[發明專利]一種牛奶中A2-β-酪蛋白的分離方法

在審

• 申請號: 201810065481.2
• 申請日: 2018-01-23
• 公開（公告）號: CN108191967A
• 公開（公告）日: 2018-06-22
• 發明（設計）人: 劉虎傳;郭建;譚蓮英;范光彩;錢成林;宋艷梅;夏忠悅;林永裕;何佳燕;朱菲;張海濤;李伯
• 申請（專利權）人: 新希望雙喜乳業（蘇州）有限公司;新希望乳業股份有限公司
• 主分類號: C07K14/47
• 分類號: C07K14/47;C07K1/14
• 代理公司: 北京遠大卓悅知識產權代理事務所(普通合伙) 11369
• 代理人: 韓飛

1.一種牛奶中A2-β-酪蛋白的分離方法，其特征在于，包括下述步驟：

1)將脫脂的A2型牛奶在25-35℃下堿調pH值到10.5-11.5；

2)在攪拌條件下向脫脂奶中加入鈣鹽，使脫脂奶體系中鈣離子濃度在0.05-0.08mol/L，酸調體系pH值至中性，離心，保留沉淀；

3)用純凈水洗滌沉淀1-2次，向沉淀中加入pH值為10.5-11.5的堿溶液，并在2-4℃下冷凍攪拌2h，得到蛋白溶液；

4)酸調蛋白溶液pH值到4-5，在2-4℃下冷凍離心，收集上清液并轉移至另一燒杯中，在25-35℃下保持25-35min，離心，保留沉淀；

5)洗滌沉淀，干燥后得到目標蛋白，并在-20℃冷凍保存目標蛋白。

2.根據權利要求1所述的分離方法，其特征在于，步驟1)中所述脫脂的A2型牛奶的制備方法：將A2型牛奶在2℃下冷凍離心，留取下層的脫脂奶。

3.根據權利要求1所述的分離方法，其特征在于，步驟1)中所述堿為1mol/L氫氧化鈉溶液，堿調溫度為30℃，堿調pH值到11。

4.根據權利要求1所述的分離方法，其特征在于，步驟2)中所述鈣鹽為0.5mol/L氯化鈣溶液，脫脂奶體系中鈣離子濃度為0.065mol/L；所述酸為1mol/L鹽酸；所述離心時間10min，轉速4000r/min。

5.根據權利要求1所述的分離方法，其特征在于，步驟3)中所述洗滌為向沉淀中加入純凈水并攪拌至呈乳濁液，將該乳濁液在4000r/min下離心10min，保留沉淀，即為固體蛋白。

6.根據權利要求1所述的分離方法，其特征在于，步驟3)中所述堿溶液的pH值為11，冷凍攪拌溫度為2℃。

7.根據權利要求1所述的分離方法，其特征在于，步驟4)中所述酸為1mol/L或者0.5mol/L鹽酸，酸調蛋白溶液pH值到4.6；所述冷凍離心轉速6000r/min，時間10min，溫度2℃。

8.根據權利要求1所述的分離方法，其特征在于，步驟4)中所述轉移后的上清液水浴升溫至30℃，并保持30min，然后在不低于15℃的溫度下以6000r/min離心10min，保留沉淀。

9.根據權利要求1所述的分離方法，其特征在于，步驟5)中所述洗滌沉淀為用純凈水和丙酮各洗滌兩遍；所述干燥為在45℃下烘干或者冷凍干燥。

10.根據權利要求1-9中任一項所述的分離方法，其特征在于，所述分離方法能用于分離A1-β-酪蛋白或者同時含有A1-β-酪蛋白和A2-β-酪蛋白的混合β-酪蛋白。