[發(fā)明專利]從椰麩中制備對(duì)超氧陰離子具有高清除活性的清蛋白的方法及抗氧化劑

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201810060879.7
• 申請(qǐng)日: 2018-01-22
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN108191961A
• 公開(kāi)（公告）日: 2018-06-22
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 鄭亞軍;李艷;徐建國(guó);郜剛;張亮亮;郭玉如
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 山西師范大學(xué)
• 主分類號(hào): C07K14/415
• 分類號(hào): C07K14/415;C07K1/36;C07K1/34;C07K1/18;A61K8/64
• 代理公司: 太原高欣科創(chuàng)專利代理事務(wù)所(普通合伙) 14109
• 代理人: 崔雪花;冷錦超

本發(fā)明公開(kāi)了從椰麩中制備對(duì)超氧陰離子具有高清除活性的清蛋白的方法及抗氧化劑，屬于農(nóng)產(chǎn)品采后加工領(lǐng)域；以脫脂椰麩為原料，采用稀鹽溶液充分提取椰麩清蛋白，其次針對(duì)清蛋白和球蛋白溶解度的差異，采用膜透析分離法和二次高速離心去除椰麩清蛋白中的球蛋白雜質(zhì)；再次，以對(duì)超氧陰離子自由基的清除率為評(píng)價(jià)指標(biāo)，采用色譜分離技術(shù)對(duì)椰麩清蛋白進(jìn)行進(jìn)一步純化和分離；本發(fā)明篩有效清除了椰麩清蛋白中干擾性強(qiáng)且難去除的球蛋白，得到的椰麩清蛋白具有較高的SOD活性，濃度為100μg/mL時(shí)，對(duì)O₂^??的清除率達(dá)84.14%~87.92%，可廣泛應(yīng)用于化妝品、食品工業(yè)中，同時(shí)，利于提高椰麩的精深加工和綜合利用水平。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及農(nóng)產(chǎn)品采后加工領(lǐng)域，具體涉及一種從椰麩中制備對(duì)超氧陰離子具有高清除活性清蛋白的方法。

背景技術(shù)

現(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究表明，人體衰老和許多疾病的發(fā)生與體內(nèi)自由基的失衡密切相關(guān)；而在食品工業(yè)中，食品質(zhì)量的退化及腐敗變質(zhì)也與食品內(nèi)過(guò)量自由基的產(chǎn)生和氧化-還原反應(yīng)失衡有關(guān)。自由基是獨(dú)立存在的、帶有不成對(duì)電子的化學(xué)性質(zhì)極活潑的原子或原子團(tuán)。正常機(jī)體內(nèi)自由基的產(chǎn)生和消失存在著動(dòng)態(tài)的平衡。然而，當(dāng)受到某些因素的誘導(dǎo)（如過(guò)大的心理壓力、吸煙、環(huán)境污染、微生物侵染等）時(shí)，機(jī)體內(nèi)的氧化-還原反應(yīng)失去平衡，產(chǎn)生過(guò)量的氧自由基。過(guò)量的氧自由基會(huì)進(jìn)一步誘發(fā)氧化反應(yīng)，產(chǎn)生更多的自由基，誘導(dǎo)機(jī)體內(nèi)核酸、脂類、蛋白質(zhì)等生物大分子發(fā)生反應(yīng)，進(jìn)而造成細(xì)胞氧化損傷，最終導(dǎo)致一系列疾病的發(fā)生。在氧自由基中，超氧陰離子自由基（O₂^-·）的性質(zhì)非常活潑且毒性很大。O₂^-·是多種氧化反應(yīng)的誘發(fā)劑，它能與活細(xì)胞中任何分子發(fā)生反應(yīng)，且反應(yīng)速度極快，能產(chǎn)生更多種類的自由基；這些自由基又可以引發(fā)等多的氧化反應(yīng)，使細(xì)胞內(nèi)產(chǎn)生氧化鏈?zhǔn)椒磻?yīng)；同時(shí)，O₂^-·的毒性也是機(jī)體發(fā)生氧中毒的主要原因，由它引起的損傷表現(xiàn)在使核酸斷鏈，多糖解聚，不飽和脂肪酸過(guò)氧化，線粒體氧化磷酸化與蛋白質(zhì)羰基化等。因此，及時(shí)有效地清除機(jī)體內(nèi)過(guò)量的O₂^-·，是維護(hù)機(jī)體健康、保持食品質(zhì)量的有效途徑。目前廣泛應(yīng)用的O₂^-·清除劑主要是人工合成類抗氧化劑，包括BHT（二丁基羥基甲苯）、BHA（丁基羥基茴香醚）、TBHQ（叔丁基對(duì)苯二酚）等。這些抗氧化劑對(duì)O₂^-·的清除能力都較強(qiáng)，生產(chǎn)成本也相對(duì)較低。但近年來(lái)的研究發(fā)現(xiàn)，BHT、BHA、TBHQ會(huì)引起動(dòng)物肝臟擴(kuò)大，增加微粒體酶的活性，具有一定的毒副作用。特別是1983年日本的伊東等人報(bào)道了BHA的致癌性后，世界各國(guó)對(duì)BHT、BHA等人工合成抗氧化劑在食品工業(yè)中的使用進(jìn)行嚴(yán)格限制。與此同時(shí)，天然抗氧化劑的開(kāi)發(fā)和利用受到日益廣泛的關(guān)注。研究表明，動(dòng)植物中的一些天然成分如多酚、多糖與活性蛋白質(zhì)等，既具有較高的O₂^-·清除能力，且無(wú)毒副作用，加之來(lái)源豐富、成本低廉，因此具備開(kāi)發(fā)為天然O₂^-·清除劑的潛力。其中，超氧化物歧化酶（Superoxide dismutase, SOD）是廣泛存在于動(dòng)植物中、能夠有效清除體內(nèi)清除O₂^-·的物質(zhì)。