后置水平臺上待凝；

b、耐膽鹽革蘭陰性菌檢查：

將上述1:20供試液在20-25℃培養1.9-2.3小時；取相當于0.1g、0.01g、0.001g和0.0001g供試品的預培養物分別接種至10ml腸道菌增菌液體培養基中，取2份腸道菌增菌液體培養基分別加入不大于100cfu的大腸埃希菌和不大于100cfu的銅綠假單胞菌做陽性對照，取1份腸道菌增菌液體培養基加入與供試液等量的稀釋液作陰性對照，30-35℃培養24-48小時；取上述每一培養物分別劃線接種于紫紅膽鹽葡萄糖瓊脂培養基平板上，30-35℃培養18-24小時；

c、沙門菌檢查：

另稱取太子參破壁飲片樣品10g，加入至200ml胰酪大豆胨液體培養基稀釋瓶中，振搖，混勻制成1:20的供試液，30-35℃培養18-24小時；取上述培養物0.1ml接種至10ml RV沙門菌增菌液體培養基中，取一份10ml RV沙門菌增菌液體培養基加入不大于100cfu的乙型副傷寒沙門菌做陽性對照，取1份10ml RV沙門菌增菌液體培養基加入0.1ml稀釋液作陰性對照，30-35℃培養18-24小時；取上述每一培養物分別劃線接種于木糖賴氨酸脫氧膽酸鹽瓊脂培養基平板上，30-35℃培養18-48小時；

微生物限度檢查中，需氧菌總數應小于10⁴cfu/g、霉菌和酵母菌數總數應小于10²cfu/g；耐膽鹽革蘭陰性菌應小于10⁴cfu/g；每10g太子參破壁飲片沙門菌不得檢出。

5.根據權利要求1所述的一種太子參破壁飲片的質量控制方法，其中，所述浸出物測定為：

取太子參破壁飲片樣品4-5g，精密稱定，置200ml的錐形瓶中，精密加水100-120ml，密塞，冷浸，前6-6.5小時內時時振搖，再靜置18-18.5小時，用干燥濾器迅速濾過，精密量取續濾液20-25ml，置已干燥至恒重的蒸發皿中，在水浴上蒸干后，于100-105℃干燥3-3.5小時，置干燥器中冷卻30-35分鐘，迅速精密稱定重量，以干燥品計算供試品中浸出物的含量；浸出物測定中，太子參破壁飲片浸出物含量不得少于25.0％。