[發明專利]一種多菌靈的比色檢測方法在審
| 申請號: | 201810072724.5 | 申請日: | 2018-01-25 |
| 公開(公告)號: | CN108426874A | 公開(公告)日: | 2018-08-21 |
| 發明(設計)人: | 何曉曉;王柯敏;葉潤枝;黃金;上官瑾芳 | 申請(專利權)人: | 湖南大學 |
| 主分類號: | G01N21/78 | 分類號: | G01N21/78;G01N21/33 |
| 代理公司: | 湖南兆弘專利事務所(普通合伙) 43008 | 代理人: | 黃麗 |
| 地址: | 410082 湖*** | 國省代碼: | 湖南;43 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 多菌靈 金納米顆粒 比色檢測 混合反應 紫外可見分光光度法 無機鹽 待測樣品 定量檢測 定性判斷 溶液體系 顏色變化 靈敏性 菌靈 檢測 | ||
1.一種多菌靈的比色檢測方法,其特征在于,包括下述的步驟:
將待測樣品與DNA在水溶液中進行第一次混合反應,所述DNA包含SEQ ID NO.1所示的序列;
然后加入金納米顆粒,使未與多菌靈結合的DNA吸附在金納米顆粒上;
之后加入無機鹽進行第二次混合反應,通過溶液體系顏色變化定性判斷有無多菌靈,通過采用紫外可見分光光度法定量檢測多菌靈的濃度。
2.根據權利要求1所述的多菌靈的比色檢測方法,其特征在于,所述第一次混合反應和第二次混合反應均在室溫條件下進行。
3.根據權利要求1或2所述的多菌靈的比色檢測方法,其特征在于,所述第一次混合反應的時間為10min~20min,所述第二次混合反應的時間為10min~20min。
4.根據權利要求1所述的多菌靈的比色檢測方法,其特征在于,所述第一次混合反應之前,先對DNA鏈退火處理,使DNA解鏈,然后再與待測樣品反應。
5.根據權利要求1或4所述的多菌靈的比色檢測方法,其特征在于,所述金納米顆粒的粒徑為11nm~15nm。
6.根據權利要求1或4所述的多菌靈的比色檢測方法,其特征在于,所述無機鹽為氯化鈉。
7.根據權利要求1或4所述的多菌靈的比色檢測方法,其特征在于,DNA、金納米顆粒和無機鹽在第二次混合反應后的終濃度為:
DNA或RNA0.3μmol/L~0.35μmol/L
金納米顆粒3nmol/L~3.5nmol/L
無機鹽15mmol/L~45mmol/L。
8.根據權利要求1或2所述的多菌靈的比色檢測方法,其特征在于,采用紫外可見分光光度法進行定量檢測時,記錄其522nm和646nm的吸光值,建立吸光相對值與多菌靈濃度的標準曲線。
9.根據權利要求8所述的多菌靈的比色檢測方法,其特征在于,所述標準曲線的回歸方程為:y=0.3745x+0.0973,其中x為多菌靈濃度,單位為μmol/L,y為吸光度相對值A646/A522。
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