[發(fā)明專利]檢測水產(chǎn)品中孔雀石綠、結(jié)晶紫及其代謝產(chǎn)物的前處理方法

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201810060294.5
• 申請日: 2018-01-22
• 公開（公告）號(hào): CN108387412A
• 公開（公告）日: 2018-08-10
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 李昊;曾青竹;李孟研
• 申請（專利權(quán)）人: 福州大學(xué)
• 主分類號(hào): G01N1/28
• 分類號(hào): G01N1/28;G01N1/38
• 代理公司: 福州元?jiǎng)?chuàng)專利商標(biāo)代理有限公司 35100
• 代理人: 蔡學(xué)俊;高輝

本發(fā)明公開了一種檢測水產(chǎn)品中孔雀石綠、結(jié)晶紫及其代謝產(chǎn)物的前處理方法，屬于食品安全分析領(lǐng)域中的樣品前處理。本發(fā)明方法包括待檢樣品均質(zhì)、離心、固相萃取柱的活化、上樣、洗脫等步驟。本發(fā)明具有簡便易行、快速高效、準(zhǔn)確度及回收率高等優(yōu)點(diǎn)，可作為水產(chǎn)品中孔雀石綠、隱性孔雀石綠、結(jié)晶紫、隱性結(jié)晶紫殘留量的常規(guī)檢測方法。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于食品安全分析領(lǐng)域，具體涉及一種檢測水產(chǎn)品中孔雀石綠、結(jié)晶紫及代謝產(chǎn)物的前處理方法。

背景技術(shù)

孔雀石綠、結(jié)晶紫是一種合成的三苯基甲烷類工業(yè)染料，最早被應(yīng)用于紡織工業(yè)，因其具有抗菌效果好、價(jià)格低廉等特點(diǎn)，又被廣泛用于預(yù)防治療魚類養(yǎng)殖中常見的水霉病、鰓霉病、小瓜蟲病等。但三苯甲烷類化合物具有高毒、高殘留和致癌、致畸、致突變等危害，而且孔雀石綠和結(jié)晶紫經(jīng)生物體代謝后會(huì)產(chǎn)生危害性更強(qiáng)的隱色孔雀石綠和隱色結(jié)晶紫。因此，我國及美國、加拿大、歐盟等國均禁止其作為人類食用魚的獸藥使用。然而，在眾多水產(chǎn)品的養(yǎng)殖以及運(yùn)輸過程中仍在使用孔雀石綠。因此，為了保證食品安全以及滿足進(jìn)出口檢測的要求，建立能夠準(zhǔn)確測定水產(chǎn)品中孔雀石綠、結(jié)晶紫及代謝產(chǎn)物的有效檢測方法十分重要。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于提供一種檢測水產(chǎn)品中孔雀石綠、結(jié)晶紫及其代謝產(chǎn)物的前處理方法，其具有簡便易行、快速高效、過濾后可直接上樣等特點(diǎn)，可作為水產(chǎn)品中孔雀石綠、隱性孔雀石綠、結(jié)晶紫、隱性結(jié)晶紫殘留量的常規(guī)檢測方法。

為實(shí)現(xiàn)此目的，本發(fā)明采用如下技術(shù)方案：

一種檢測水產(chǎn)品中孔雀石綠、結(jié)晶紫及其代謝產(chǎn)物的前處理方法，其包括以下步驟：

（1）精密稱取5 g樣品于離心管中，加入20mL混合有機(jī)溶劑，然后以10000 rpm/min均質(zhì)2 min，再加入5g堿性氧化鋁，振蕩1 min，然后4500 rpm/min離心10 min；所述混合有機(jī)溶劑是由乙腈、甲酸按體積比3:1混合而成；

（2）取5 mL步驟（1）所得上清液，加5 mL水稀釋，得10mL樣品溶液；

（3）C₁₈-中性氧化鋁固相萃取柱的活化：將C₁₈-中性氧化鋁固相萃取柱先用含2vol%甲酸的乙腈溶液淋洗，然后用含20vol%甲酸的乙腈溶液沖洗除雜，再用蒸餾水沖洗平衡后，使柱中水面高于柱面進(jìn)行保存；

C₁₈-中性氧化鋁固相萃取柱使用后的再生方法為：先用含20vol%甲酸的乙腈溶液沖洗除雜，再用蒸餾水沖洗平衡1~2次，最后使柱中水面高于柱面進(jìn)行保存；

（4）將樣品溶液過柱，控制流速為1滴/s，滴完后用5 mL含20vol%乙腈的水溶液淋洗，真空抽干，再用2.0 mL含2vol%甲酸的乙腈溶液洗脫，收集洗脫液于5 mL刻度試管中，加入0.1mol/L的乙酸銨溶液定容至2.5 mL刻度；

（5）渦旋混勻，過濾，上機(jī)檢驗(yàn)。

所述代謝產(chǎn)物包括隱性孔雀石綠、隱性結(jié)晶紫。

本發(fā)明所涉及的一種檢測水產(chǎn)品中孔雀石綠、結(jié)晶紫的前處理新方法的顯著特點(diǎn)歸結(jié)如下：

1）本發(fā)明在行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)SN/T 1768-2006以及國際標(biāo)準(zhǔn)的基礎(chǔ)上增加了固相萃取柱技術(shù)，固相萃取柱具有極高的吸附作用，并且能很快的洗脫下來，可顯著提高檢測的準(zhǔn)確性與高效性；

2）本發(fā)明具有簡便易行、快速高效、準(zhǔn)確度及回收率高等優(yōu)點(diǎn)，可作為水產(chǎn)品中孔雀石綠、隱性孔雀石綠、結(jié)晶紫、隱性結(jié)晶紫殘留量的常規(guī)檢測方法。

具體實(shí)施方式

為了使本發(fā)明所述的內(nèi)容更加便于理解，下面結(jié)合具體實(shí)施方式對本發(fā)明所述的技術(shù)方案做進(jìn)一步的說明，但是本發(fā)明不僅限于此。