[發明專利]一種鹿瓜多肽的制備方法及鹿瓜多肽在制備特殊醫學用途食品中的應用

有效

• 申請號: 201810063537.0
• 申請日: 2018-01-23
• 公開（公告）號: CN107988302B
• 公開（公告）日: 2020-11-13
• 發明（設計）人: 王雷;潘風光;王爽
• 申請（專利權）人: 吉林省吉諾生物工程有限責任公司
• 主分類號: C12P21/06
• 分類號: C12P21/06;C07K1/34;A61K38/01;A61P19/02;A61P29/00;A61P19/08
• 代理公司: 北京集佳知識產權代理有限公司 11227
• 代理人: 溫可睿;趙青朵

本發明涉及生物技術領域，尤其涉及一種鹿瓜多肽的制備方法及鹿瓜多肽在制備特殊醫學用途食品中的應用。本發明提供的鹿瓜多肽，以復合蛋白酶對提取液進行酶解，以硫酸鈣去除鞣質及生物堿，避免了致敏物質的產生，同時也提高了產品的穩定性，將本發明提供的多肽制成粉，可以通過口服方式給藥，提高了給藥的便利性。實驗表明，本發明提供的鹿瓜多肽能夠有效降低模型鼠關節液中的IL?1β、TNF?α含量，與對照組呈現顯著性差異，p0.05。

技術領域

本發明涉及生物技術領域，尤其涉及一種鹿瓜多肽的制備方法及鹿瓜多肽在制備特殊醫學用途食品中的應用。

背景技術

鹿瓜多肽是鹿科動物梅花鹿(Cervus Nippon Temmick)的骨骼和葫蘆科植物甜瓜(Cucumis melo L.)的干燥成熟種子，經分別提取后制成的產品，其富含的多種游離氨基酸，為骨細胞合成BMPs、TGF-β，FGF等骨源性生物因子提供原料，促進骨源性生物因子的合成。有機鈣、磷離子可參與鈣磷代謝，維持骨容量。臨床上，鹿瓜多肽是一種適用于風濕、類風濕性關節炎、骨折的早期愈合、骨關節炎、腰腿疼痛及創傷恢復等的注射液，為淡黃色澄明液體。

然而，由于鹿瓜多肽提取物中常含有生物堿和鞣質。鞣質、生物堿與蛋白質能夠發生反應生成不溶于水且不易被消化吸收的沉淀，鞣質與生物堿也能結合形成不溶于水且不易被消化吸收的沉淀，造成過敏反應及多肽功能的喪失。目前，臨床中已經獲得多例因使用鹿瓜多肽注射液時出現的過敏反應病例。

如何在兼顧鹿瓜多肽功效的同時，提高產品的穩定性、降低過敏反應的發生率仍在不斷的研究中。

發明內容

有鑒于此，本發明要解決的技術問題在于提供一種鹿瓜多肽的制備方法及鹿瓜多肽在制備特殊醫學用途食品中的應用，本發明提供的鹿瓜多肽穩定性高，過敏反應的發生率低，且療效得到提高。

本發明提供的鹿瓜多肽的制備方法包括：

步驟1：鹿骨粉碎后以水于80℃～110℃、0.05MPa～0.5MPa提取3～5次；提取液經澄清后，上清液與復合蛋白酶混合，于50℃、pH值為5.5～7.5，1000轉/min～1500轉/min的條件下進行攪拌反應1h～2h；加熱滅酶后，分離上清液，依次通過6kDa、3kDa濾膜，得到鹿骨多肽提取液；

步驟2：甜瓜籽以水后于80℃～110℃、0.05MPa～0.5MPa提取3～5次；提取液經澄清后，上清液與復合蛋白酶混合，于50℃、pH值為5.5～7.5，1000轉/min～1500轉/min的條件下進行攪拌反應1h～2h；加熱滅酶后，分離上清液，依次通過6kDa、3kDa濾膜，得到甜瓜籽多肽提取液；

步驟3：按照鹿骨多肽：甜瓜籽多肽＝(3～5):1的質量比，將鹿骨多肽提取液與甜瓜籽多肽提取液混合，在混合液中加入乳酸鈣至其質量分數為3％～5％，制得含有鹿瓜多肽的溶液。

一些實施例中，鹿骨粉碎后以水于85℃、0.1MPa～0.3MPa的條件下提取3～5次。

另一些實施例中，鹿骨粉碎后以水于95℃、0.15MPa～0.4MPa的條件下提取3～5次。

另一些實施例中，鹿骨粉碎后以水于105℃、0.35MPa～0.5MPa的條件下提取3～5次。

本發明實施例中，所述鹿骨與水的質量比為1:2，所述提取的pH值為6～7，鹿骨的粒度為60目。

本發明實施例中，步驟1中所述澄清包括：

步驟①：調節pH值為3.5～5.5，3℃～8℃靜置15h～20h后，經50微米孔徑陶瓷膜過濾，濾液用1500～2000轉/min離心機離心20min，取上清液；