[發(fā)明專利]不同體積數(shù)字PCR定量分析方法在審
| 申請?zhí)枺?/td> | 201810070368.3 | 申請日： | 2018-01-24 |
| 公開（公告）號： | CN110066856A | 公開（公告）日： | 2019-07-30 |
| 發(fā)明（設計）人： | 盛廣濟 | 申請（專利權）人： | 思納福（北京）醫(yī)療科技有限公司 |
| 主分類號： | C12Q1/6851 | 分類號： | C12Q1/6851 |
| 代理公司： | 北京華進京聯(lián)知識產權代理有限公司 11606 | 代理人： | 趙永輝 |
| 地址： | 100094 北京市海淀區(qū)*** | 國省代碼： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 數(shù)字PCR 定量分析 核酸擴增反應 置信區(qū)間 標準差 微液滴 檢測 個數(shù)量級 耗材成本 起始拷貝 核酸 獲知 | ||
1.一種不同體積數(shù)字PCR的定量分析方法，其特征在于，包括：
S4310：獲取所有微液滴體積v1，v2，...vm，所述體積為v1，v2，...vm依次對應的微液滴的數(shù)目n1，n2，…，nm，以及所述體積為v1，v2，...vm依次對應的微液滴核酸擴增后的陰性微液滴數(shù)目b1，b2，…，bm；
S4320：根據(jù)所有微液滴核酸擴增后的相關參數(shù)v1、v2，...vm，n1，n2，…，nm，b1，b2，…，bm，構建關于待測核酸擴增反應液濃度c的聯(lián)合二項分布函數(shù)f(c)；
S4330：根據(jù)聯(lián)合二項分布函數(shù)f(c)，求使得所述聯(lián)合二項分布函數(shù)f(c)取極值時c的值；
S4340：將所述聯(lián)合二項分布函數(shù)f(c)轉化為關于ln(c)的聯(lián)合二項分布函數(shù)F(Λ)，獲得關于ln(c)的標準差以及置信區(qū)間；
S4350：根據(jù)ln(c)的標準差以及置信區(qū)間，獲取所述待測核酸擴增反應液濃度c的標準差以及置信區(qū)間。
2.如權利要求1所述的不同體積數(shù)字PCR的定量分析方法，其特征在于，所述S4310包括：
S4311：將含有目標核酸的樣品溶液微滴化，獲得多個不同體積v1，v2，...vm的微液滴，所述微液滴體積為v1，v2，...vm依次對應的微液滴的數(shù)目n1，n2，…，nm；
S4313：將所有微液滴進行核酸擴增，并拍照檢測，獲得所述所有微液滴的熒光圖像；
S4315：根據(jù)所述所有微液滴的熒光圖像，獲取所述所有微液滴的體積為v1，v2，...vm依次對應的核酸擴增后的陰性微液滴數(shù)目b1，b2，…，bm。
3.如權利要求1所述的不同體積數(shù)字PCR的定量分析方法，其特征在于，所述S4310還包括：
S4312：將含有目標核酸的樣品溶液微滴化，形成多個微液滴；
S4314：將所述多個微液滴進行核酸擴增，并拍照檢測，獲得所有微液滴核酸擴增后的熒光圖像；
S4316：根據(jù)所述熒光圖像，獲取所述所有微液滴核酸擴增后的體積，所述體積分別為v1，v2，...vm，所述體積分別為v1，v2，...vm依次對應的核酸擴增后的微液滴的數(shù)目n1，n2，…，nm，以及所述體積為v1，v2，...vm依次對應的核酸擴增后的陰性微液滴數(shù)目b1，b2，…，bm。
4.如權利要求1所述的不同體積數(shù)字PCR的定量分析方法，其特征在于，所述S4320構建關于待測核酸擴增反應液濃度c的聯(lián)合二項分布函數(shù)f(c)為：
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